本期和大家見面的是銀屑病靶向藥物評(píng)價(jià)模型——B6-hIL-17A人源化小鼠，先讓小賽帶大家了解一下銀屑病。

銀屑病
銀屑病，也被稱為“牛皮癬”，是一種慢性、復(fù)發(fā)性的自身免疫性皮膚病。主要癥狀包括在肘部、膝部、下背部和頭皮等部位出現(xiàn)瘙癢的鱗狀斑塊。全球約有1.25億人患有銀屑病，占總?cè)丝诘?%～3%^[1]。該病與免疫、遺傳、環(huán)境及內(nèi)分泌等因素有關(guān)，這些因素導(dǎo)致皮膚細(xì)胞異常增生和分化紊亂，從而在皮膚表面形成過多的皮膚細(xì)胞堆積。盡管銀屑病的機(jī)制和治療一直是皮膚科學(xué)界的研究熱點(diǎn)，但目前尚無(wú)治愈方法。癥狀的管理和控制主要依賴于識(shí)別或避免誘因、局部治療、光療、系統(tǒng)治療以及改變生活方式等方式。
 

正常皮膚層與銀屑病皮膚層差異示意圖^[2]

免疫失調(diào)與銀屑病
研究顯示，炎癥和自身免疫在銀屑病的發(fā)生和發(fā)展中起著關(guān)鍵作用�；颊叩腡細(xì)胞會(huì)攻擊健康的皮膚細(xì)胞，并吸引其他免疫細(xì)胞在皮膚內(nèi)引發(fā)炎癥和組織損傷。這導(dǎo)致表皮角質(zhì)形成細(xì)胞過度增殖和分化紊亂，使得新的皮膚細(xì)胞每隔幾天就會(huì)產(chǎn)生并堆積在皮膚表面，形成鱗狀丘疹。白細(xì)胞介素-23/白細(xì)胞介素-17（IL-23/IL-17）通路在銀屑病的自身免疫反應(yīng)中起著核心作用，其中IL-23通過激活Th17細(xì)胞來(lái)刺激促炎因子IL-17的產(chǎn)生。在角質(zhì)細(xì)胞中，IL-17A與其受體結(jié)合，刺激角質(zhì)細(xì)胞增殖，進(jìn)而導(dǎo)致炎癥介質(zhì)和趨化因子的釋放，引發(fā)炎癥反應(yīng)。因此，IL-17A是炎癥性疾病治療的重要靶點(diǎn)，靶向IL-17A的單克隆抗體已顯示出對(duì)銀屑病患者的治療效果^[3]。
 

IL-23/IL-17通路在銀屑病皮膚中對(duì)表皮角質(zhì)形成細(xì)胞的影響^[4]

賽業(yè)生物針對(duì)IL-17A靶向治療的研究，開發(fā)了B6-hIL-17A人源化小鼠模型（產(chǎn)品編號(hào)：C001510），并結(jié)合咪喹莫特（IMQ）誘導(dǎo)成功構(gòu)建了銀屑病模型，該模型可用于評(píng)價(jià)針對(duì)人源IL-17A的靶向藥物。

模型構(gòu)建和藥效評(píng)估示意圖
咪喹莫特（IMQ）軟膏涂抹能誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生與人類銀屑病相似的皮膚損傷和炎癥，是臨床前研究中常用的誘導(dǎo)方法。另一方面，依奇珠單抗（Ixekizumab）是一種人源化抗體，它通過結(jié)合并中和IL-17A，從而減輕炎癥，用于治療銀屑病等自身免疫性疾病^[5]。
 

使用IMQ誘導(dǎo)B6-hIL-17A小鼠銀屑病模型的建立及Ixekizumab藥效驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)方案

小鼠生長(zhǎng)曲線
在IMQ處理的藥物治療組和非治療組中，B6-hIL-17A小鼠和野生型小鼠的體重變化趨勢(shì)基本一致。
 

B6-hIL-17A小鼠和野生型小鼠生長(zhǎng)曲線

IMQ成功誘導(dǎo)B6-hIL-17A小鼠產(chǎn)生銀屑病樣表型
在連續(xù)涂抹IMQ軟膏第三天時(shí)，B6-hIL-17A小鼠的皮膚已出現(xiàn)明顯的鱗屑，嚴(yán)重部位的鱗屑以片狀形式掉落，部分區(qū)域出現(xiàn)紅斑，皮膚厚度略大于正常皮膚，皮膚表面變得粗糙。經(jīng)過Ixekizumab治療后，B6-hIL-17A小鼠的皮膚狀況有了明顯的改善。
 

