一、基礎(chǔ)理念

孔板實(shí)驗(yàn)最初由Boissiex和Simon于1962年設(shè)計(jì)并應(yīng)用，自此以后，它成為了藥效研究領(lǐng)域的常用手段。這個(gè)實(shí)驗(yàn)主要依賴于兩個(gè)關(guān)鍵因素——好奇與恐懼，來調(diào)控動(dòng)物在新環(huán)境下的行為反應(yīng)。通過觀察動(dòng)物的逃避行為，我們可以深入了解這兩個(gè)因素對(duì)動(dòng)物行為的影響。動(dòng)物頻繁地將頭部伸入孔洞，反映了它們的好奇心理和對(duì)逃避的渴望。普遍認(rèn)為，在不影響動(dòng)物運(yùn)動(dòng)活性的藥物劑量下，若藥物能增加動(dòng)物頭部伸入孔洞的頻次和時(shí)長(zhǎng)，則表現(xiàn)出抗焦慮的效果；反之，減少這些指標(biāo)則表明藥物可能具有致焦慮作用。

二、實(shí)驗(yàn)流程

針對(duì)大鼠和小鼠，實(shí)驗(yàn)裝置的設(shè)計(jì)有所區(qū)別。大鼠使用的裝置是一個(gè)66cm x 56cm x 47cm的木箱，其底部設(shè)有四個(gè)直徑為3.8cm、深度為1cm的圓形孔洞。其中兩個(gè)孔距離箱壁14cm，另外兩個(gè)孔距離17cm，整個(gè)孔板被水平抬高12em。而小鼠的木箱尺寸為44cm x 40cm x 27cm，其孔洞的直徑和厚度分別為3cm和1.8cm，每個(gè)孔的中心距離箱壁為10cm。自80年代起，孔板箱的壁面及每個(gè)孔洞周邊都裝備了紅外光電管，并與微機(jī)相連，從而實(shí)現(xiàn)了對(duì)動(dòng)物頭部伸入孔洞的次數(shù)、時(shí)長(zhǎng)、運(yùn)動(dòng)活性及站立次數(shù)等多項(xiàng)指標(biāo)的自動(dòng)記錄，這不僅提高了實(shí)驗(yàn)效率，也增強(qiáng)了實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。實(shí)驗(yàn)對(duì)象通常為雄性成年大鼠或小鼠。在實(shí)驗(yàn)時(shí)，將動(dòng)物置于孔板中央，背對(duì)觀察者。當(dāng)動(dòng)物的兩眼消失在孔洞中時(shí)，即記為一次頭部伸入。實(shí)驗(yàn)過程中，我們會(huì)記錄5至10分鐘的頭部伸入次數(shù)及持續(xù)時(shí)間。

三、實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)與評(píng)估

盡管孔板箱的形狀和大小并沒有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，但通常采用方形設(shè)計(jì)，其中大鼠箱的邊長(zhǎng)一般約為60cm，而小鼠箱約為40cm。早期實(shí)驗(yàn)多使用四孔板，但如今更常見的是十六孔板。值得注意的是，動(dòng)物在上午的頭部伸入次數(shù)往往多于下午，因此，為了保持實(shí)驗(yàn)的一致性，應(yīng)盡量在每天固定的時(shí)間段內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。此外，本實(shí)驗(yàn)在評(píng)估致焦慮藥物（如BDZ受體反相激動(dòng)劑）時(shí)，顯示出對(duì)探究性頭部伸入行為特異性降低的一致性結(jié)果。然而，某些無抗焦慮作用的藥物（如BDZ受體拮抗劑氟馬西尼）反而可能增加這種探究性頭部伸入行為。因此，在篩選未知藥物時(shí)，我們需要結(jié)合其他焦慮模型進(jìn)行綜合評(píng)估。