實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠還原型谷胱甘肽(GSH)水平。用純化的小鼠還原型谷胱甘肽(GSH)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入還原型谷胱甘肽(GSH)，再與HRP標(biāo)記的還原型谷胱甘肽(GSH)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的還原型谷胱甘肽(GSH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠還原型谷胱甘肽(GSH)濃度。 

【規(guī)格參數(shù)】

指標(biāo)名稱：小鼠還原型谷胱甘肽(GSH)elisa試劑盒      

規(guī)格：48T 96T

品牌：臻科生物

檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm

所需樣本體積：保險(xiǎn)量50ul

適用范圍：僅供科研課題研究，不得用于臨床診斷。

檢測(cè)樣本種類：血清，血漿，尿液，組織勻漿，細(xì)胞上清液，腦脊液，灌洗液，糞便等樣本.

臻科供應(yīng)屬種有：人、大鼠、小鼠、豚鼠、人子、豬犬、牛羊、雞鴨、植物、魚、昆蟲ELISA試劑盒等

獨(dú)特優(yōu)勢(shì)】

1、優(yōu)勢(shì)明顯  我司產(chǎn)品具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等特點(diǎn)，品種齊全，操作簡(jiǎn)便，最大限度的節(jié)省了實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。

2、品質(zhì)保障  產(chǎn)品保證質(zhì)量，出庫(kù)質(zhì)檢把控嚴(yán)格，保障提供給客戶的100%是優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品，運(yùn)輸全程跟蹤，公司承諾有任何質(zhì)量問題包退換，誠(chéng)信經(jīng)營(yíng)，合作共贏。我們提供實(shí)驗(yàn)室試劑、耗材一站式供應(yīng)服務(wù)，超低價(jià)，高品質(zhì)，進(jìn)口品牌全線代理，優(yōu)勢(shì)的渠道，我們只做行貨，不用擔(dān)心質(zhì)量問題。

3、專業(yè)定制  公司推出專業(yè)定制試劑盒服務(wù)，全程有專業(yè)的技術(shù)老師對(duì)接客戶，直到定制成功為止。

4、免費(fèi)代測(cè) 公司承諾訂購(gòu)ELISA試劑盒，享全程技術(shù)指導(dǎo)和免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，全程有專業(yè)技術(shù)老師【樣本處理及要求】

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20 分鐘，離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20 分鐘后，離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。

3. 尿液：用無菌管收集，離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100 萬/ml 左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆�。�?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測(cè)含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

【操作步驟】

1.標(biāo)準(zhǔn)品的加樣：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL

2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑100μl，空白孔除外。

4.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。

5.配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。

6.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

7.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

8.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

9.測(cè)定：以空白孔調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。