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細(xì)胞培養(yǎng)中抗生素的作用

瀏覽次數(shù):7731 發(fā)布日期:2019-10-25  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

掰一掰細(xì)胞“保護(hù)大神“抗生素

 

細(xì)胞培養(yǎng)起來感覺會很簡單,但是有時候也會出現(xiàn)各種不順的問題 ,例如:污染,生長緩慢,變形,死亡率過高…..,畢竟細(xì)胞是體外培養(yǎng)的,在培養(yǎng)的時候會受到各種外界因素的影響,培養(yǎng)基、血清、孵育溫度、C02濃度等,除此之外還有抗生素……


一般來說細(xì)胞培養(yǎng)是不需要加抗生素,因?yàn)榧?xì)胞培養(yǎng)必須要無菌操作。如果實(shí)驗(yàn)室污染嚴(yán)重,建議徹底打掃一下,擦拭消毒、熏蒸或者紫外照射殺菌。然后把細(xì)胞實(shí)驗(yàn)涉及到的試劑都做下空培,包括使用的胰酶,胎牛血清等。如果實(shí)驗(yàn)室無菌條件優(yōu)異,細(xì)胞培養(yǎng)可以不加抗生素,因?yàn)榭股氐乃幮胶投拘运椒浅=咏。特別是用于細(xì)胞治療的培養(yǎng)。


若當(dāng)心細(xì)胞感染,可以適當(dāng)添加一些抗生素預(yù)防,如果已經(jīng)有污染,建議按照以下方案添加:


1、最常用的是青霉素、鏈霉素聯(lián)合抑制細(xì)菌,即所謂的“雙抗”,主要針對革蘭氏陽性菌、陰性菌;對于細(xì)菌的感染也可用慶大或卡那霉素;


2、如果真菌污染嚴(yán)重,可用兩性霉素/制霉菌素控制;


3、若為支原體污染, 可以用sciencell的支原體抑制劑,(sciencell 貨號:0563)包裝簡潔,10ug/支 ,使用方便。在培養(yǎng)基中加入新鮮的支原體抑制劑溶液,每3-4天更換一次。一兩周內(nèi)的足以消除污染?梢杂行У目梢圆闅⒏鞣N原因感染的支原體。


抗生素多加對細(xì)胞無益。加抗生素的主要問題是操作不慎造成的污染未必能及時發(fā)現(xiàn),造成后期較大的損失。

 

青鏈霉素是廣譜抑菌劑,對革蘭氏陰性和陽性細(xì)菌有抗菌性,青霉素影響細(xì)菌細(xì)胞壁合成的終末步驟,在轉(zhuǎn)肽反應(yīng)步驟一直多肽鏈的延伸;鏈霉素與核糖體的30S亞基單位結(jié)合,阻斷細(xì)菌蛋白質(zhì)的組成。比較常用 。一般用于哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)。

 

一旦細(xì)胞污染,最佳處理辦法扔掉,查找原因,全面預(yù)防。如果細(xì)胞是經(jīng)過大量工作或高價才得到的,扔掉實(shí)在可惜,可以針對污染源加抗生素。也可以不加抗生素進(jìn)行單克隆有限稀釋至96孔板,再克隆化。

 

但是污染帶來的實(shí)驗(yàn)影響和損失不可估量,最主要的是平常都要做好細(xì)胞房的管理和消毒工作。防止污染的發(fā)生。

 

上海中喬新舟生物科技有限公司

1、原代細(xì)胞:ScienCell(中國區(qū)正規(guī)一級代理)人源和動物源各種原代細(xì)胞。

2、培養(yǎng)基:原代細(xì)胞專用低血清、無血清、無異源蛋白無動物成分培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞培養(yǎng)試劑:胎牛血清、原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測試劑盒、細(xì)胞生長因ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細(xì)胞裂解物等。

4、細(xì)胞系(株):種類豐富(1000余種),已通過STR鑒定;提供細(xì)胞株完全培養(yǎng)基。

5、自研產(chǎn)品:支原體檢測/清除試劑盒、端粒酶檢測試劑盒、人源/動物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品

6、技術(shù)服務(wù):綠/紅色熒光蛋白標(biāo)記、熒光素酶標(biāo)記、慢病毒介導(dǎo)基因沉默或過表達(dá)及穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建,細(xì)菌基因敲除、細(xì)胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學(xué)實(shí)驗(yàn)。

來源:上海中喬新舟生物科技有限公司
聯(lián)系電話:021-56760351
E-mail:hufangqiong@zqxzbio.com

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