上一期給大家聊了聊芯片vs RNA-seq哪個(gè)好(點(diǎn)我點(diǎn)我),但很多同學(xué)可能會(huì)發(fā)現(xiàn),市場上的基因芯片有好多種啊,不知從何入手?今天就來818挑選基因芯片的小技巧。一句話—— 看研究目的。
先給大家科普兩個(gè)詞:
基因表達(dá)量:檢測基因表達(dá)量的芯片一般針對某個(gè)基因的的所有轉(zhuǎn)錄本設(shè)計(jì)探針,經(jīng)過對每個(gè)探針信號的算法,得到整個(gè)基因的表達(dá)量,經(jīng)常聽到的表達(dá)譜芯片就屬于這一種。
轉(zhuǎn)錄本表達(dá)量:針對每個(gè)基因不同轉(zhuǎn)錄本設(shè)計(jì)探針,除了分析基因表達(dá)量之外,還可以單獨(dú)分析每個(gè)轉(zhuǎn)錄本的表達(dá)量(那就可以用來研究大熱的可變剪接啦)。據(jù)小編所知,目前能做到這一點(diǎn)的,只有Affymetrix的HTA(新一代叫做Clariom)系列的芯片。
那么具體做研究的時(shí)候,有哪些選擇方案呢?
選擇1:大家是想找機(jī)制,還是找一個(gè)研究的靶標(biāo)?
機(jī)制簡單說來就是找變化的信號通路,而目前我們研究的信號通路基本都是由編碼基因組成的,因此選擇芯片的時(shí)候,只需要基因表達(dá)譜就可以了。
選擇2:找靶標(biāo),那是編碼基因呢,還是非編碼呢?
編碼基因同上就好。上一篇文章也提到了,編碼基因一直都是研究的主流,因此芯片價(jià)格也相對較低,性價(jià)比非常高。
但發(fā)文章的熱點(diǎn)也是可以追一追的,說不定就成了明星(CNS)同款了呢。非編碼的話,根據(jù)研究的對象主要分為兩種miRNA,lncRNA。miRNA因?yàn)槠味,?huì)有專門的探針設(shè)計(jì)方法,常常是獨(dú)立成一款芯片的。而lncRNA,因?yàn)樗臋C(jī)制最終也歸結(jié)到調(diào)控編碼基因的表達(dá),因此像Affymetrix之類的生產(chǎn)商就將它和編碼RNA放在了一張芯片上,一次性就可以搞定兩種,還可以研究它們相互之間的表達(dá)調(diào)控關(guān)系,非常的方便。
lncRNA研究注意點(diǎn):
人、大小鼠等模式生物,編碼基因基本都已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了,因此不同廠家的芯片檢測的基因是差不多的,就是那么20000多個(gè)。但LncRNA相對而言是新東西,近幾年成了熱點(diǎn)之后才有了一個(gè)大爆發(fā),發(fā)現(xiàn)了很多新的lncRNA分子,因此選擇芯片的時(shí)候,一個(gè)很重要的問題就是探針設(shè)計(jì)及注釋來源的數(shù)據(jù)庫新不新了,如果還是好幾年前的lncRNA芯片,那可能就會(huì)錯(cuò)失很多有意思的東西啦。
芯片選擇的技能點(diǎn),大家get到了嗎?
長按加關(guān)注