a.吸去培養(yǎng)液，用無(wú)菌的PBS、Hanks液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。

b.加入少量胰酶細(xì)胞消化液，略蓋過(guò)細(xì)胞即可，室溫放置30秒至2分鐘。不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。

c.顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái)。此時(shí)吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的完全細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

d.如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入胰酶細(xì)胞消化液重新消化。

如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，未及時(shí)吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000-2000g離心1分鐘，沉淀細(xì)胞，盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后，加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

1.使用本產(chǎn)品時(shí)應(yīng)盡量注意無(wú)菌操作，避免污染；

2. 不宜長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或4度長(zhǎng)期保存；

3. 2-8度中解凍，搖勻后使用，切忌反復(fù)凍融，建議分裝凍存；

4. 由于不同的組織或者細(xì)胞對(duì)胰酶的作用反應(yīng)不一樣，因此操作人員應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況，確定最佳消化時(shí)間；消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)狀況。