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一抗和二抗在結(jié)合能力、用途及應用上的區(qū)別

瀏覽次數(shù):2289 發(fā)布日期:2022-2-25  來源:蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司

抗體有一抗和二抗的區(qū)別,抗體也稱免疫球蛋白是免疫系統(tǒng)響應“外來"物質(zhì)(即微生物上存在的抗原)而產(chǎn)生的糖蛋白。每種抗體都是不相同的,它們會與其同源抗原結(jié)合并中和感染過程中微生物產(chǎn)生的毒素?贵w存在于血漿、血清、唾液和眼淚等體液中。事實上,它們約占血漿中蛋白質(zhì)的 20%。


抗體結(jié)構(gòu)
 

抗體屬于 Y 形分子,它的結(jié)構(gòu)主要是由3個部分所組成的。
 

它們總共有4條鏈:即兩條輕鏈與兩條重鏈。這些鏈的特定結(jié)構(gòu)和組合允許抗體分子同時與多個細胞結(jié)合?贵w分子的不同部分可以結(jié)合多種抗原,也可以結(jié)合一些效應分子。
 

抗體的可變區(qū)或V區(qū)表示/指Y結(jié)構(gòu)的兩個臂,該區(qū)域可以與抗原結(jié)合。相比之下,Y 結(jié)構(gòu)的莖被稱為恒定區(qū)或 C 區(qū),它只能與有限數(shù)量的效應細胞和分子結(jié)合。


一抗和二抗


經(jīng)常產(chǎn)生抗體用于研究。它們根據(jù)其結(jié)合能力和用途分為初級和次級。


可以與特定蛋白質(zhì)或感興趣的生物分子結(jié)合的抗體稱為一抗。以大鼠、小鼠、山羊和兔等動物為宿主,以單克隆 (mAb) 或多克隆抗體 (pAb) 的形式生產(chǎn)一抗。


MAb 或 pAb 各有優(yōu)缺點,在選擇一抗之前需要考慮這些優(yōu)缺點。

MAb 由動物的單個 B 細胞克隆產(chǎn)生,因此僅針對抗原的一個表位。

PAb 由動物的多個 B 細胞克隆產(chǎn)生,并且具有針對抗原的幾個表位的抗體的異質(zhì)混合物。


MAb 非常適合相同的生產(chǎn)和標準化實驗,并且產(chǎn)生的背景染色最少或不產(chǎn)生背景染色。在使用 mAb 時,與不需要的蛋白質(zhì)發(fā)生交叉反應的可能性也降低了。


由于 pAb 可以結(jié)合單一抗原的多個表位,因此它們能夠識別抗原中的微小變化。它們還產(chǎn)生更強的抗原檢測信號。因 此,它們非常適合涉及變性蛋白質(zhì)的實驗。 


一抗和二抗的應用
 

一抗可用于檢測糖尿病、癌癥、阿爾茨海默病和帕金森病的生物標志物。
 

二抗則主要用于檢測和純化抗原蛋白。
 

二抗在標記和檢測方面比較靈敏和靈活——所以,它們在流式細胞術(shù)、蛋白質(zhì)印跡和細胞成像等一系列應用中用于一抗的比色、化學發(fā)光和熒光檢測。
 

二抗類型的選擇基于一抗的類別:免疫球蛋白 IgG 或 IgM、標簽類型和來源宿主。
 

由于大多數(shù)一抗是使用少數(shù)宿主物種開發(fā)的,并且大多數(shù)一抗屬于 IgG 類,因此制造商通常提供可用于許多不同檢測程序和系統(tǒng)的即用型二抗。


常用的二抗有抗兔 IgG、抗小鼠 IgG、抗雞 IgG 或抗山羊 IgG。所選擇的二抗應始終能夠識別產(chǎn)生一抗的宿主物種,例如,為了檢測從小鼠產(chǎn)生的一抗,使用抗小鼠二抗。


在 ELISA 和蛋白質(zhì)印跡中,標記通常是化學發(fā)光、比色或基于熒光的,但在流式細胞術(shù)和免疫熒光中,僅使用熒光標記。

來源:蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司
聯(lián)系電話:0512-62956104
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