咱們從細(xì)胞培養(yǎng)支原體污染的來(lái)源說(shuō)起
連續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞污染的概率大約15~35%,生物制藥中支原體污染的比例較低,近十年污染百分比在個(gè)位數(shù)[1]。細(xì)胞培養(yǎng)中搗亂的支原體通常是那一小撮,約20多種。其中包括口腔支原體(M.orale)、肺炎支原體(M. pneumoniae)、發(fā)酵支原體(M. fermentans)、精氨酸支原體(M. arginini)、萊氏無(wú)膽甾原體(A. laidlawii)和豬鼻支原體(M. hyorhinis),占污染比例的95%[2],分別為人源、牛源和豬源支原體。
支原體是怎樣被引入到細(xì)胞培養(yǎng)中的呢
大家回憶一下細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程看看……
人員操作、被污染的細(xì)胞、原輔料(血清、胰酶、培養(yǎng)基),實(shí)驗(yàn)環(huán)境污染(生物安全柜、細(xì)胞間,培養(yǎng)箱)、實(shí)驗(yàn)儀器(水浴鍋、液氮罐)、實(shí)驗(yàn)耗材(培養(yǎng)皿、方瓶、細(xì)胞工廠(chǎng))都可能是污染源,但是人源的污染概率最大,數(shù)據(jù)表明80.6%的實(shí)驗(yàn)人員為支原體攜帶者。
要想細(xì)胞養(yǎng)得好,除了充分的營(yíng)養(yǎng),以下10件事情不要忘[3]!
為了養(yǎng)好細(xì)胞,操碎了心,不要因?yàn)橹гw污染,傷透了心。
從來(lái)源切斷污染,操作過(guò)程注意注意再注意,培養(yǎng)中進(jìn)行定期檢測(cè),從此污染是路人!
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相關(guān)文獻(xiàn):
[1] 趙翔, 馮建平, 孟淑芳.,2018. 支原體檢查的核酸檢測(cè)方法及方法學(xué)驗(yàn)證的思考. 中國(guó)藥事, 32 (7):1020-1027.
[2] Drexler HG and Uphoff CC., 2002. Mycoplasma contamination of cell cultures: Incidence, sources, effects, detection, elimination, prevention Cytotechnol 39: 23-38.
[3] Top 10 tips for Mycoplasma free cell culture.www.lonza.com/mycoplasma