一、實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)原理
穿梭實(shí)驗(yàn)是測(cè)定動(dòng)物行為學(xué)變化的關(guān)鍵手段,屬于經(jīng)典的聯(lián)合型學(xué)習(xí)條件反射范式。動(dòng)物通過這一學(xué)習(xí)過程能夠避免對(duì)自身有害的刺激。
實(shí)驗(yàn)中,頂部配備的噪聲發(fā)生器或光源用于產(chǎn)生條件刺激。若大鼠在鈴聲刺激的安全間隔內(nèi)主動(dòng)逃向安全區(qū),則視為主動(dòng)回避反應(yīng);若大鼠在條件刺激的安全間隔內(nèi)未主動(dòng)逃向安全區(qū),但在隨后的交流電擊后逃向安全區(qū),則判定為被動(dòng)回避反應(yīng)陽性;反之則為陰性反應(yīng),構(gòu)成一個(gè)完整的循環(huán)周期。
這一實(shí)驗(yàn)在學(xué)習(xí)記憶功能、認(rèn)知神經(jīng)科學(xué)、神經(jīng)生理學(xué)、神經(jīng)藥理學(xué)以及認(rèn)知功能退行性變性等領(lǐng)域的研究中廣泛應(yīng)用。其操作簡(jiǎn)便,結(jié)果易于判別,可靠性高。它既可以獨(dú)立作為檢測(cè)實(shí)驗(yàn)為課題研究提供參數(shù),也可作為其他學(xué)習(xí)記憶和認(rèn)知功能實(shí)驗(yàn)的輔助手段或預(yù)篩選實(shí)驗(yàn)。
二、實(shí)驗(yàn)裝置概述
該實(shí)驗(yàn)裝置由上海欣軟信息科技有限公司生產(chǎn),型號(hào)為XR-XC105。其采用無味的ABS塑料材質(zhì),內(nèi)側(cè)壁顏色為黑色。整套裝置包括SuperAPAS穿梭實(shí)驗(yàn)視頻分析軟件、大小鼠適用的穿梭箱(底部可通電)、SuperShocker刺激控制器,以及隔音箱、揚(yáng)聲器和視頻設(shè)備。
三、實(shí)驗(yàn)操作方法
①實(shí)驗(yàn)開始前1-2天,每日輕輕撫摸實(shí)驗(yàn)動(dòng)物1-5分鐘,以減輕其對(duì)實(shí)驗(yàn)者的恐懼感。
②訓(xùn)練階段:首先讓動(dòng)物在測(cè)試箱中自由活動(dòng)5分鐘,以消除其探究反射。隨后將動(dòng)物置于穿梭實(shí)驗(yàn)箱的電擊區(qū)。首先給予條件刺激(如燈光)和(或)蜂鳴音(純音刺激)持續(xù)20秒,隨后施加10秒的電刺激。若動(dòng)物在燈光或聲音響起后的20秒內(nèi)逃向安全區(qū),則為主動(dòng)回避反應(yīng);若在電刺激后才逃向安全區(qū),則為被動(dòng)回避反應(yīng)。
③正式測(cè)試階段:實(shí)驗(yàn)時(shí),將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物置于穿梭箱的電擊區(qū),操作步驟與訓(xùn)練階段相同。記錄動(dòng)物遭受電擊的次數(shù)(即被動(dòng)回避次數(shù))以及主動(dòng)回避的次數(shù)。
四、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析
①觀察時(shí)間,即動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)箱中活動(dòng)的總時(shí)長(zhǎng)。該值越小,說明動(dòng)物發(fā)生主動(dòng)回避的次數(shù)越多。
②主動(dòng)回避次數(shù),指實(shí)驗(yàn)開始后動(dòng)物在燈光或聲音刺激過程中逃至安全區(qū)的次數(shù)。
③被動(dòng)回避次數(shù),指動(dòng)物在受到電刺激后逃至安全區(qū)的次數(shù)。
五、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)
①確保實(shí)驗(yàn)室環(huán)境安靜,光線適中,避免給動(dòng)物帶來額外的刺激。
②實(shí)驗(yàn)中應(yīng)及時(shí)清理穿梭箱內(nèi)的糞便等雜物,以確保刺激電流的均勻性和強(qiáng)度。
③每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)選擇固定的時(shí)間進(jìn)行,前后兩天的實(shí)驗(yàn)應(yīng)在相同的時(shí)間段內(nèi)完成。
④電柵欄清洗后需待其完全干燥后方可使用,以避免電流刺激不均勻或短路現(xiàn)象的發(fā)生。
⑤在電刺激過程中,動(dòng)物可能采用特殊方式如多次跳躍或支撐性站立來躲避,這些偶然情況可能導(dǎo)致主被動(dòng)回避次數(shù)的較大誤差,因此在數(shù)據(jù)分析時(shí)應(yīng)予以剔除。