利用病毒表達(dá)系統(tǒng)則可快速感染細(xì)胞,在幾天內(nèi)使外源基因整合到細(xì)胞染色體穩(wěn)定表達(dá),借助于慢病毒載體表達(dá)系統(tǒng)構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系這一方法已廣泛應(yīng)用。
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動物細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)外源重組蛋白可利用質(zhì)粒轉(zhuǎn)染和慢病毒感染等方式實現(xiàn),利用脂質(zhì)體包裹質(zhì)粒轉(zhuǎn)染篩選獲得穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染細(xì)胞需至幾個月時間,而利用病毒表達(dá)系統(tǒng)則可快速感染細(xì)胞,在幾天內(nèi)使外源基因整合到細(xì)胞染色體穩(wěn)定表達(dá),借助于慢病毒載體表達(dá)系統(tǒng)構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系這一方法已廣泛應(yīng)用。慢病毒及逆轉(zhuǎn)錄病毒,常用的真核表達(dá)載體及病毒載體中都攜帶抗藥性篩選基因和示蹤基因。篩選后可以獲得穩(wěn)定表達(dá)外源基因或沉默內(nèi)源基因的細(xì)胞系。
密生生物技術(shù)公司利用慢病毒系統(tǒng)提供基因過表達(dá)穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株(系)、基因knockout穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株(系)構(gòu)建定制服務(wù)。點(diǎn)擊查看項目詳情
技術(shù)特點(diǎn)
♦ 技術(shù)平臺:慢病毒表達(dá)系統(tǒng)
♦ 藥物篩選
服務(wù)流程
♦ 藥物濃度測定:通過空白細(xì)胞施藥檢測,以10-12天細(xì)胞全部死亡的抗生素濃度為篩選濃度。
♦ 以轉(zhuǎn)染當(dāng)天培養(yǎng)皿中細(xì)胞達(dá)到70%-80%覆蓋為接種條件。
♦ 脂質(zhì)體或慢病毒細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)。
♦ 抗生素藥物篩選。
♦ 鑒定篩選結(jié)果(Q-PCR和WB)。
客戶提供
♦ 目的基因質(zhì);蛘邩(gòu)建好的基因表達(dá)載體。
♦ 靶細(xì)胞系(規(guī)格不少于1X10^6細(xì)胞,可穩(wěn)定傳代,細(xì)胞倍增時間小于48小時。對于cas9/gRNA knockout細(xì)胞模型構(gòu)建,要確
保靶基因被knockout之后,不會發(fā)生嚴(yán)重的細(xì)胞凋亡現(xiàn)象)。
♦ 細(xì)胞培養(yǎng)條件的說明。
結(jié)果提供
♦ 完整實驗報告
♦ 穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系及相關(guān)實驗報告