細胞介紹
該細胞來源于中山醫(yī)院，生長較緩慢。
細胞特性
1）?來源：肝癌
2）?形態(tài)：上皮細胞樣，貼壁生長
3）?含量：>1x106 個/mL
4）?污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5）?規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式
（1）干冰運輸，收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇；
（2）存活細胞，收到后應繼續(xù)生長，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
（3）收到細胞后請拍照，3天內如果發(fā)現污染，請及時拍照與我們聯系。
細胞接收后的處理：
1） 收到細胞后，請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況，若發(fā)現培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯系我們。
2） 在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)時，最好在低倍鏡（4或5X物鏡)下進行，能準確判斷細胞的傳代密度�？醇毎�的形態(tài)請在10X和20×物鏡下，同時給剛收到的細胞拍照，（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為細胞需要售后時提供收到細胞時細胞狀態(tài)的依據。
3） 觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h。
4） 貼壁細胞：在運輸過程中貼壁細胞會有脫落的現象，如發(fā)現貼壁細胞有脫落或者脫落后抱團生長，可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中（或新的培養(yǎng)瓶中）。
5） 懸浮細胞：T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中（加入按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基）。
6）
備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。??收到細胞后第一次傳代建議1：2傳代 。
細胞用途：
僅供科研使用。????
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程，供參考
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）?
準備DMEM培養(yǎng)基；優(yōu)質胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2）?
培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）?凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
二．?細胞處理：
1）?復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）?細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.?棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.?加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入2ml此細胞完全培養(yǎng)基終止消化。
3.?輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.?移入到事先準備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
注：第一次傳代推薦傳代比例為1:2，以后傳代比例可根據客戶需要自己決定。
3）?細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。
下面T25瓶為類；
1，細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數板計數。
2，4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞，根據細胞數量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細胞密度不低于1x10E6/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識。
3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

廈門逸漠生物科技有限公司(Xiamen Immocell Biotechnology Co.,Ltd.)坐落于廈門國家留學創(chuàng)業(yè)園(翔安)產業(yè)園，是一家專注于細胞生物學領域新產品、新技術開發(fā)的高新技術企業(yè)。
公司擁有一支具有深厚造詣和豐富經驗的高端技術人才，建設了高規(guī)格的研發(fā)實驗室與生產車間，建立了規(guī)范的研發(fā)、生產、銷售、客服管理體系。
公司與國內外多家醫(yī)院、高等院校、科研院所、生物醫(yī)藥公司建立了良好的合作關系，贏得了良好的市場聲譽和廣泛的客戶認可，將努力成為生命科學界可靠的合作伙伴和堅強的技術后盾。
企業(yè)文化我們的使命：
深耕細胞技術，共筑人類健康從細胞技術著手，深入地、多維度地進行探索與積累,發(fā)展新產品與、新技術服務于生命科技探索以及人類疾病診療、人類健康發(fā)展事業(yè)。
我們的愿景：
成為生命科學領域被認可與喜歡的公司我們旨在構建細胞資源與應用中心。我們追求為客戶提供靠譜的產品與技術，讓他們能夠省心省力的專注于自己的科研工作。我們的愿景是讓客戶獲得成功的同時。成為他們的心中認可與喜歡的公司。
我們的經營理念：
1.精益求精、開拓創(chuàng)新把成熟的產品做到非凡，把創(chuàng)新的產品做到超乎想象。
2.專業(yè)高效、合作共贏專業(yè)就是力量，專業(yè)才能高效;合作就會發(fā)展、合作才能共贏。我們秉持這種理念，以我們專業(yè)的產品和服務，與廣大合作伙伴共同應對挑戰(zhàn),共同發(fā)展進步。
我們的價值觀：
1.勇于探索逸漠的精髓基于勇敢地探索，于逆境中的自我激勵、奮然而起，于順境中自我挑戰(zhàn)、自我超越。逸漠人選擇創(chuàng)造更多的價值，選擇擁有精彩的人生。
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3.守護誠信逸漠發(fā)展的過程就是不斷被別人認可的過程。我們忠誠于自己的事業(yè)，守信于他人的事務，這是我們的寶貴的財富、強大的基石。我們建立誠信、珍惜誠信，可以讓我們更加專注于處理自己的事情，也讓事情處理起來更加簡單、高效。
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