IMQ誘導(dǎo)第三天時(shí)8周齡野生型小鼠、B6-hIL-17A小鼠和Ixekizumab治療組B6-hIL-17A小鼠皮膚對(duì)比

IMQ誘導(dǎo)B6-hIL-17A小鼠高表達(dá)人源IL-17A蛋白
IMQ誘導(dǎo)會(huì)引起小鼠體內(nèi)免疫細(xì)胞的激活和增殖，從而引起IL17A的表達(dá)量增加。經(jīng)過Ixekizumab治療后，B6-hIL-17A小鼠體內(nèi)的人源IL-17A蛋白表達(dá)顯著降低，其水平與正常小鼠相當(dāng)。
 

8周齡雌性B6-hIL-17A小鼠和野生型小鼠的人源IL-17A蛋白表達(dá)ELISA檢測(cè)結(jié)果

銀屑病面積和嚴(yán)重程度指數(shù)（PASI）
根據(jù)銀屑病面積和嚴(yán)重程度指數(shù)（PASI）標(biāo)準(zhǔn)，我們對(duì)各組小鼠的皮損面積和嚴(yán)重程度進(jìn)行了量化。結(jié)果顯示，涂抹IMQ后，B6-hIL-17A小鼠出現(xiàn)了皮損、鱗屑、紅斑和皮膚褶皺等癥狀。經(jīng)過Ixekizumab治療后，B6-hIL-17A小鼠的皮膚損傷和炎癥狀況得到了劑量依賴性的緩解。在高劑量Ixekizumab治療組，小鼠的各項(xiàng)PASI評(píng)分?jǐn)?shù)值明顯低于未治療組。
 

8周齡B6-hIL-17A小鼠和野生型小鼠經(jīng)IMQ處理和Ixekizumab治療后的PASI評(píng)分

Ixekizumab有效改善B6-hIL-17A小鼠的組織學(xué)病理
涂抹IMQ后，B6-hIL-17A小鼠的皮膚出現(xiàn)了角質(zhì)層角化過度或不全、表皮顆粒層變薄或消失、棘層增厚、皮突延長(zhǎng)或起伏以及真皮層中單一核或多核細(xì)胞浸潤(rùn)等銀屑病樣的組織學(xué)病理表型。經(jīng)過Ixekizumab治療后，這些癥狀在B6-hIL-17A小鼠皮膚中得到了明顯改善，且其治療效果呈劑量依賴性。
 

8周齡雌性B6-hIL-17A小鼠和野生型小鼠皮膚H&E染色、組織學(xué)評(píng)分和皮膚表層厚度檢測(cè)
 

總  結(jié)

在正常情況下，B6-hIL-17A小鼠通過Elisa能檢測(cè)到微量的人源IL-17A蛋白，咪喹莫特（IMQ）誘導(dǎo)后可以讓這種小鼠高度表達(dá)人源IL-17A蛋白，并出現(xiàn)皮膚鱗屑、紅斑和皮膚褶皺等銀屑病樣表型。Ixekizumab治療可以有效抑制B6-hIL-17A小鼠中IMQ誘導(dǎo)的銀屑病樣組織學(xué)病理表型，并顯著降低其體內(nèi)人源IL-17A蛋白水平，其治療效果呈劑量依賴性。因此，IMQ誘導(dǎo)的B6-hIL-17A小鼠可作為一種有效的模型，用于研究銀屑病等IL-17A相關(guān)自身免疫性疾病的機(jī)制和評(píng)估靶向藥物的藥效。

此外，賽業(yè)生物還提供多種與自身免疫性疾病和炎癥性疾病相關(guān)的人源化模型、自發(fā)性疾病模型或誘導(dǎo)性疾病模型。我們也可以根據(jù)研究人員的需求進(jìn)行定制或合作開發(fā)。

參考文獻(xiàn)：
[1]National Psoriasis Foundation. (n.d.). Psoriasis statistics. Retrieved December 30, 2023, from https://www.psoriasis.org/psoriasis-statistics/

[2]DUOBRII. (n.d.). Psoriasis Facts. Retrieved December 30, 2023, from https://www.duobrii.com/psoriasisfacts/

[3]Griffiths CEM, Armstrong AW, Gudjonsson JE, Barker JNWN. Psoriasis. Lancet. 2021 Apr 3;397(10281):1301-1315.

[4]Hawkes JE, Chan TC, Krueger JG. Psoriasis pathogenesis and the development of novel targeted immune therapies. J Allergy Clin Immunol. 2017 Sep;140(3):645-653.

[5]Craig S, Warren RB. Ixekizumab for the treatment of psoriasis: up-to-date. Expert Opin Biol Ther. 2020 Jun;20(6):549-557.