PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))原理：DNA雙鏈復(fù)制，DNA雙鏈結(jié)構(gòu)高溫氫鍵斷裂。
PCR目的：在生物體外大量擴增特定DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)，其特點是可以以微量的DNA為模板，快速擴增得到大量拷貝。

PCR反應(yīng)基本組成：
①DNA模板（template）：含有待擴增的DNA片段。
②2條引物（primer）：決定了需要擴增的起始和終止位置。
③DNA聚合酶（polymerase）：復(fù)制需要擴增的區(qū)域，耐高溫的Taq 酶最為常見，其在DNA變性過程中仍具活性。
④4種脫氧核苷三磷酸（dNTPs）：DNA聚合酶可以從中合成新的DNA互補鏈。
⑤含有鎂離子的緩沖體系，提供適合聚合酶行使功能的化學(xué)環(huán)境。

PCR反應(yīng)基本步驟：
①變性：利用高溫（93-98℃）使雙鏈DNA解螺旋，高溫使兩條DNA鏈間的氫鍵斷裂。在第一個循環(huán)之前，通常加熱時間較長以確保模板DNA完全分離，僅以單鏈形式存在。該步驟時間1-2分鐘，接下來機器就控制溫度進入循環(huán)階段。
②退火：將反應(yīng)溫度降低至50-65℃（通常比引物 值低3-5℃）持續(xù)20-40s，從而使引物結(jié)合于單鏈DNA上。若退火溫度過低，容易造成非特異擴增，而退火溫度過高，引物可能根本不結(jié)合。
③延伸：此步驟的溫度取決于所用的DNA聚合酶。 Taq（Thermus aquaticus）聚合酶的熱穩(wěn)定DNA聚合酶的最佳活性溫度約為75–80°C，但通常使用的延伸溫度為72°C。 在這一步驟中，DNA聚合酶通過從反應(yīng)體系中添加的5'至3'方向的游離dNTP，從而合成與DNA模板鏈互補的新DNA鏈。延伸所需的精確時間取決于所用的DNA聚合酶和待擴增的DNA片段的長度。 傳統(tǒng)的Taq 酶估計合成1000bp大概需要1分鐘、較新的Tbr 酶（來自于嗜熱菌Thermus brockianus）約40s、商業(yè)公司生產(chǎn)的融合型聚合酶僅需約10-15s。有修正功能的則會比較慢。

    上述循環(huán)結(jié)束后，將進入終延伸階段：此步驟是可選的，但要在70-74°C）（PCR中使用的大多數(shù)聚合酶最佳活性所需的溫度范圍）下進行5-15分鐘。 最后一個PCR循環(huán)，以確保所有剩余的單鏈DNA的岡崎片段被補齊。
    最終保持：最后一步將PCR儀反應(yīng)室無限期地冷卻至4–15°C，可用于PCR產(chǎn)物的短期保存。