在細(xì)胞凍存領(lǐng)域,DMSO一直是細(xì)胞凍存中常用的滲透性冷凍保護(hù)劑,但其對細(xì)胞存在一定的毒性。為了破解這一難題,上海中喬新舟開發(fā)出了一款無DMSO無血清細(xì)胞凍存液,為細(xì)胞凍存帶來了全新方案!
· 無DMSO,更安全,更高效!
中喬新舟徹底摒棄了傳統(tǒng)凍存液中的DMSO成分,采用了獨(dú)特的特殊冷凍保護(hù)劑,不僅避免了DMSO對細(xì)胞的潛在毒性,還能顯著提升細(xì)胞凍存的安全性和穩(wěn)定性,對各種細(xì)胞株系都能輕松應(yīng)對,并且操作簡單,無需程序性降溫,大大節(jié)省了實(shí)驗(yàn)時(shí)間和成本。
· 特殊冷凍保護(hù)劑,守護(hù)細(xì)胞每一刻!
中喬新舟的核心技術(shù)在于特殊冷凍保護(hù)劑,是市面上第一款使用特殊冷凍技術(shù)的細(xì)胞凍存液產(chǎn)品。這種創(chuàng)新成分具有高度的生物相容性,能在冷凍過程中延緩冰晶形成,減少冰晶對細(xì)胞結(jié)構(gòu)以及細(xì)胞間相互擠壓的損傷,從而最大程度地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)的完整性,大幅提升細(xì)胞復(fù)蘇后的存活率和活力。
· -80℃長期保存,復(fù)蘇更便捷!
中喬新舟無DMSO無血清細(xì)胞凍存液可在-80℃條件下對細(xì)胞進(jìn)行長期穩(wěn)定的保存,無需擔(dān)心凍存過程中由于設(shè)備問題引起的輕微融化。實(shí)驗(yàn)證明,即使在常溫條件下中喬新舟無DMSO無血清細(xì)胞凍存液也可保證細(xì)胞在數(shù)小時(shí)內(nèi)保持高活性。并且,使用中喬新舟無DMSO無血清細(xì)胞凍存液凍存細(xì)胞復(fù)蘇后無需立即進(jìn)行離心處理,待傳代時(shí)再進(jìn)行離心處理即可。這一設(shè)計(jì)簡化了實(shí)驗(yàn)步驟,提高了實(shí)驗(yàn)效率,讓您的科研工作更加順暢!
凍存效果展示
細(xì)胞系 |
中喬新舟凍存液細(xì)胞復(fù)蘇存活率 |
傳統(tǒng)凍存液 細(xì)胞復(fù)蘇存活率 |
|
HSF |
人皮膚成纖維細(xì)胞 |
92.6% |
90.2% |
GLI261 |
小鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 |
85.3% |
84.2% |
4T1 |
小鼠乳腺癌細(xì)胞 |
91.7% |
85.3% |
K562 |
人慢性髓原白血病細(xì)胞 |
92.8% |
92.4% |
HL-60 |
人原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞 |
68.3% |
36.9% |
Caco-2 |
人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 |
81.3% |
55.1% |
HUVEC |
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 |
69.9% |
38.5% |
操作流程
· 細(xì)胞凍存步驟
1. 確保細(xì)胞處于對數(shù)生長期,常規(guī)方法將細(xì)胞懸浮液收集于離心管中。
2. 根據(jù)細(xì)胞密度和凍存管尺寸確定所需凍存細(xì)胞數(shù)量。將細(xì)胞懸浮液置于離心管中,200×g(貼壁細(xì)胞)或150×g(懸浮細(xì)胞),5分鐘離心后除去上清液,收集細(xì)胞沉淀。
3. 在離心管中加入少量中喬新舟細(xì)胞凍存液,細(xì)胞濃度約為5×104-1×106/μl,輕輕地混勻細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。
4. 在凍存管中加入10 μL細(xì)胞懸液,再加入990 μL細(xì)胞凍存液,輕輕混勻。
5. 將凍存管置于37 ℃培養(yǎng)箱中孵育一小時(shí)。
6. 孵育完成后,凍存管冷卻至室溫,直接放入-80℃超低溫冰箱中。
7. 如需在液氮中長期保存,可以在-80℃冰箱中放置一天后轉(zhuǎn)移至液氮罐中。
· 細(xì)胞復(fù)蘇步驟
1. 將細(xì)胞凍存管從超低溫環(huán)境中取出,立即放入37℃水域槽中快速解凍。
2. 待細(xì)胞混合液完全解凍后,立即加入適量細(xì)胞培養(yǎng)基混勻。
3. 將細(xì)胞混合液移至培養(yǎng)瓶中。鏡檢后,可根據(jù)需求進(jìn)行細(xì)胞的常規(guī)化培養(yǎng)。
4. 培養(yǎng)2-5天后,將混合液移至離心管中進(jìn)行離心,200×g(貼壁細(xì)胞)或150×g(懸浮細(xì)胞),5分鐘離心除去上清液,收集細(xì)胞沉淀,重新分散于細(xì)胞培養(yǎng)基中。