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                                當(dāng)前位置 > 首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 鱟試驗(yàn)法在藥物內(nèi)毒素含量檢測(cè)中的應(yīng)用探究

                                鱟試驗(yàn)法在藥物內(nèi)毒素含量檢測(cè)中的應(yīng)用探究

                                瀏覽次數(shù):76 發(fā)布日期:2025-2-18  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
                                在藥物質(zhì)量控制中,內(nèi)毒素含量的檢測(cè)至關(guān)重要。鱟試驗(yàn)法(LT法)在檢測(cè)藥物內(nèi)毒素方面有著獨(dú)特的地位。

                                美國(guó)FDA已將LT法確定為法定的藥物內(nèi)毒素檢測(cè)方法。當(dāng)應(yīng)用鱟試劑進(jìn)行檢測(cè)時(shí),其敏感性不得低于0.2EU/mL,并且要充分考慮藥物中內(nèi)毒素的耐受限量(Tolerance limit),這個(gè)限量等于每mg或每ml產(chǎn)物中內(nèi)毒素的允許量。

                                對(duì)于藥物的內(nèi)毒素檢測(cè),如果一種藥品未通過(guò)LT法檢測(cè),即便通過(guò)了RT法(家兔熱原試驗(yàn),Rabbit pyrogen test),除RT法由官方進(jìn)行的情況外,這種藥物也不能出廠。

                                某些藥物,特別是那些已知有抑制或增強(qiáng)LT反應(yīng)的藥物,必須進(jìn)行抑制/增強(qiáng)試驗(yàn)。

                                鱟試驗(yàn)法在藥物內(nèi)毒素含量檢測(cè)中的應(yīng)用探究.jpg

                                一、抗生素內(nèi)毒素含量的LT法檢測(cè)
                                1、多數(shù)抗生素適用LT法
                                應(yīng)用LT法檢測(cè)抗生素中內(nèi)毒素的含量是非常適宜的。大多數(shù)常用的抗生素,如林可霉素、氯霉素、慶大霉素、雙氫鏈霉素、乳酸鹽紅霉素等并不抑制LT反應(yīng),所以可以直接采用LT法進(jìn)行測(cè)定。

                                2、部分抗生素需特殊處理
                                然而,有一些抗生素溶液能抑制LT反應(yīng),在這種情況下必須進(jìn)行抑制試驗(yàn)。具體做法是用足量的無(wú)熱原水進(jìn)行稀釋,直至達(dá)到該抗生素不能抑制LT凝膠作用的最高濃度后再進(jìn)行試驗(yàn)。由于這些抗生素可能抑制LT反應(yīng),所以采用的鱟試劑的敏感度必須等于或超過(guò)藥典規(guī)定的熱原試驗(yàn)的敏感度。

                                在能抑制LT反應(yīng)的藥物中,青霉素類藥物較為典型。其抑制機(jī)理目前尚不明確,一種觀點(diǎn)認(rèn)為青霉素對(duì)細(xì)菌細(xì)胞壁所含的酶起作用;另一種觀點(diǎn)認(rèn)為青霉素對(duì)LT凝膠形成的抑制作用與它們的血清蛋白結(jié)合率有顯著相關(guān)(p < 0.01)。例如BRL1071青霉素,其血清蛋白結(jié)合率最高,對(duì)LT反應(yīng)的抑制作用也最強(qiáng),僅需1.5mmol就能起抑制作用。鹽酸四環(huán)素對(duì)LT反應(yīng)也有抑制作用,原因是抗生素溶液pH過(guò)低(約4)。

                                值得注意的是,用LT法測(cè)定抗生素中內(nèi)毒素含量比RT法敏感10 - 100倍。

                                二、抗腫瘤藥物內(nèi)毒素含量的LT法檢測(cè)
                                1、內(nèi)毒素污染的風(fēng)險(xiǎn)
                                腫瘤化學(xué)療劑的副反應(yīng)較多,有些與應(yīng)用內(nèi)毒素后的反應(yīng)相似,所以其不良反應(yīng)可能是由于內(nèi)毒素污染造成的。例如,左旋門冬酰胺酶由大腸桿菌或歐氏(Erwinia)植病桿菌制備,由大腸桿菌制備的門冬酰胺酶每1000單位含內(nèi)毒素超過(guò)1ng,由歐氏桿菌制備的酶中也發(fā)現(xiàn)有微量?jī)?nèi)毒素;博萊霉素、柔紅霉素、長(zhǎng)春新堿等藥品也存在少量?jī)?nèi)毒素,一般為0.1 - 5ng/ml。

                                2、 LT法的適用性
                                因?yàn)橛行┛鼓[瘤藥有細(xì)胞毒性,不宜采用RT法,所以LT法用于抗腫瘤藥物中內(nèi)毒素的檢測(cè)是可行且適宜的。在實(shí)際操作中,試管法仍然是最實(shí)用的方法。

                                綜上所述,鱟試驗(yàn)法(LT法)在藥物內(nèi)毒素檢測(cè)中有著不可替代的作用,無(wú)論是常見(jiàn)抗生素還是抗腫瘤藥物,都需要依據(jù)其特性準(zhǔn)確運(yùn)用LT法來(lái)確保藥物內(nèi)毒素含量在安全范圍內(nèi)。

                                來(lái)源:科德角國(guó)際生物醫(yī)學(xué)科技(北京)有限公司
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