二抗通常在各種免疫分析（例如蛋白質(zhì)印跡、免疫組化和免疫細(xì)胞化學(xué)或細(xì)胞成像）中用作檢測(cè)試劑。但選擇適合二抗的重要性有時(shí)卻會(huì)被忽略。

二抗與其他抗體一樣，其被設(shè)計(jì)為靶向特異性抗原。所有二抗的靶標(biāo)都是免疫球蛋白 (Ig)，因此其能夠結(jié)合一抗并用作免疫分析的檢測(cè)試劑。所以在為實(shí)驗(yàn)選擇適合一抗時(shí)需要考慮的諸多因素同樣也適用于二抗的選擇。為實(shí)驗(yàn)選擇合適的二抗，能大大改善您的檢測(cè)結(jié)果。相反，二抗問(wèn)題所產(chǎn)生的不利影響和一抗的相當(dāng)。主要通過(guò)三項(xiàng)參數(shù)確定抗體性能：

1. 特異性：指抗體識(shí)別對(duì)應(yīng)靶抗原但不識(shí)別結(jié)構(gòu)類似抗原的程度。該參數(shù)對(duì)二抗尤為重要，原因是其靶抗原為免疫球蛋白，其不同類型乃至物種之間的同源性通常較高。
2. 靈敏度：指抗體能夠檢出的抗原量。靈敏度不僅取決于二抗的結(jié)合親和力（通常較高），標(biāo)記本身以及抗體標(biāo)記程度也很關(guān)鍵。
3. 一致性：指使用不同批次抗體執(zhí)行分析時(shí)，結(jié)果幾乎沒(méi)有差異。一致性主要受抗體來(lái)源及其克隆狀態(tài)的影響。