1. 長肽合成技術(shù)：
在現(xiàn)代生物學(xué)研究中，經(jīng)常會用到序列比較長的多肽，對于序列中含有60個以上氨基酸的多肽，通常會采用基因表達(dá)及SDS-PAGE法來獲得，但是這種方法周期長，最終產(chǎn)物分離效果差等，使固相法長肽合成技術(shù)成為一種需要。肽谷生物經(jīng)過長期的摸索與積累，對合成工藝及方法不斷優(yōu)化，解決了長肽合成難，純化難的問題，我們長肽合成成功率高，質(zhì)量穩(wěn)定。

1. 長肽合成面臨的困難及解決辦法

長肽合成中，我們一直面臨一個矛盾，即合成中隨著序列的增長，縮合反應(yīng)空間位阻增大，為了反應(yīng)完全，需要增加反應(yīng)時間；但是隨著反應(yīng)時間的延長，其產(chǎn)生的副反應(yīng)就越多， 一些缺殘基的目標(biāo)肽就隨之產(chǎn)生。這些缺殘基的肽鏈也是長肽合成過程中所產(chǎn)生的主要雜質(zhì)。 因此，長肽的合成過程中，我們需要克服的主要困難是探索更優(yōu)質(zhì)的反應(yīng)條件和反應(yīng)方法，從而使氨基酸縮合反應(yīng)進(jìn)行的更充分更徹底。同時縮短反應(yīng)時間，因為反應(yīng)時間越長，不可控的副反應(yīng)相對的就越多，副產(chǎn)物就越復(fù)雜。

為此，肽谷生物經(jīng)過多年的摸索與積累，總結(jié)出以下經(jīng)驗：
(1) 對于反應(yīng)時間實行精準(zhǔn)靈活的把控：我們在多肽合成多年的經(jīng)驗積累，使得我們對于多肽反應(yīng)時間能夠精準(zhǔn)把控，在反應(yīng)完全-減少副產(chǎn)物上能夠找到平衡點；
(2) 采用微波合成法：對于合成過程中出現(xiàn)的一些難以縮合的氨基酸，我們采用微波法進(jìn)行合成，該方法效果顯著，并且大大縮短了反應(yīng)時間，同時減少了兩種主要副產(chǎn)物的產(chǎn)生。
(3) 采用片段合成法：當(dāng)某些多肽用常規(guī)合成方法合成困難，并且難以純化時，我們也會采用將多肽中某一段的某幾個氨基酸縮合之后作為一個整體縮合到肽鏈上去，這種方法也能夠解決許多合成中存在的問題。
(4) 采用酰肼合成法：酰肼法合成多肽的方法是固相合成的N末端Cys多肽和C末端多肽酰肼之間的化學(xué)選擇性反應(yīng)形成酰胺鍵而實現(xiàn)多肽連接的方法。該方法根據(jù)肽鏈中Cys的位置，將整條肽鏈分成多條序列分別合成，最終經(jīng)過液相合縮反應(yīng)得到目標(biāo)肽， 該方法不僅大大縮短了長肽合成時間，而且顯著地提高了最終產(chǎn)物純度，因此廣泛適用于含有Cys的長鏈多肽的合成。

長肽純化
長肽的特殊性不可避免的導(dǎo)致最后得到的粗品肽組分復(fù)雜，因此，對于長肽的HPLC純化也是一項挑戰(zhàn)；我們通過在amyloid系列多肽純化過程中，吸取大量經(jīng)驗并成功用于長肽純化，我們通過采用先進(jìn)儀器，多純化體系混用，反復(fù)分離等經(jīng)驗手段，極大提升了我們長肽純化成功率。

2. 難溶多肽合成技術(shù)
在我們多肽生產(chǎn)純化過程中，經(jīng)常會遇到難溶的序列，這導(dǎo)致了眾多多肽公司多肽成產(chǎn)過程中收率低，難純化，成品純度不合格甚至多肽生產(chǎn)失敗等后果，這種難溶性與多肽自身的氨基酸組成及序列有密切關(guān)系，我們在多肽領(lǐng)域內(nèi)長期深入的研究，讓我們積累了大量的寶貴經(jīng)驗，保證我對于難溶肽的溶解純化保持很高的成功率和產(chǎn)品質(zhì)量。

我們對于難溶肽的溶解總結(jié)出以下幾點：
(1) 通常整體顯酸性的多肽溶解困難時可以加入適量的堿性溶液，而顯堿性的多肽溶解困難時可以加入適量的酸性溶液;。
(2) 序列中含有大量疏水性氨基酸或中性氨基酸時，難于直接溶于水，通常需要先加入少量有機(jī)溶劑，溶解完全后用蒸餾水大量稀釋，常用的有機(jī)溶劑有乙腈，DMSO，DMF，丙醇，異丙醇等;
(3) 當(dāng)肽鏈中含有Met或者Cys時，不能用DMSO溶解，因為DMSO有氧化性，這很可能會導(dǎo)致肽鏈中含有的S被氧化;
(4) 專肽專柱：我們在開發(fā)Amyloid系列產(chǎn)品的過程中，發(fā)現(xiàn)用DMOS溶解的產(chǎn)品純化后使用的純化柱基本就不能用于其他產(chǎn)品的純化，為了保證Amyloid產(chǎn)品的穩(wěn)定，我們對于Amyloid等類似產(chǎn)品都配用了專門的純化柱。

在不影響您實驗需求的情況下，也可以針對肽鏈的物理性質(zhì)，化學(xué)性質(zhì)和分子結(jié)構(gòu)，對多肽進(jìn)行修飾改變，增加其溶解性，以下是我們的建議：
(1) 修飾肽鏈中C端和N端：對于酸性肽，我們推薦C端乙�；�修��;對于堿性肽，我們推薦N端氨基化修飾;
(2) 修改肽鏈中的氨基酸序列：某些序列存在大量的連續(xù)的疏水性氨基酸，例如W, F, V,I, L, M, Y ,這些疏水氨基酸在序列中大量或者連續(xù)重復(fù)出現(xiàn)時，整條肽鏈通常是難溶的，為了增強(qiáng)肽的極性和親水性，我們建議客戶在不影響實驗結(jié)果的基礎(chǔ)上，延長序列，或者通過減少疏水性氨基酸的個數(shù)來增加溶解性。
(3) 替換序列中疏水性氨基酸的殘基：在不影響實驗結(jié)果的基礎(chǔ)上，用可溶性的氨基酸替代序列中的疏水性氨基酸可以達(dá)到增加溶解度的效果。我們通常用Gly, Ala來替換疏水性氨基酸，一般都會取得比較好的溶解效果，這也是一種保守但有效的增強(qiáng)多肽溶解度的方法。