細胞庫編號：bio-73113            

細胞株名稱：NR8383  大鼠肺泡巨噬細胞

種屬：大鼠

組織來源：肺，巨噬細胞，肺泡

生長特性：貼壁和懸浮混合生長

形態(tài)特征：圓形有折光性。

細胞特征：NR8383 (正常大鼠，1983年8月3日)來源于肺灌洗時的正常大鼠肺泡巨噬細胞。 細胞在gerbil肺細胞連續(xù)培養(yǎng)液存在下培養(yǎng)了大約8-9個月。 隨后，不再需要外源生長因子。通過有限稀釋法從單個細胞克隆并亞克隆NR8383細胞，并三次用軟瓊脂亞克隆。 細胞表現(xiàn)出巨噬細胞的特性，吞噬酵母多糖和銅綠，非特異性脂酶活性，F(xiàn)c受體，氧化降解；分泌IL-1, TNF beta和IL-6，可重復地響應外源生長因子。 NR8383細胞響應博萊霉素，分泌TGF beta前體。在博萊霉素刺激下，TGF beta mRNA表達也上升。 細胞對內毒素敏感。 1-10 鈉克/毫升的LPS水平抑制增生達50%。 即使達到0.001毫克/毫升的水平，LPS抑制還是無毒且在后續(xù)過程中可逆的。 NR8383細胞株提供了高響應的肺泡巨噬細胞的均一來源，可以用于體外研究巨響細胞相關活性。

微生物，支原體檢測：陰性

培養(yǎng)條件：

完全培養(yǎng)基：90%F12K（含2mM L-glutamine）+10%胎牛血清

血清我們推薦用：GIBCOFBS-10099-141或HYCLONEFBS-SH30084.03。

培養(yǎng)條件：37 ℃，CO2：5%

傳代方法：

收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察整個細胞生長情況。之后用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液到無菌的離心管內，1000轉/分離心10分鐘后棄上清，加新配的完全培養(yǎng)液10ml接種到培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)（如果細胞多，也可接種兩瓶）。原瓶換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。

細胞傳代時，只要輕拍培養(yǎng)瓶后加夠培養(yǎng)液一分為二即可。如果有些細胞拍打不下來，可按以下方法做：

1.吸出拍打下的細胞懸液，用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱，然后將培養(yǎng)瓶翻過來讓胰酶與細胞面接觸大約10-30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加6-8ml/瓶完全培養(yǎng)基即可。

注：1、觀察細胞最好在低倍鏡（4或5X物鏡)下進行，否則不能準確判斷細胞的傳代密度�？醇毎�的形態(tài)請在10X物鏡下。

2、瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基，細胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。

3、有些細胞貼壁不牢，如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶內。

4、收到細胞后，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請及時與我們聯(lián)。

凍存方法：

凍存液：90%完全培養(yǎng)液，10%DMSO�，F(xiàn)用現(xiàn)配。

  儲  存：液氮。