標(biāo)準(zhǔn)曲線做的好與壞會(huì)直接影響到實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，甚至是關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗。影響ELISA試劑盒曲線問(wèn)題的原因做了如下總結(jié)：
一、OD值不正常的可能原因是：
1、試劑盒未回溫，試劑盒回溫到25℃；
2、溫度控制不好，控制正確溫度；
3、孵育時(shí)間不準(zhǔn)確，控制孵育時(shí)間；
4、洗滌時(shí)沖擊力太大、浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、洗滌次數(shù)增 加，洗滌4-5次，每孔250ul，然后拍干；
5、陽(yáng)光直射，對(duì)著風(fēng)直接吹，避風(fēng)避；
6、酶標(biāo)儀的波長(zhǎng)錯(cuò)誤，酶標(biāo)儀的波長(zhǎng)450nm；
7、抗體的稀釋錯(cuò)誤，正確的稀釋抗體；
8、水質(zhì)問(wèn)題，用娃哈哈礦泉水代替。

二、白板的可能原因是：
1、洗滌液配制錯(cuò)誤，正確的配制洗滌液；
2、少加液體（錯(cuò)加液體），正確的步驟加液體。

三、無(wú)梯度可能原因是：
1、標(biāo)準(zhǔn)品也污染，換標(biāo)準(zhǔn)品點(diǎn)板；
2、OD值不正常，控制溫度時(shí)間在做一次；
3、人為點(diǎn)板，不要點(diǎn)板。

四、 線性不好可能原因是：
OD值不正常，控制溫度時(shí)間在做一次。