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將新冠病毒核酸檢測(cè)全流程時(shí)間縮短至“45分鐘”的NGPCR技術(shù)介紹

瀏覽次數(shù):1438 發(fā)布日期:2022-10-13  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

NGPCR超快速新冠核酸檢測(cè)(45分鐘)   VS    qPCR 新冠核酸檢測(cè)(大于4小時(shí))

01  樣本采集

所需耗材

樣本采集管(有滅活功能)

樣本采集管( 有滅活功能)    

采集時(shí)間

視采集情況而定    

視采集情況而定    


02 樣本混勻

所需設(shè)備

混勻器

混勻器

混勻時(shí)間

5-10秒鐘

5-10秒鐘


病毒滅活、裂解   03     病毒滅活    

  所需設(shè)備                       所需耗材

干式加熱器           

采集管中自帶滅火

                                  加熱時(shí)間            |            滅活時(shí)間

10分鐘                                        

10-30 分鐘, 根據(jù)滅活管而定    

 

準(zhǔn)備反應(yīng)體系   04      核酸提取
 

               所需耗材          |         所需設(shè)備         

48 孔、 96 孔或384 孔可封膜微孔板    

                    全自動(dòng)核酸提取儀    

所需試劑

NGPCR 一 步法RT-PCR 反應(yīng)試劑(已經(jīng)配制好,只需分液即可)    

核酸提取試劑盒    

所需時(shí)間

手動(dòng)配制反應(yīng)板(3-5分鐘/板)。可用自動(dòng)化移液工作站配制(1-3分鐘/板)  

30 分鐘    

 

反應(yīng)板封膜     05      準(zhǔn)備反應(yīng)體系

 

           所需設(shè)備     |     所需耗材

封膜儀                                         

PCR 反應(yīng) 管 或PCR 反應(yīng)板    

         所需耗材     |     所需試劑

                         封膜                                                                                 

qPCR 試劑,多種試劑混合后進(jìn)行配制(容易造成污染或錯(cuò)誤)    

所需時(shí)間

                                                  1.5 秒/板                                                                                  

手動(dòng)配制反應(yīng)板( 5-10分鐘/板)?捎米詣(dòng)化移液工作站配制( 3-5 分 鐘 /板)    


06   核酸擴(kuò)增

所需設(shè)備

            NG-PCR         

實(shí)時(shí)熒光定量PCR    

所需時(shí)間           |            反應(yīng)時(shí)間

RT 時(shí)間:7 分鐘
PCR 時(shí)間:18 分鐘
(PCR 循環(huán)次數(shù):55 個(gè)循環(huán))    

RT 時(shí)間:1 小時(shí)
PCR 時(shí)間:2.5 小時(shí)
(PCR 循環(huán)次數(shù):35個(gè)循環(huán))    


07 結(jié)果判讀

 所需設(shè)備

熒光檢測(cè)儀

-               

所需時(shí)間

幾十秒鐘即可獲得結(jié)果                                                                                      

結(jié)果判讀復(fù)雜, 需要專業(yè)技術(shù)人員進(jìn)行判讀,96個(gè)樣本判讀時(shí)間大于10 分鐘   


08 總結(jié)

一步法 RT-PCR 反應(yīng),操作簡(jiǎn)單 。試劑和儀器成本低,經(jīng)濟(jì)實(shí)惠 。無需判讀 Ct 值,直接呈現(xiàn)陰陽(yáng)性結(jié)果。整個(gè)核酸檢測(cè)流程不超過 45 分鐘。    

兩步法, 需要提取核酸后再進(jìn)行 RT-PCR 反應(yīng)。操作復(fù)雜, 需要配制試劑。容易出現(xiàn)操作失誤。試劑和儀器成本高。需要判讀 Ct 值, 結(jié)果復(fù)雜。整個(gè)核酸檢測(cè)流程大于 4 小時(shí)。    


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