即用型細(xì)胞凍存液

直接凍存于-80℃冰箱，長(zhǎng)期保存（>5 年），不需要程序性降溫

高安全性，病毒、病菌和支原體等污染可能性低

細(xì)胞存活率和活力高，批次性差異小

1.常規(guī)方法收集對(duì)數(shù)期的貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞于試管中。

2.根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的密度和凍存管的大小確定所需凍存細(xì)胞數(shù)。

3.將所需數(shù)目的細(xì)胞懸浮液置于離心管中，1000rmp，5 分鐘離心收集培養(yǎng)細(xì)胞沉淀，徹底棄去離心管中的上清液。

4.加入適量的IMMOCELL細(xì)胞凍存液于離心管中，使細(xì)胞濃度約為 5x105-1x107/ml。輕柔地混勻細(xì)胞，制成細(xì)胞混合液。

5.將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)記的凍存管中，建議每管 1ml 或 1.5ml。

6.直接將分裝好的細(xì)胞凍存管放入-80℃超低溫冰箱中，可長(zhǎng)期冷凍保存。

7.如果想液氮中長(zhǎng)期保存，需先放入-80℃冰箱至少一天時(shí)間，方可移至液氮罐中保存。

1.從冰箱中取出凍存的細(xì)胞，立即放入 37℃水浴槽中快速解凍。

2.待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后，立即加入 1ml 細(xì)胞培養(yǎng)基于冷凍管中與細(xì)胞混合，將其中的混合液移至含有約 5ml 該細(xì)胞培養(yǎng)基的離心管中，1000rmp，5 分鐘離心收集凍存細(xì)胞沉淀，移去上清液（操作時(shí)小心，切勿將細(xì)胞沉淀移去）。

3.加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基，使用移液管緩緩加入到細(xì)胞沉淀，輕柔地混勻，將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)容器中。

4.鏡檢細(xì)胞后，可根據(jù)各自研究的需要和方法經(jīng)行細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)。