一、抗生素內(nèi)毒素含量的LT法檢測(cè)
1、多數(shù)抗生素適用LT法
應(yīng)用LT法檢測(cè)抗生素中內(nèi)毒素的含量是非常適宜的。大多數(shù)常用的抗生素,如林可霉素、氯霉素、慶大霉素、雙氫鏈霉素、乳酸鹽紅霉素等并不抑制LT反應(yīng),所以可以直接采用LT法進(jìn)行測(cè)定。
2、部分抗生素需特殊處理
然而,有一些抗生素溶液能抑制LT反應(yīng),在這種情況下必須進(jìn)行抑制試驗(yàn)。具體做法是用足量的無(wú)熱原水進(jìn)行稀釋,直至達(dá)到該抗生素不能抑制LT凝膠作用的最高濃度后再進(jìn)行試驗(yàn)。由于這些抗生素可能抑制LT反應(yīng),所以采用的鱟試劑的敏感度必須等于或超過(guò)藥典規(guī)定的熱原試驗(yàn)的敏感度。
在能抑制LT反應(yīng)的藥物中,青霉素類藥物較為典型。其抑制機(jī)理目前尚不明確,一種觀點(diǎn)認(rèn)為青霉素對(duì)細(xì)菌細(xì)胞壁所含的酶起作用;另一種觀點(diǎn)認(rèn)為青霉素對(duì)LT凝膠形成的抑制作用與它們的血清蛋白結(jié)合率有顯著相關(guān)(p < 0.01)。例如BRL1071青霉素,其血清蛋白結(jié)合率最高,對(duì)LT反應(yīng)的抑制作用也最強(qiáng),僅需1.5mmol就能起抑制作用。鹽酸四環(huán)素對(duì)LT反應(yīng)也有抑制作用,原因是抗生素溶液pH過(guò)低(約4)。
值得注意的是,用LT法測(cè)定抗生素中內(nèi)毒素含量比RT法敏感10 - 100倍。
二、抗腫瘤藥物內(nèi)毒素含量的LT法檢測(cè)
1、內(nèi)毒素污染的風(fēng)險(xiǎn)
腫瘤化學(xué)療劑的副反應(yīng)較多,有些與應(yīng)用內(nèi)毒素后的反應(yīng)相似,所以其不良反應(yīng)可能是由于內(nèi)毒素污染造成的。例如,左旋門冬酰胺酶由大腸桿菌或歐氏(Erwinia)植病桿菌制備,由大腸桿菌制備的門冬酰胺酶每1000單位含內(nèi)毒素超過(guò)1ng,由歐氏桿菌制備的酶中也發(fā)現(xiàn)有微量?jī)?nèi)毒素;博萊霉素、柔紅霉素、長(zhǎng)春新堿等藥品也存在少量?jī)?nèi)毒素,一般為0.1 - 5ng/ml。
2、 LT法的適用性
因?yàn)橛行┛鼓[瘤藥有細(xì)胞毒性,不宜采用RT法,所以LT法用于抗腫瘤藥物中內(nèi)毒素的檢測(cè)是可行且適宜的。在實(shí)際操作中,試管法仍然是最實(shí)用的方法。
綜上所述,鱟試驗(yàn)法(LT法)在藥物內(nèi)毒素檢測(cè)中有著不可替代的作用,無(wú)論是常見(jiàn)抗生素還是抗腫瘤藥物,都需要依據(jù)其特性準(zhǔn)確運(yùn)用LT法來(lái)確保藥物內(nèi)毒素含量在安全范圍內(nèi)。