综合图区亚洲网友自拍|亚洲黄色网络|成人无码网WWW在线观看,日本高清视频色视频kk266,激情综合五月天,欧美一区日韩一区中文字幕页

English | 中文版 | 手機(jī)版 企業(yè)登錄 | 個(gè)人登錄 | 郵件訂閱
當(dāng)前位置 > 首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 淺談ELISA夾心法中抗體質(zhì)量的重要性

淺談ELISA夾心法中抗體質(zhì)量的重要性

瀏覽次數(shù):2695 發(fā)布日期:2017-10-30  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

理論上使用公認(rèn)選擇的親和純化抗體可得到高特異性,高敏感度的免疫測(cè)定。然而,由于經(jīng)濟(jì)原因或是缺乏合適的試劑,使得許多工作者采用低純度的制品,這種試劑通常含有與試驗(yàn)中其它成分起交叉反應(yīng)的抗體。現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)在用抗人IgG抗血清的抗體時(shí),抗體中含有不需要的抗體交叉反應(yīng)。但當(dāng)使用親和純的抗血清時(shí),交叉反應(yīng)不明顯。研究任何ELISA系統(tǒng),為了控制不需要的交叉反應(yīng),就要不惜使用親和純?cè)噭。使用抗IgG血清抗體作為包被抗體,有時(shí)本底確實(shí)很低,但它的敏感度比僅使用親和純制品要低50-100倍。在高敏感度的實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用封閉試劑是很重要的。最終選擇非親和純抗IgG血清抗體是基于這樣設(shè)想:包被抗體或是結(jié)合的人IgG(抗原)與指示抗體有交叉反應(yīng),則過量的與指示抗體同種動(dòng)物的血清,就可以封閉與酶標(biāo)抗體的不要的結(jié)合。然而人血清白蛋白中含有少量的IgA和IgG會(huì)干擾檢測(cè)。人血清白蛋白只適用于IgE的測(cè)定。同樣,不能用牛血清白蛋白。因?yàn)槠渲泻形⒘康呐gG。

 

抗血清抗體與親和純抗體對(duì)ELISA夾心法結(jié)果的影響可從下面實(shí)驗(yàn)看出。

實(shí)驗(yàn)a:包被抗體為粗制的綿羊抗人IgG抗體,指示抗體(檢抗)為粗制山羊抗人IgG抗體

實(shí)驗(yàn)b:包被抗體為親和純的綿羊抗人IgG抗體,指示抗體(檢抗)為粗制山羊抗人IgG抗體

實(shí)驗(yàn)c:包被抗體為粗制的綿羊抗人IgG抗體,指示抗體為親和純的山羊抗人IgG抗體

實(shí)驗(yàn)d:包被抗體和指示抗體都是親和純的兔抗人IgG抗體。

實(shí)驗(yàn)中使用5%血清(與指示抗體同物種來(lái)源)進(jìn)行封閉,其他夾心法ELISA步驟相同。

elisa-antibody-quality

結(jié)果顯示,當(dāng)粗制的抗IgG血清抗體被用在夾心法的兩端(如實(shí)驗(yàn)a曲線)時(shí),本底很高且曲線坡度不明顯。雖然能成功應(yīng)用此抗體類型,但問題是一種抗體結(jié)合另一種抗體?赡馨l(fā)生了山羊指示抗體結(jié)合了綿羊包被抗體,因?yàn)橄♂屢褐械纳窖蜓暹^剩也不能降低本底值。當(dāng)應(yīng)用親和純化的包被抗體時(shí)(如實(shí)驗(yàn)b曲線),本底適當(dāng)降低而且形成了標(biāo)準(zhǔn)曲線。然而,大多數(shù)工作者認(rèn)為本底仍偏高,工作范圍有限(2-60ng/ml)。當(dāng)親和純的指示抗體與粗制包被抗體聯(lián)合使用時(shí)(如實(shí)驗(yàn)c曲線),本底大大較低,但敏感度約為100-200ng/ml,再者工作范圍仍受限。當(dāng)完全使用親和純的抗體時(shí)(如實(shí)驗(yàn)d曲線),本底低,敏感度大大改善且工作范圍廣(2-500ng/ml)。

 

推薦更多精彩文章:

金黃色葡萄球菌CRISPR/Cas9單克隆抗體,多種實(shí)驗(yàn)應(yīng)用! http://www.amyjet.com/featured/anti-crispr-cas9.shtml
推薦C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒,高性能讓檢測(cè)更高效! http://www.amyjet.com/featured/crp-elisa-kit.shtml
《Nature》認(rèn)可的HDAC11選擇性抑制劑,HDAC11分析更有效! http://www.amyjet.com/featured/hdac11-Elevenostat.shtml
超敏StrandBrite™RNA定量試劑盒,定量RNA更便捷! http://www.amyjet.com/featured/strandbrite-rna-kit.shtml
 

來(lái)源:艾美捷科技有限公司
聯(lián)系電話:400-6800-868 027-59626688
E-mail:sales@amyjet.com

標(biāo)簽: ELISA 抗體 ELISA夾心法
用戶名: 密碼: 匿名 快速注冊(cè) 忘記密碼
評(píng)論只代表網(wǎng)友觀點(diǎn),不代表本站觀點(diǎn)。 請(qǐng)輸入驗(yàn)證碼: 8795
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網(wǎng) 電話:021-64166852;13621656896 E-mail:info@bio-equip.com