轉染技術作為核酸藥物的核心關鍵技術,目的是能夠高效率的進行細胞轉染和控制轉染后的細胞毒性,選擇同立海源LipidnanoTM Super RNAi 轉染試劑,你關注的產(chǎn)品疑問,公司首席品牌官‘小海’負責給大家做相關解答~
LipidnanoTM Super RNAi 轉染試劑的應用范圍?
適合將siRNA和miRNA等小RNA高效地輸送到廣泛的細胞類型中。
LipidnanoTM Super RNAi 轉染試劑與傳統(tǒng)轉染試劑明顯不同的方面?
傳統(tǒng)轉染試劑可通過表面正電荷幫助 siRNA 大量攝取入胞,但入胞后 siRNA 內含體逃逸水平低,造成攝取的 siRNA 無法發(fā)揮作用,同時造成細胞毒性。本品為非強正電型脂質轉染試劑,避免細胞大量攝取造成的毒性,但本品可提升細胞內吞后的 siRNA 內含體逃逸效率,通過促進內含體逃逸使更多 siRNA 釋放入細胞質中實現(xiàn)高效基因沉默作用。故在細胞水平上通過熒光標記 siRNA 進行條件優(yōu)化的方法不適用于本轉染試劑。推薦使用 Western Blot 或 QPCR 方式對最佳轉染濃度進行優(yōu)化。
LipidnanoTM Super RNAi 轉染試劑對細胞類型有限制嗎?
對大多數(shù)貼壁細胞和懸浮細胞轉染,部分原代細胞和轉化細胞株均可使用。
對待轉染細胞有什么要求?
通常健康的細胞轉染效率較高,較低的傳代數(shù)能確保每次實驗所用細胞的穩(wěn)定性。推薦用 50 代以下的細胞轉染。
如何對轉染效果進行評價?
細胞轉染后,不同細胞和 siRNA 效率存在差異。在 mRNA 水平觀察 siRNA 效果的最佳時間是轉染后24-48小時,在蛋白水平觀察siRNA效果的最佳時間是轉染后48-72小時。siRNA干擾是非線性的,不同基因半衰期存在較大差異,首次進行 siRNA 干擾效果測定時,建議多點測定,確定最佳測定時間點。
同立海源 LipidnanoTM Super RNAi 轉染試劑(貨號:TL-1001)是一款高效能、非強正電型脂質轉染試劑,用于siRNA介導的基因敲低實驗,適合將siRNA和miRNA等小RNA高效地輸送到廣泛的細胞類型中。特有的超高細胞利用率,在低攝取量下即可達到高效的靶基因敲低水平,轉染效果優(yōu)于行業(yè)同類型競品。
01 應用范圍
① 貼壁細胞和懸浮細胞轉染
② 部分原代細胞和轉化細胞株的基因轉染
③ siRNA高通量轉染試驗。
02 操作流程