Celloger®活細(xì)胞成像系統(tǒng)在細(xì)胞劃痕實驗中的應(yīng)用

瀏覽次數(shù)：311　發(fā)布日期：2024-12-27　來源：本站　僅供參考，謝絕轉(zhuǎn)載，否則責(zé)任自負(fù)

前言：
細(xì)胞劃痕實驗（Cell Scratch Assay），也被稱為傷口愈合實驗（Wound Healing Assay），是一種常用的體外實驗方法，用于評估細(xì)胞的遷移能力和修復(fù)過程。這項技術(shù)主要應(yīng)用于研究細(xì)胞生物學(xué)，特別是在癌癥研究、組織工程、藥物篩選以及了解細(xì)胞信號傳導(dǎo)通路等領(lǐng)域。

實驗原理：
細(xì)胞劃痕實驗通過在培養(yǎng)的單層細(xì)胞上人工制造一個空白區(qū)域（即“劃痕”或“傷口”），然后觀察并記錄細(xì)胞向這個空白區(qū)域遷移的過程。隨著時間的推移，邊緣的細(xì)胞會逐漸遷移到劃痕區(qū)域填補(bǔ)空缺，這個過程類似于體內(nèi)傷口愈合。通過比較不同時間的劃痕寬度/融合度，可以量化細(xì)胞遷移的速度和效率。

細(xì)胞劃痕實驗步驟：

準(zhǔn)備細(xì)胞和培養(yǎng)板：選擇合適的細(xì)胞系，在無菌條件下將細(xì)胞懸液接種到6孔板或其他的培養(yǎng)容器中，確保細(xì)胞能夠過夜生長形成單層。
制造劃痕：當(dāng)細(xì)胞完全鋪展并形成單層后，使用無菌的工具（如尖銳的槍頭或劃痕器）在細(xì)胞層上制造一個直線劃痕。
清洗與更換介質(zhì)：用PBS輕輕洗滌細(xì)胞以去除劃痕過程中可能產(chǎn)生的細(xì)胞碎片，隨后加入無血清或低血清培養(yǎng)基，以減少細(xì)胞增殖對實驗結(jié)果的干擾。
圖像采集：

a.普通顯微鏡：在劃痕后立即拍攝第一張照片作為基線，然后每隔一定時間間隔（如6小時、12小時、24小時）再次拍照，記錄劃痕愈合的情況。
b.活細(xì)胞成像儀：使用Celloger^®，在劃痕后將孔板置于培養(yǎng)箱內(nèi)的Celloger^®載物臺上，使用掃描軟件設(shè)定任意孔位及自動拍攝參數(shù)并開啟延時成像。

數(shù)據(jù)分析：

a.利用ImageJ等圖像分析軟件測量劃痕寬度，并計算不同時間點(diǎn)劃痕面積的變化，以此來評估細(xì)胞遷移速率。
b.使用Celloger^®配套的分析軟件對Celloger^®拍攝的圖像進(jìn)行分析，分析細(xì)胞融合度的變化，并自動生成生長曲線，以此來定量細(xì)胞遷移；也可以通過Celloger^®聯(lián)合Image J對劃痕區(qū)域的面積進(jìn)行定量。

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2️⃣ 高清成像：高分辨率圖像，輕松分析劃痕閉合速率。
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