通過實(shí)驗(yàn)鑒別ELISA試劑盒
瀏覽次數(shù):207 發(fā)布日期:2022-4-12
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通過實(shí)驗(yàn)怎樣鑒別ELISA試劑盒:
1、利用干擾實(shí)驗(yàn)即可鑒別ELISA試劑盒是否檢測(cè)目的抗原
a. 將針對(duì)試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測(cè)抗體配置成antibody: antigen= 1:2的混合孵育液;
b. 37℃孵育15分鐘后,代替原試劑盒中的檢測(cè)抗體;
c. 后續(xù)操作按照試劑盒說明書進(jìn)行,加檢測(cè)抗體、酶復(fù)合物和底物;
d. 實(shí)驗(yàn)完畢后,檢測(cè)其標(biāo)準(zhǔn)曲線,如果標(biāo)準(zhǔn)曲線良好則說明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配,試劑盒檢測(cè)抗體針對(duì)的是非目的抗原,該試劑盒為假貨ELISA試劑盒;
e. 如果標(biāo)準(zhǔn)曲線無線性,則說明試劑盒檢測(cè)抗體已被目的抗原中和或干擾,影響了其實(shí)際試劑盒抗體的檢測(cè)作用,則該試劑盒檢測(cè)抗體針對(duì)的是目的抗原。
2、如果購(gòu)買了兩盒同一公司的ELISA試劑盒A和B,利用交叉實(shí)驗(yàn)即可鑒別ELISA試劑盒是否造假。
a. 取出購(gòu)買的試劑盒A的包被板兩條;
b. 一條包被板加試劑盒A的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線;
c. 另一條包被板加試劑盒B的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線;
d. 后續(xù)操作按照試劑盒說明書進(jìn)行,加檢測(cè)抗體、酶復(fù)合物和底物;
e. 實(shí)驗(yàn)完畢后,檢測(cè)兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線,如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線一致則說明兩個(gè)ELISA試劑盒檢測(cè)的同一個(gè)指標(biāo)而非A和B,即該試劑盒為假貨ELISA試劑盒;
f. 如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線不一致則說明兩個(gè)ELISA試劑盒檢測(cè)的不同指標(biāo),試劑盒A只能檢測(cè)A,不能檢測(cè)B,即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。