同位素標(biāo)記相對和絕對定量(iTRAQ)技術(shù)是最新開發(fā)的蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù),具有定量好、重復(fù)性高等優(yōu)點(diǎn),可對多達(dá)八種不同樣本進(jìn)行分析,詳情請參看公司網(wǎng)站:http://
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在以往蛋白組學(xué)研究過程中先進(jìn)行二維(2D)凝較電泳,切取蛋白點(diǎn),再用質(zhì)譜方法鑒定蛋白點(diǎn)中的蛋白質(zhì)。這種方法既不是非常敏感,也不是非常精確。僅僅知道蛋白質(zhì)的身份并不足以對蛋白質(zhì)給出最終定論,因為蛋白質(zhì)的濃度對于實現(xiàn)其在細(xì)胞中的功能來說極其重要,一種特殊蛋白質(zhì)在濃度上的變化,就能預(yù)示細(xì)胞的突變過程。因此對蛋白質(zhì)的相對和絕對濃度進(jìn)行測量,是很重要的事情。iTRAQ技術(shù)可以對任何類型的蛋白質(zhì)進(jìn)行鑒定,包括高分子量蛋白質(zhì),酸性蛋白質(zhì)和堿性蛋白質(zhì),而2D凝膠電泳對這些蛋白質(zhì)卻束手無策。而且,2D凝膠電泳無法對膜蛋白那樣的不溶性蛋白質(zhì)進(jìn)行分析,但是iTRAQ標(biāo)記系統(tǒng)和質(zhì)譜法聯(lián)合使用可解決這些問題。
iTRAQ的操作程序一般如下:將蛋白質(zhì)裂解為肽段,然后用iTRAQ試劑進(jìn)行差異標(biāo)記,再將標(biāo)記的樣本相混合,這樣就可以對其進(jìn)行比較。與樣本結(jié)合后,通常用用2D液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜進(jìn)行后續(xù)的分析。在質(zhì)譜分析鑒定特殊肽離子片斷結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上,采用美國應(yīng)用生物系統(tǒng)公司的軟件包MASCOT和Protein Pilot對每一個肽段進(jìn)行鑒定。
同時本公司還可以提供雙向電泳(2-DE)、熒光差異凝膠雙向電泳(DIGE)、蛋白質(zhì)肽指紋圖譜鑒定(PMF)、串聯(lián)質(zhì)譜鑒定(MALDI-TOF/TOF)、ESI源LC-MS/MS、Shotgun混合蛋白鑒定、蛋白質(zhì)De-novo測序、蛋白質(zhì)磷酸化和二硫鍵位點(diǎn)分析、蛋白質(zhì)精確分子量測定、western-blot、免疫組化、病理學(xué)檢測、熒光定量PCR、生物信息學(xué)分析等服務(wù)。
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