 |
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||
| [發(fā)表評論] [本類其他產品] [本類其他供應商] [收藏] | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 銷售商： 西安百螢生物科技有限公司 | 查看該公司所有產品 >> |
| 貨號 | 16360 | 存儲條件 | f/l |
| 規(guī)格 | 100 Tests | ||
| Ex (nm) | 650 | Em (nm) | 680 |
| 分子量 | 溶劑 | ||
| 產品詳細介紹 | |||
簡要概述
Cell Meter 細胞內一氧化氮（NO）活性檢測試劑盒 適合于酶標儀橙色檢測 是美國AAT Bioquest生產的用于檢測細胞內一氧化氮活性的試劑盒，一氧化氮（NO）是涉及許多生理和病理過程的重要生物調節(jié)劑。 改變的NO產生涉及各種免疫，心血管，神經變性和炎性疾病。 作為自由基，NO被快速氧化，并且體內存在相對低濃度的NO。 檢測和了解NO在生物系統(tǒng)中的作用一直具有挑戰(zhàn)性。 Cell Meter 熒光細胞內一氧化氮檢測試劑盒提供了一種監(jiān)測活細胞內細胞內NO水平的敏感工具。
Nitrixyte 探針在我們的試劑盒中開發(fā)和使用，作為DAF-2的優(yōu)異替代品，用于檢測和成像細胞中的游離NO。 與常用的DAF-2探針相比，Nitrixyte 探針具有更好的光穩(wěn)定性和增強的細胞滲透性。 該特殊試劑盒使用Nitrixyte Orange，可與NO反應生成亮橙色熒光產品，其光譜特性與Cy3®和TRITC相似。Nitrixyte Orange可以很容易地加載到活細胞中，使用Cy3®或TRITC過濾器可以方便地監(jiān)測其熒光信號。該試劑盒針對熒光成像和酶標儀應用進行了優(yōu)化。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供最優(yōu)質的Cell Meter 細胞內一氧化氮（NO）活性檢測試劑盒。
產品說明書
樣本實驗方案
概述
1.準備細胞（0.5-1×106細胞/ mL）
2.加入1 µL 500X Nitrixyte NIR
3.將細胞與測試化合物和Nitrixyte NIR在37ºC下孵育所需的時間
4.使用APC通道通過流式細胞儀分析細胞
溶液配制
1.儲備溶液
所有未使用的儲備溶液應分為一次性使用的等分試樣，并在制備后儲存在-20°C下。 避免重復凍融循環(huán)。
1.1 NONOate陽性對照治療儲備液（50 mM）：
將200 uL ddH2O加入小瓶NONOate陽性對照（組分B）中，制成50 mM NONOacte陽性對照處理原液。
2.工作溶液
用測定緩沖液（組分C）稀釋50 mM NONOate陽性對照治療原液，制成1-2 mM NONOate陽性對照工作溶液。
樣品操作及實驗分析
1.對于每個樣品，在0.5 mL溫熱培養(yǎng)基或您選擇的緩沖液中以5×105至1×106細胞/ mL的密度制備細胞。注意：應單獨評估每個細胞系，以確定誘導NO的最佳細胞密度。
2.將1 µL 500X Nitrixyte NIR（組分A）加入0.5 mL細胞懸液中。注意：對于貼壁細胞，用0.5 mM EDTA輕輕提起細胞以保持細胞完整，并在用Nitrixyte NIR孵育之前用含血清的培養(yǎng)基洗滌細胞一次。
3.將細胞與測試化合物和Nitrixyte NIR在37ºC下孵育所需的時間，以生成內源性或外源性NO。注意：適當的孵育時間取決于所用的單個細胞類型和測試化合物。優(yōu)化每個實驗的孵育時間。注意：我們已在37°C的細胞培養(yǎng)基中將Raw 264.7細胞與Nitrixyte NIR工作溶液，20 µg / mL脂多糖（LPS）和1 mM L-精氨酸（L-Arg）孵育16小時。
4.旋轉已用Nitrixyte NIR預孵育30分鐘的細胞。用1 mM DEA NONOate陽性對照工作溶液重懸細胞，并在37ºC下再孵育30分鐘。有關詳細信息，請參見圖1。
5.使用流式細胞儀監(jiān)測APC通道（Ex / Em = 640/675 nm）的熒光強度。
