鱟試劑使用指南之正確操作與質(zhì)量把控
瀏覽次數(shù):246 發(fā)布日期:2025-2-12
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鱟試劑作為檢測細(xì)菌內(nèi)毒素的關(guān)鍵工具,其正確使用和質(zhì)量把控至關(guān)重要,直接關(guān)系到檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
保證所使用鱟試劑的質(zhì)量是首要任務(wù)。鱟試劑的質(zhì)量主要體現(xiàn)在靈敏度、自凝時(shí)間與成膠狀態(tài)三個(gè)關(guān)鍵方面。優(yōu)質(zhì)的鱟試劑應(yīng)具備穩(wěn)定的靈敏度,就像一把精準(zhǔn)的標(biāo)尺,能夠始終如一地準(zhǔn)確衡量細(xì)菌內(nèi)毒素的含量;自凝時(shí)間不低于24小時(shí),這意味著它在正常存儲(chǔ)和使用過程中,不會(huì)輕易發(fā)生自行凝集的情況,保證了試劑的穩(wěn)定性和可靠性;反應(yīng)后能形成堅(jiān)實(shí)凝膠,將成膠安瓿翻轉(zhuǎn)180°而不會(huì)被破壞,這一特性確保了檢測結(jié)果的清晰可辨。而質(zhì)量稍差的鱟試劑,存放一段時(shí)間后(如半年),其靈敏度可能會(huì)發(fā)生變化,就如同標(biāo)尺的刻度出現(xiàn)了偏差,導(dǎo)致測定結(jié)果所反映的供試品中內(nèi)毒素的允許限值發(fā)生改變,從而影響對樣品質(zhì)量的準(zhǔn)確判斷。因此,在選擇鱟試劑時(shí),一定要選擇具有國家頒發(fā)的批準(zhǔn)文號、質(zhì)量穩(wěn)定的產(chǎn)品,為檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。
對鱟試劑靈敏度進(jìn)行監(jiān)測性復(fù)核也是不可或缺的環(huán)節(jié)。由于不同廠家生產(chǎn)的鱟試劑質(zhì)量存在差異,即使是同一廠家不同批號的鱟試劑,其性能也可能不盡相同,這就使得鱟試劑靈敏度復(fù)核值與標(biāo)示值往往不一致。而鱟試劑的復(fù)核值對檢測結(jié)果有著顯著影響,就像射擊時(shí)瞄準(zhǔn)鏡的校準(zhǔn)偏差會(huì)直接導(dǎo)致射擊偏離目標(biāo)一樣。每使用新批號鱟試劑時(shí),都應(yīng)復(fù)核其靈敏度,對留樣鱟試劑自生產(chǎn)之日起,每6個(gè)月進(jìn)行一次靈敏度檢測,確保其在有效期內(nèi)符合規(guī)定。研究表明,在符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定及適當(dāng)?shù)馁A存條件下,3年內(nèi)鱟試劑的靈敏度變化不大,是相對穩(wěn)定的,這也為適當(dāng)延長其有效期提供了參考依據(jù)。通過對鱟試劑靈敏度的監(jiān)測性復(fù)核,能夠及時(shí)發(fā)現(xiàn)試劑性能的變化,確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性,同時(shí)也能最大程度地合理使用鱟試劑,避免資源浪費(fèi)。
在使用過程中,正確操作是確保檢測結(jié)果準(zhǔn)確的關(guān)鍵。選擇合適的操作方法與順序,猶如精心編排一場舞蹈,每一個(gè)動(dòng)作都至關(guān)重要。實(shí)驗(yàn)室要求潔凈、無塵埃流通,檢驗(yàn)人員也要注意保持個(gè)人衛(wèi)生,在整個(gè)使用操作過程中,要防止微生物的污染,比如空氣的流動(dòng)、人員的口沫、汗液等都可能帶來干擾因素,影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。鱟試劑開啟、溶解和配制時(shí),應(yīng)盡量避免將安瓿外瓶壁臟物、瓶壁碎片、砂輪鋸屑等異物混入鱟試劑中,防止鱟試劑受到外部損傷,進(jìn)而影響其性能。
鱟試劑中含有多種蛋白質(zhì),用力振搖會(huì)產(chǎn)生氣泡,而這些氣泡一旦產(chǎn)生就難以消除,會(huì)干擾檢測的準(zhǔn)確性,所以在整個(gè)操作過程中都要輕拿輕放,避免因過分震動(dòng)而引起誤差。量取和加樣反應(yīng)物時(shí),一定要加到試管底部接近鱟試液而不接觸鱟試液的管壁處,確保試劑充分反應(yīng),減少誤差。生成凝膠的最適pH值為6-8,對于氯化鈉注射液、葡萄糖注射液(5%,10%)等注射液,因其自身性質(zhì)穩(wěn)定,不需考慮供試液的pH值;而檢查其他制劑時(shí),尤其是一些本身緩沖能力較強(qiáng)或偏酸、堿的供試品,應(yīng)充分考慮供試品的pH值,必要時(shí)進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整,以保證檢測環(huán)境的適宜性。
使用時(shí)要嚴(yán)格控制溫度和時(shí)間,當(dāng)鱟試劑一加入內(nèi)毒素及樣品混合液中時(shí),反應(yīng)便立即開始,在一定的溫度范圍內(nèi),反應(yīng)溫度越高,反應(yīng)速率越大;但保溫時(shí)間的增長,雖然會(huì)提高鱟試劑的靈敏度,卻也增加了假陽性的發(fā)生概率,導(dǎo)致較大誤差。
因此,要密切注意控制溫度的變化和保溫時(shí)間,確保檢測結(jié)果的可靠性。每次檢驗(yàn)完畢,應(yīng)及時(shí)將玻璃器具充分清洗后于250℃干熱滅菌處理,待烤箱溫度升至設(shè)定的溫度后開始計(jì)時(shí),干烤至少1小時(shí),以保證實(shí)驗(yàn)器具的潔凈,避免殘留雜質(zhì)對后續(xù)檢測造成干擾。對于塑料、橡膠等不耐熱器材,可用30%雙氧水浸泡4小時(shí),用無熱原水沖洗,70℃干燥備用。