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BIOG細(xì)胞DNA抽提試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

瀏覽次數(shù):4543 發(fā)布日期:2016-3-14  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

運(yùn)輸條件:常溫運(yùn)輸

    號(hào):51011: 50次反應(yīng)

          51012: 100次反應(yīng) 

產(chǎn)品特點(diǎn) 

◎操作簡(jiǎn)便快速,可在20分鐘內(nèi)完成提取過(guò)程;

◎提取DNA純度高,無(wú)抑制劑,A260/A280為1.7-1.9;

◎產(chǎn)率高,同樣的樣本量提取的DNA更多;

◎標(biāo)本范圍寬,適合于各種培養(yǎng)細(xì)胞、針刺吸取物、尿沉渣細(xì)胞等細(xì)胞離散標(biāo)本

試劑盒組成   

組分

50

100

吸附柱和收集管

各50個(gè)

各100個(gè)

裂解液

12 mL

24mL

析出液

4.5 mL

9 mL

洗滌液

9 mL

18 mL

洗脫液

12mL

24 mL

消化液A

1.2 mL

2.4 mL

消化液B

1.2 mL

2.4 mL

說(shuō)明書(shū)

1份

1份

產(chǎn)品介紹 

BIOG DNA CeLL Kit是專門(mén)用于從各種細(xì)胞樣本中提取基因組DNA的試劑盒。提取的樣本范圍包括各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、針刺吸取物、尿沉渣細(xì)胞等細(xì)胞離散標(biāo)本。BIOG DNA CeLL Kit采用復(fù)合消化液消化細(xì)胞中的蛋白質(zhì),使細(xì)胞DNA更容易釋放出來(lái),因而本試劑盒DNA提取產(chǎn)率較高。BIOG DNA CeLL Kit采用了最新的離子膜技術(shù)并反復(fù)優(yōu)化了裂解液和洗脫液配方,提取得到的DNA純度更高,最大限度地去除了蛋白、色素、脂類等雜質(zhì)污染,可以直接應(yīng)用于PCR、熒光定量PCR和各種酶切試驗(yàn)等。

操作步驟:

1.請(qǐng)自行準(zhǔn)備:無(wú)水乙醇、PBS及1.5mL離心管。

2.取出析出液和洗滌液,按以下操作:

a) 析出液:4.5mL加入25.5mL無(wú)水乙醇;9mL加入51mL無(wú)水乙醇。

b) 洗滌液:9mL加入21mL無(wú)水乙醇;18mL加入42mL無(wú)水乙醇。

c) 配制好的析出液如出現(xiàn)沉淀,可在37℃溶解,搖勻后使用。

3.細(xì)胞處理:

a) 培養(yǎng)板培養(yǎng)的單層貼壁細(xì)胞,棄培養(yǎng)基,PBS清洗一遍,棄PBS;

b) 培養(yǎng)瓶培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞應(yīng)先用胰酶消化,處理為細(xì)胞懸液, 1,000 rpm 離心 5分鐘,徹底棄去上清,加入100μL PBS振蕩至細(xì)胞懸。

c) 培養(yǎng)的細(xì)胞為懸浮細(xì)胞,1,000 rpm 離心 5分鐘,徹底棄去上清,加入100μL PBS振蕩至細(xì)胞懸浮。

4.加入200μL裂解液,20μL消化液A,振蕩混勻,室溫放置5分鐘。

5.加入20 μL 消化液B,充分振蕩混勻,56℃水浴10 分鐘至細(xì)胞完全裂解。

6.加入500μL析出液,輕輕顛倒混勻,如有半透明懸浮物,不影響DNA的提取與后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

7.將吸附柱放入收集管內(nèi),將上述溶液轉(zhuǎn)入吸附柱內(nèi),靜置2 分鐘,12,000 rpm 4℃離心1 分鐘,棄收集管內(nèi)廢液。

8.將吸附柱放回收集管內(nèi),加500μL 洗滌液至吸附柱內(nèi),12,000 rpm 4℃離心1 分鐘,棄收集管內(nèi)廢液。

9.將吸附柱放回收集管內(nèi),12,000 rpm 4℃離心2 分鐘,離去殘留的洗滌液。

10.取出吸附柱,放入新的1.5 mL 離心管內(nèi),加入50-200 μL 洗脫液,靜置3分鐘,12,000 rpm  4℃ 離心2分鐘,收集DNA溶液。提取的DNA即可用于下一步實(shí)驗(yàn)或-20℃保存。

注意事項(xiàng):

1.析出液、洗滌液含有刺激性化學(xué)物質(zhì),操作過(guò)程請(qǐng)做好防護(hù)措施,避免直接接觸皮膚,防止吸入口鼻。如不慎沾染皮膚或眼睛,請(qǐng)立即用清水或生理鹽水沖洗,必要時(shí)請(qǐng)就醫(yī)。

2.細(xì)胞量建議不高于107。

3.裂解液如有白色絮狀物析出屬正,F(xiàn)象,置于37℃水浴中溶解即可。

 

儲(chǔ)存、運(yùn)輸和有效期

本試劑盒可常溫運(yùn)輸,室溫(15-25℃)保存,有效期為12個(gè)月,消化液請(qǐng)于-20℃存放,避免反復(fù)凍融。

質(zhì)量控制

本產(chǎn)品經(jīng)嚴(yán)格的質(zhì)量檢驗(yàn)證明,無(wú)生物污染

注意 本產(chǎn)品僅用于科

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標(biāo)簽: 細(xì)胞DNA提取
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