1.方法學(xué)的影響
ELISA 試劑盒測(cè)試模式包含以下幾種：雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM 抗體捕捉法、競(jìng)賽抑制法，其中競(jìng)賽抑制法 (HBeAb,HBcAb 等選用) 因受操作時(shí)差所引起的競(jìng)賽等要素的影響，成果重復(fù)性較差，質(zhì)量較難控制。

2.樣本要素
標(biāo)本干擾要素包含內(nèi)源性干擾要素和外源性干擾要素，前者包含類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、異嗜性抗體、自身抗體、溶菌酶等，后者包含標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存時(shí)刻過長(zhǎng)、標(biāo)本凝結(jié)不全、冷凍標(biāo)本的反復(fù)凍融等。

3.操作要素
ELISA 操作進(jìn)程雜亂，操作不妥將引起較大的差錯(cuò)。加樣、溫育、洗刷、顯色、比色。

4.試劑要素
不同批次的 ELISA 試劑在制作進(jìn)程中很難確保質(zhì)量完全一致，即使是通過批批檢的項(xiàng)目其檢測(cè)成果也存在差異，因而必須挑選和訂貨長(zhǎng)批號(hào)的試劑，并確保保存條件。嚴(yán)格執(zhí)行這一規(guī)范可以防止因試劑批號(hào)改動(dòng)而從頭樹立質(zhì)控體系及從頭評(píng)估試劑的雜亂進(jìn)程，而且可以確保成果的穩(wěn)定性；關(guān)于效期短、使用率低的試劑，應(yīng)當(dāng)小量分裝，每次使用則取分裝部分即可，防止反復(fù)凍融形成試劑的失效。

5.灰區(qū)的設(shè)置
ELISA 試劑盒通常情況下，ELISA 定性試驗(yàn)以「陽性」和「陰性」來陳述成果，兩者間有一條分界線被稱為「陽性判斷值」(cut-off value，CO 值)，這是定性免疫測(cè)定成果陳述的依據(jù)。

6.標(biāo)本復(fù)查
ELISA 手工檢測(cè)進(jìn)程雜亂，影響要素較多，即使室內(nèi)質(zhì)控在控，也或許因孔間差異而形成成果的差異，因而加大復(fù)查力度是確保成果準(zhǔn)確性的牢靠辦法，比如對(duì) HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab 等項(xiàng)目的可疑、弱陽性標(biāo)本及少見模式的檢測(cè)成果進(jìn)行復(fù)查。

7.常表示成果的常用辦法
a. 定性測(cè)定。
b. 半定量測(cè)定 成果一般以滴度表示。
c. 定量測(cè)定 即用已知量的規(guī)范品作一系列稀釋后進(jìn)行 ELISA 測(cè)定，繪制規(guī)范曲線，成果以量或單位表示。在 ELISA 定量檢測(cè)中每一塊反應(yīng)板都必須繪制相應(yīng)的規(guī)范曲線。