293T細(xì)胞源自于293細(xì)胞株
是插入了猿類免疫缺陷病毒
SV40T-抗原基因后產(chǎn)生的高轉(zhuǎn)染效率的衍生株
用于包裝慢病毒
轉(zhuǎn)染效率比293細(xì)胞高很多
是研究基因功能的一個(gè)強(qiáng)大工具
293T貼壁生長(zhǎng)
顯微鏡下呈上皮細(xì)胞樣
含有SV40復(fù)制起始點(diǎn)與啟動(dòng)子區(qū)的質(zhì)?梢詮(fù)制
從而提高外源基因的表達(dá)水平
該細(xì)胞經(jīng)本庫(kù)STR鑒定結(jié)果無誤
且支原體檢測(cè)陰性
293T細(xì)胞推薦使用DMEM培養(yǎng)基
含10%胎牛血清
在37度5%二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
細(xì)胞生長(zhǎng)快
通常倍增時(shí)間不到16-24小時(shí)
每2-3天1:4至1:6傳代
細(xì)胞融合度達(dá)到80%即可傳代
293T細(xì)胞注意事項(xiàng)
1、吹打動(dòng)作盡量輕柔,控制在10-20次
2、推薦使用DMEM培養(yǎng)基
3、血清批間容易導(dǎo)致293T細(xì)胞的狀態(tài)差異;
4、生長(zhǎng)快速時(shí)倍增時(shí)間不到16-24H,1:4-1:6傳代;
5、換液時(shí)需預(yù)熱培養(yǎng)基,加液操作時(shí)槍頭不要對(duì)著細(xì)胞;
6、貼壁不牢時(shí)胰酶使用濃度,以便控制消化時(shí)間;
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