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人間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化試劑套裝
英文名稱:總訪問:255
國產(chǎn)/進(jìn)口:國產(chǎn)半年訪問:4
產(chǎn)地/品牌:廈門/逸漠IMMOCELL產(chǎn)品類別:細(xì)胞生物學(xué)試劑
規(guī)       格:200ml 最后更新:2024-2-20
貨       號:IMC-011
CAS   號:
參考報價:1280
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  • 公司簡介
產(chǎn)品介紹

由IMMOCELL研發(fā)團(tuán)隊精心研制的人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化試劑盒,包含適合人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞生長的基礎(chǔ)培養(yǎng)基、優(yōu)級胎牛血清及誘導(dǎo)細(xì)胞分化所需的添加物。 本產(chǎn)品適用于人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨誘導(dǎo)分化。大量細(xì)胞培養(yǎng)數(shù)據(jù)驗證,本產(chǎn)品可穩(wěn)定、高效誘導(dǎo)上述細(xì)胞分化為成骨細(xì)胞。  

注意:本產(chǎn)品僅提供給進(jìn)一步科研使用,不可用于臨床治療等其他用途。

人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化試劑套裝說明書下載

成骨分化套裝
成骨分化套裝成分 貨號 體積

Mesenchymal Stem Cells Osteogenic Differentiation Medium

MSC-ODM

IMC-011-M 180mL
優(yōu)級胎牛血清 IMC-101-10 20mL

Supplement For Mesenchymal Stem Cells Osteogenic Differentiation A

間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化添加物A 

IMC-011-A 1mL
Alizarin Red S 茜素紅 IMC-901 10mL
Gelatin明膠 IMC-902 10mL
質(zhì)量控制

通過細(xì)菌、真菌、支原體、內(nèi)毒素檢測。

通過滲透壓、pH檢測。

通過產(chǎn)品性能檢測

處理原則

1.嚴(yán)格的無菌環(huán)境。務(wù)必保證實驗室整體和操作區(qū)域的清潔。

2.規(guī)范的操作方式。請按照產(chǎn)品說明書描述的方式操作,嚴(yán)格控制變量,做好對照實驗。

3.各成分需按照保存條件妥善存放,并盡快使用。

4.若短期內(nèi)無法用完整套培養(yǎng)基,應(yīng)按套裝內(nèi)各成分體積比例分批配制并分裝保存。

產(chǎn)品穩(wěn)定性及保存條件

1.套裝內(nèi)所有成分均需避光保存。

2.套裝內(nèi)基礎(chǔ)培養(yǎng)基需置于4℃冰箱保存,保質(zhì)期為1年;其他成分需置于-20℃保存,保質(zhì)期為2年。

3.配制后的完全培養(yǎng)基,需放置4℃保存,保質(zhì)期為1個月;若能保證培養(yǎng)條件穩(wěn)定,容器密封性能良好,避免冷熱交替,則保質(zhì)期可適當(dāng)延長,但不得超過45天。

4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用;過期的成分可能嚴(yán)重影響培養(yǎng)效果

完全培養(yǎng)基的配制

所需材料

1.人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化試劑盒

2.清潔、無菌、質(zhì)量穩(wěn)定的一次性耗材(移液管、移液器吸頭、離心管等)

3.潔凈的封口膜

4.鋁箔紙等避光材料

操作步驟

1.配制前至少6h,將套裝中的優(yōu)級胎牛血清(以下簡稱血清)放置于4℃冰箱內(nèi)完全融化。

注意:融化后的血清中可能出現(xiàn)絮狀物,其主要成分為析出的血纖蛋白,這不會影響產(chǎn)品使用效果。若不是對細(xì)胞培養(yǎng)體系的純凈度要求極高,我們不建議過濾或離心去除絮狀物。

2.配制前至少30min,將套裝中人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化添加物(以下簡稱添加物)放置于4℃冰箱內(nèi),直至完全融化。

3.上下顛倒或輕彈試劑管以混勻試劑。

4.用75%醫(yī)用酒精仔細(xì)擦拭所有成分外包裝。在超凈臺內(nèi)打開包裝。

5.將血清、添加物全部加入細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基(以下簡稱基礎(chǔ)培養(yǎng)基)中。

