幸福的人都是一樣的，不幸福的人各有各的不同，隔壁師兄做出來的定量PCR曲線不僅完美，重復性也好，而我的實驗卻一言難盡，該出峰的曲線不理想，不該出峰的卻都是峰，我能怎么辦，我也很絕望啊，核酸氣溶膠的污染悄無聲息，防不勝防，假陽性的結(jié)果讓做PCR的我崩潰抓狂……

是否有好的方法來進行應對呢？我苦思冥想……

那我們先來了解一下什么是氣溶膠？

氣溶膠是由固體或液體小質(zhì)點分散并懸浮在氣體介質(zhì)中形成的膠體分散體系，在氣體與液體面摩擦時，操作時比較劇烈地搖動反應管，離心機離心，擴增后PCR產(chǎn)物開蓋時、吸樣時及移液器槍反復吹吸樣品時都可形成氣溶膠而污染。

綜上所述，為了得到好的實驗結(jié)果，PCR反應需要進行嚴格的實驗分區(qū)：

☑   常規(guī)需要設(shè)置3個獨立的分區(qū)：試劑耗材儲存與準備區(qū)、樣品處理和樣品制備區(qū)，擴增檢測區(qū)，各區(qū)域空間完全獨立；實驗室實施空氣流向控制，擴增前和擴增后區(qū)域應具有獨立的通風系統(tǒng)，擴增后區(qū)域保持負壓狀態(tài)，其他區(qū)域保持常壓，防止擴增產(chǎn)物進入擴增前的區(qū)域。

理想情況下需要四個獨立分區(qū)：嚴格按照單一流向進行實驗，即試劑準備區(qū)（1區(qū)）—樣本制備區(qū)（2區(qū)）—擴增分析區(qū)（3區(qū)），嚴禁逆流，實驗室內(nèi)溫度為15°C-30°C為合格范圍等。

☑   除此之外，還要物品專用：各區(qū)域只用于特定操作，不得從事其他工作，例如試劑，工作服，儀器，手套，標記筆等等均為該區(qū)專用，不得交叉使用。

☑     使用完的槍頭，廢液等，需要在專區(qū)進行處理。

小編今天就總結(jié)到這了，還要繼續(xù)我的PCR實驗去了！