國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒操作技術(shù)步驟如下
瀏覽次數(shù):240 發(fā)布日期:2021-2-4
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國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒操作步驟
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抗體:一抗、二抗、進(jìn)口原裝抗體、進(jìn)口分裝抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、單標(biāo)抗體、雙標(biāo)抗體、多標(biāo)抗體;免疫組化抗體、免疫細(xì)胞化學(xué)抗體、免疫熒光抗體、流式細(xì)胞抗體。抗體:一抗、二抗、進(jìn)口原裝抗體、進(jìn)口分裝抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、單標(biāo)抗體、雙標(biāo)抗體、多標(biāo)抗體;免疫組化抗體、免疫細(xì)胞化學(xué)抗體、免疫熒光抗體、流式細(xì)胞抗體。
動(dòng)物血清:內(nèi)皮細(xì)胞血清、GIBCO胎牛清、HyClone。動(dòng)物血清:內(nèi)皮細(xì)胞血清、GIBCO胎牛清、HyClone。
細(xì)胞:原裝進(jìn)口細(xì)胞、正常細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、腫瘤耐藥細(xì)胞。細(xì)胞:原裝進(jìn)口細(xì)胞、正常細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、腫瘤耐藥細(xì)胞。
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒.
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50µl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測(cè)樣品 10µl(樣品最終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。