Cell Meter 細(xì)胞內(nèi)一氧化氮（NO）活性檢測(cè)試劑盒 適合于流式細(xì)胞儀近紅外檢測(cè)

貨號(hào)	16360	存儲(chǔ)條件	f/l
規(guī)格	100 Tests
Ex (nm)	650	Em (nm)	680
分子量		溶劑
產(chǎn)品詳細(xì)介紹

簡(jiǎn)要概述

        Cell Meter 細(xì)胞內(nèi)一氧化氮（NO）活性檢測(cè)試劑盒 適合于酶標(biāo)儀橙色檢測(cè) 是美國(guó)AAT Bioquest生產(chǎn)的用于檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)一氧化氮活性的試劑盒，一氧化氮（NO）是涉及許多生理和病理過(guò)程的重要生物調(diào)節(jié)劑。 改變的NO產(chǎn)生涉及各種免疫，心血管，神經(jīng)變性和炎性疾病。 作為自由基，NO被快速氧化，并且體內(nèi)存在相對(duì)低濃度的NO。 檢測(cè)和了解NO在生物系統(tǒng)中的作用一直具有挑戰(zhàn)性。 Cell Meter 熒光細(xì)胞內(nèi)一氧化氮檢測(cè)試劑盒提供了一種監(jiān)測(cè)活細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞內(nèi)NO水平的敏感工具。

        Nitrixyte 探針在我們的試劑盒中開(kāi)發(fā)和使用，作為DAF-2的優(yōu)異替代品，用于檢測(cè)和成像細(xì)胞中的游離NO。 與常用的DAF-2探針相比，Nitrixyte 探針具有更好的光穩(wěn)定性和增強(qiáng)的細(xì)胞滲透性。 該特殊試劑盒使用Nitrixyte Orange，可與NO反應(yīng)生成亮橙色熒光產(chǎn)品，其光譜特性與Cy3®和TRITC相似。Nitrixyte Orange可以很容易地加載到活細(xì)胞中，使用Cy3®或TRITC過(guò)濾器可以方便地監(jiān)測(cè)其熒光信號(hào)。該試劑盒針對(duì)熒光成像和酶標(biāo)儀應(yīng)用進(jìn)行了優(yōu)化。百螢生物是AAT Bioquest的中國(guó)代理商，為您提供最優(yōu)質(zhì)的Cell Meter 細(xì)胞內(nèi)一氧化氮（NO）活性檢測(cè)試劑盒。 

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產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

樣本實(shí)驗(yàn)方案

概述

1.準(zhǔn)備細(xì)胞（0.5-1×10⁶細(xì)胞/ mL）
2.加入1 µL 500X Nitrixyte NIR
3.將細(xì)胞與測(cè)試化合物和Nitrixyte NIR在37ºC下孵育所需的時(shí)間
4.使用APC通道通過(guò)流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞

 

溶液配制

1.儲(chǔ)備溶液

所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分為一次性使用的等分試樣，并在制備后儲(chǔ)存在-20°C下。 避免重復(fù)凍融循環(huán)。
1.1 NONOate陽(yáng)性對(duì)照治療儲(chǔ)備液（50 mM）：
將200 uL ddH₂O加入小瓶NONOate陽(yáng)性對(duì)照（組分B）中，制成50 mM NONOacte陽(yáng)性對(duì)照處理原液。

 

2.工作溶液

用測(cè)定緩沖液（組分C）稀釋50 mM NONOate陽(yáng)性對(duì)照治療原液，制成1-2 mM NONOate陽(yáng)性對(duì)照工作溶液。

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樣品操作及實(shí)驗(yàn)分析

1.對(duì)于每個(gè)樣品，在0.5 mL溫?zé)崤囵B(yǎng)基或您選擇的緩沖液中以5×105至1×106細(xì)胞/ mL的密度制備細(xì)胞。注意：應(yīng)單獨(dú)評(píng)估每個(gè)細(xì)胞系，以確定誘導(dǎo)NO的最佳細(xì)胞密度。

2.將1 µL 500X Nitrixyte NIR（組分A）加入0.5 mL細(xì)胞懸液中。注意：對(duì)于貼壁細(xì)胞，用0.5 mM EDTA輕輕提起細(xì)胞以保持細(xì)胞完整，并在用Nitrixyte NIR孵育之前用含血清的培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞一次。

3.將細(xì)胞與測(cè)試化合物和Nitrixyte NIR在37ºC下孵育所需的時(shí)間，以生成內(nèi)源性或外源性NO。注意：適當(dāng)?shù)姆跤龝r(shí)間取決于所用的單個(gè)細(xì)胞類型和測(cè)試化合物。優(yōu)化每個(gè)實(shí)驗(yàn)的孵育時(shí)間。注意：我們已在37°C的細(xì)胞培養(yǎng)基中將Raw 264.7細(xì)胞與Nitrixyte NIR工作溶液，20 µg / mL脂多糖（LPS）和1 mM L-精氨酸（L-Arg）孵育16小時(shí)。

4.旋轉(zhuǎn)已用Nitrixyte NIR預(yù)孵育30分鐘的細(xì)胞。用1 mM DEA NONOate陽(yáng)性對(duì)照工作溶液重懸細(xì)胞，并在37ºC下再孵育30分鐘。有關(guān)詳細(xì)信息，請(qǐng)參見(jiàn)圖1。

5.使用流式細(xì)胞儀監(jiān)測(cè)APC通道（Ex / Em = 640/675 nm）的熒光強(qiáng)度。

西安百螢生物科技有限公司是一家專注從事生物、化學(xué)試劑及其試劑盒的高新技術(shù)企業(yè)；主要以熒光探針，分子探針，核酸/蛋白質(zhì)標(biāo)記、細(xì)胞檢測(cè)等技術(shù)和產(chǎn)品為研發(fā)核心，產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于基因合成、細(xì)胞檢測(cè)、活體示蹤，抗體標(biāo)記、新藥篩選等領(lǐng)域。

美國(guó)AAT Bioquest公司是生物光譜領(lǐng)域全球領(lǐng)導(dǎo)者，產(chǎn)品暢銷全球。長(zhǎng)年以來(lái)百螢生物與AAT Bioquest互補(bǔ)優(yōu)勢(shì)，為國(guó)內(nèi)外廣大用戶提供光譜檢測(cè)，底物顯色，熒光發(fā)光技術(shù)等全系列解決方案。近年來(lái)，百螢生物已與全球多家知名藥企、CRO公司、眾多高校及科研單位建立了長(zhǎng)期穩(wěn)定的合作關(guān)系；我們的服務(wù)宗旨：不斷創(chuàng)新，為廣大科研用戶提供最優(yōu)質(zhì)的服務(wù)；主要分為以下幾個(gè)產(chǎn)品線：

a)開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)國(guó)際頂級(jí)熒光標(biāo)記探針和發(fā)光探針。這些熒光標(biāo)記探針和發(fā)光探針是用于標(biāo)記生物大分子例如，蛋白質(zhì)，核酸，碳水化合物的主要工具；
b)檢測(cè)蛋白質(zhì)，核酸和活細(xì)胞熒光和熒光探針；
c)新型各種酶活性熒光探針和發(fā)光探針(特別是用與研究蛋白酶，蛋白激酶和氧化還原酶熒光標(biāo)記探針和發(fā)光探針)；
d) 開(kāi)發(fā)用于分子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)研究試劑和試劑盒；
e)生物鈣膜電位探針和神經(jīng)生物學(xué)熒光標(biāo)記探針和發(fā)光探針；

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