空白對(duì)照 (Blank control) 是指不給予任何處理的對(duì)照。在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，常用以評(píng)價(jià)及觀察細(xì)胞是否處于正常狀態(tài)。

如在 The role of ferroptosis in ionizing radiation-induced cell death and tumor suppression 一文中，觀察到 H460、A549 和 H1299 細(xì)胞系在沒(méi)有任何處理的情況下，脂質(zhì)過(guò)氧化水平?jīng)]有任何變化，而暴露于 6 Gy IR 24 小時(shí)后，脂質(zhì)過(guò)氧化相對(duì)水平升高。

圖 1. 電離輻射誘導(dǎo)癌細(xì)胞中的鐵死亡^[1]

陽(yáng)性對(duì)照 (Positive control) 是指按照當(dāng)前實(shí)驗(yàn)方案一定能得到陽(yáng)性結(jié)果的對(duì)照實(shí)驗(yàn)。因此，陽(yáng)性對(duì)照具有質(zhì)控的意義。另一方面，陽(yáng)性對(duì)照還可以證明試驗(yàn)藥和對(duì)照藥之間的差別：優(yōu)效性或等效性。

例如，為了研究 H. richardsonii 提取物 PP-360A 對(duì)癌細(xì)胞的有絲分裂的影響，研究者選用諾考達(dá)唑，紫杉醇作為陽(yáng)性對(duì)照，這兩種藥物可以誘導(dǎo)有絲分裂停滯。陽(yáng)性對(duì)照組表明：PP-360A 可以有效地誘導(dǎo)由有絲分裂停滯引起的細(xì)胞形態(tài)改變。如圖 2A 所示，三種細(xì)胞系 (HT-29、M059K、WI-38) 用 PP-360A 處理后的細(xì)胞形態(tài)變圓，與諾考達(dá)唑處理組類似。免疫熒光染色結(jié)果 (圖 2B) 顯示細(xì)胞用 PP-360A 處理后，磷酸組蛋白 H3 (PH3) 和微管蛋白陽(yáng)性細(xì)胞比率升高。

溶劑對(duì)照 (Vehicle control) 是最常見(jiàn)的陰性對(duì)照，一些化合物水溶性不好的化合物，需要用有機(jī)溶劑 DMSO、乙醇等配制儲(chǔ)備液。如果溶劑在最終給藥體系中占比較高，可能會(huì)對(duì)細(xì)胞本身狀態(tài)有較大影響，這時(shí)，就會(huì)出現(xiàn)這樣一個(gè)疑問(wèn)：是藥物的作用還是溶劑的毒性導(dǎo)致呢？

圖 3. Haperforin G 對(duì)黑色素瘤細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期的影響^[4]

圖 4. 細(xì)胞用 NC siRNA 或 CYP27A1 siRNA 轉(zhuǎn)染處理 24 小時(shí)^[4]

圖 5. MITF 與黑素瘤細(xì)胞系中內(nèi)源性 CYP27A1 啟動(dòng)子區(qū)域的結(jié)合^[5]

小對(duì)照，大學(xué)問(wèn)。一個(gè)科學(xué)系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中必然少不了對(duì)照的身影。對(duì)照不僅能幫我們佐證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性，也能在實(shí)驗(yàn)失敗時(shí)幫助我們排查導(dǎo)致失敗的原因。怎么樣，現(xiàn)在你學(xué)廢了嗎？

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參考文獻(xiàn)

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3. Baek M, Dimaio F, Anishchenko I, et al. Accurate prediction of protein structures and interactions using a three-track neural network [J]. Science.

4. Hyelim Cho, Qiong Shen, Lydia H Zhang, Mikiko Okumura, Akinori Kawakami, et al. CYP27A1-dependent anti-melanoma activity of limonoid natural products targets mitochondrial metabolism. Cell Chem Biol. 2021 Mar 30;S2451-9456(21)00143-4.

5. JIrwin J J, Tang K G, Young J, et al. ZINC20-A Free Ultralarge-Scale Chemical Database for Ligand Discovery [J]. Journal of Chemical Information and Modeling, 2020, 60, 12, 6065–6073.