基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization-Time of Flight Mass Spectrometry,MALDI-Tof MS)是近年來發(fā)展起來的一種新型的軟電離生物質(zhì)譜,具有靈敏度高、準(zhǔn)確度高、分辨率高、圖譜簡(jiǎn)明、質(zhì)量范圍廣及速度快等特點(diǎn),而且在測(cè)定生物大分子和合成高聚物的應(yīng)用方面有特殊的優(yōu)越性,所以在臨床微生物學(xué)、食品飼料檢測(cè)、環(huán)境監(jiān)測(cè)及生物制藥等領(lǐng)域的研究中具有廣闊應(yīng)用前景。在生物領(lǐng)域,MALDI-Tof MS的應(yīng)用包括微生物分類和鑒定、抗生素耐藥性檢測(cè)、細(xì)菌的分型以及檢測(cè)酶的活性等等。
MALDI-Tof MS的點(diǎn)靶操作是一個(gè)高要求的限速步驟。靶板的尺寸極小且密布靶點(diǎn),而且點(diǎn)靶步驟通常需進(jìn)行多步的低體積移液操作。
常見的點(diǎn)靶方法主要有干滴法、薄層法和雙層法等。干滴法通常先將樣品與基質(zhì)按設(shè)定比例充分混合后,點(diǎn)在靶板上。薄層法一般先將基質(zhì)點(diǎn)在靶板上,待基質(zhì)干燥結(jié)晶后,再將樣品點(diǎn)于基質(zhì)層上;也有分析要求先點(diǎn)樣品,干燥后再點(diǎn)基質(zhì)。而雙層法則一般先將基質(zhì)點(diǎn)在靶板上,干燥結(jié)晶后形成基質(zhì)薄層,然后再取按設(shè)定比例充分混合的基質(zhì)樣品混合物滴于基質(zhì)薄層上。有些分析還要求添加甲酸溶液處理步驟。點(diǎn)靶的體積大多為1uL左右,而且通常要求吸頭不接觸靶板點(diǎn)樣。人工操作不但費(fèi)時(shí)費(fèi)力,而且容易出錯(cuò)。
Myra迷你型自動(dòng)化工作站具有小巧緊湊、移液精準(zhǔn)度高、編程簡(jiǎn)便等特點(diǎn),特別適合實(shí)現(xiàn)MALDI-Tof點(diǎn)靶步驟的自動(dòng)化,提高操作效率和結(jié)果的可靠性及重復(fù)性。
Myra為MALDI-Tof點(diǎn)靶應(yīng)用定制了靶板固定適配器,如下圖所示,并可根據(jù)客戶不同的質(zhì)譜儀和靶板型號(hào)量身定制對(duì)應(yīng)的適配固定器。
然后可方便地將定制的靶板及固定適配器加入軟件的Labware文庫中。
隨后根據(jù)客戶的實(shí)驗(yàn)流程開發(fā)“simple liquid transfer”腳本,采用Myra迷你工作站自動(dòng)化進(jìn)行MALDI-Tof點(diǎn)靶操作,大大提高效率,并保證結(jié)果的可靠性和一致性。
客戶如需修改或添加實(shí)驗(yàn)流程,可輕松通過軟件操作。Myra也可協(xié)助客戶進(jìn)行相應(yīng)操作,以適應(yīng)客戶不斷變化的需求。
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