6.取少量基礎(chǔ)培養(yǎng)基,洗滌各瓶、管,盡可能將所有成分全部加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基中。

7.擰緊基礎(chǔ)培養(yǎng)基瓶蓋,輕柔并充分搖勻。

8.用封口膜密封瓶口,用鋁箔紙包裹瓶身,并標(biāo)注名稱、配制日期等信息。

特別提醒

1.若短期內(nèi)無法用完全部培養(yǎng)基,我們建議分批配制;請按照套裝內(nèi)各成分比例,配制所需量;但剩余的成分必須嚴(yán)格按照各自的保存條件妥善保存,并且不可多次凍融。

2.人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化試劑盒內(nèi)的所有成分都嚴(yán)格控制無菌,一般情況下我們不建議再次除菌。若配制過程有污染風(fēng)險,可將完全培養(yǎng)基過濾除菌。

3.配制完成的成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基,請分裝為小份,避免整瓶培養(yǎng)基反復(fù)溫浴和冷藏交替

誘導(dǎo)分化操作流程

所需材料

1.人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化試劑盒

2.0.1%明膠溶液

3.Phosphate-BufferedSaline(1×PBS)

操作步驟

注意

1)本操作規(guī)程以六孔板為例,請根據(jù)實際情況選用合適的培養(yǎng)容器;

2)為減少誘導(dǎo)過程細(xì)胞漂起、不貼壁,建議使用明膠包被培養(yǎng)容器;

3)誘導(dǎo)培養(yǎng)基在使用前均需預(yù)熱至37℃。

1.加1mL0.1%明膠到六孔板中,搖勻,使其能均勻覆蓋各孔底面。

2.將鋪有0.1%明膠的六孔板放置在超凈臺或CO2培養(yǎng)箱至少30min。

3.30min后吸去明膠即可用于接種細(xì)胞,或等待六孔板晾干再接種。

4.將待誘導(dǎo)的人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞按照2×104cells/cm2的細(xì)胞密度接種于六孔板中,每孔加入2mL普通完全培養(yǎng)基。

5.細(xì)胞置于37℃、5%CO2、飽和濕度的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

6.當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá)到70%時,小心地將孔內(nèi)完全培養(yǎng)基吸走,向六孔板中加入2mL人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基。

7.每隔3天換用新鮮的人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基。

8.誘導(dǎo)2~4周后,視細(xì)胞的形態(tài)變化及生長情況,用茜素紅進(jìn)行染色。

注意:為防止成骨細(xì)胞脫落、鈣結(jié)節(jié)損失,建議成骨過程中出現(xiàn)明顯鈣結(jié)節(jié)之后,每三天半量換液一次

茜素紅染色分析

所需材料

1.Phosphate-BufferedSaline(1×PBS)

2.4%多聚甲醛溶液或10%福爾馬林溶液

3.茜素紅染色液

操作步驟

注意:

1)為防止鈣結(jié)節(jié)脫落,所有操作盡可能輕緩;

2)茜素紅使用前請恢復(fù)至室溫;如果染色效果較差,可適當(dāng)延長染色時間;

3)請確認(rèn)出現(xiàn)鈣結(jié)節(jié)后再進(jìn)行染色。

1.成骨誘導(dǎo)分化結(jié)束后,吸去六孔板中的成骨誘導(dǎo)分化完全培養(yǎng)基,用1×PBS輕柔洗滌2~3次。

2.每孔加入2mL4%多聚甲醛溶液(或10%福爾馬林),室溫固定30min。

3.吸去固定液,用1×PBS輕柔洗滌2~3次,確保將固定液清洗徹底。

4.每孔加入2mL茜素紅工作液,室溫染色5~10min。

5.吸去茜素紅染色液,用1×PBS輕柔洗滌2~3次,充分洗去多余染色液。

6.每孔加入2mL1×PBS,將培養(yǎng)板置于顯微鏡下觀察成骨染色效果。

7.染色后的六孔板用封口膜封裝后,置于4℃可保存2周

染色效果圖

間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化染色效果圖
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