综合图区亚洲网友自拍|亚洲黄色网络|成人无码网WWW在线观看,日本高清视频色视频kk266,激情综合五月天,欧美一区日韩一区中文字幕页

English | 中文版 | 手機版 企業(yè)登錄 | 個人登錄 | 郵件訂閱
當前位置 > 首頁 > 技術(shù)文章 > 小鼠脾臟樹突狀細胞的分離方法簡介

小鼠脾臟樹突狀細胞的分離方法簡介

瀏覽次數(shù):1580 發(fā)布日期:2015-4-12  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責任自負

小鼠脾臟DC是研究最多的淋巴組織DC,其特征為組成性表達MHC-II類分子和CD11c。該細胞群可進一步分為三群:主要分布于邊緣區(qū)的CD4+CD8-CD11b+DC,主要分布于T細胞區(qū)的CD4-CD8+CD11b-DC和雙陰性DC----CD4-CD8+CD11b+。其中,CD8+DC表達CD1d和DEC-205。我們可以根據(jù)需要選擇不同的方法將脾臟DC分選出來。

 
    (一)貼壁法

     小鼠脾臟DC在體外可黏附于玻璃或塑料表面,但培養(yǎng)18-24h后,其黏附能力喪失,借此可與巨噬細胞分離。該方法無需特殊試劑,不需要進行密度梯度離心,操作簡單、省時。但用此方法獲取的DC數(shù)量少,純度低,而且分離所得的DC處于不同的分化階段,無法滿足精細實驗的需要。

    (二)磁珠分選法

     CD11c表達于所有已知小鼠DC表面,所以將包被了磁珠的CD11c抗體與小鼠淋巴組織或非淋巴組織懸液共孵育并置于磁場后,結(jié)合了CD11c抗體的細胞將留在分選柱中,脫離磁場后可分離得到CD11c陽性的DC。該方法簡單易行,若操作得當,細胞純度可以達到95%以上。但需購置相應(yīng)分選設(shè)備及試劑,花費較高。

    (三)流式細胞儀分選

    DC表面表達多種相對特異性的表面標志,可根據(jù)實驗需要,選用某些特定表面標志的單克隆熒光抗體作標記,明確目的細胞群,通過流式細胞儀做自動分選。
該方法可以根據(jù)多個標記進行細胞分選,彌補了MACS分選的不足,而且分離得到的DC細胞純度更高。但是采用FCM分選目前存在的主要問題是DC的種類很多,發(fā)育的過程和表面特征標志目前尚未完全清楚。因此,在做DC分離時,必須視標本來源及目的細胞選擇合適的單克隆抗體精選標記。另外,進行流式分選必須購置具有分選功能的流式細胞儀,價格昂貴,對操作人員的技術(shù)也有較高要求。

閱讀原文:http://www.liankebio.com/TechServiceShow/articleID/2015040012.html

來源:杭州聯(lián)科生物技術(shù)股份有限公司
聯(lián)系電話:4006721600
E-mail:network@liankebio.com

用戶名: 密碼: 匿名 快速注冊 忘記密碼
評論只代表網(wǎng)友觀點,不代表本站觀點。 請輸入驗證碼: 8795
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網(wǎng) 電話:021-64166852;13621656896 E-mail:info@bio-equip.com