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保護柱的選擇及使用步驟

瀏覽次數:3606 發(fā)布日期:2014-6-27  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
保護柱的選擇
保護柱的選擇與更換應注意些什么事項
一、保護柱的選擇

選擇保護柱的原則是:在滿足分析分離要求的前提下,盡可能的選擇較短的保護柱結構,對分離樣品有比較小的保留性的色譜填料。

在選擇保護柱之前首先要考慮的是樣品是否清潔。對于大部分分析工作來說,一支1cm長的保護柱便能提供充分的保護作用。但是,如果樣品非常不清潔,或工作中要經常更換保護柱,那么就應該選擇2cm或3cm長的保護柱。但是,隨著保護柱的加長,保留時間也會變長。

保護柱的內徑應與分析柱的內徑相同或相當。保護柱的填料裝填方式也很重要。目前有薄膜裝填法的保護柱,使用過程很簡單方便,而且可以在實驗室中進行干裝。但是,其最大的缺點是不經濟,特別是針對中國的具體情況,一次性使用相對費用較高。另外,薄膜裝填法的保護柱所裝填的色譜填料有限,只能提供有限的保護作用;不過也因為所裝填的色譜料較少,保護柱的長度也較短,所以對分析樣品的保留時間的影響也很小。另一種保護柱結構其實質是縮短了色譜分析拄,設計方式上有直連式、手緊式或整體式。整體式設計是由色譜的生產廠商直接安裝在色譜分析柱上的,必須與色譜分析柱一同訂貨,可以非常方便地使用,但不能夠被修改。直連式結構設計可在任何時候有色譜工作者來安裝連接,可以與任何品牌的色譜分析柱連接使用,而且還可以根據樣品的相關情況選擇不同的保護柱長度。手上緊即可。另外從保護柱結構又分為是否可以更換保護柱柱芯。可以降低保護柱的使用成本。

一般來說,保護柱填料的選擇是由分析柱的填料決定的,正常情況下可以選擇與分析柱一樣的色譜填料,但是,根據實際工作的需要,也可以不必與分析柱的填料完全匹配。

二、什么時候應該更換保護柱

  當滿足下列條件之一時就應該更換保護柱。
  a、色譜柱的理論塔片數下降15%以上;
  b、色譜柱柱前壓上升15%以上;
  c、最難分離的物質對分辨率下降15%以上;
  d、樣品進樣次數超過150次;
  e、流動相通過1500倍的色譜柱體積。

三、保護柱/保護柱芯更換步驟
1.將色譜柱與保護柱斷開,將保護柱(或柱芯換下)
2.將保護柱換上(或將保護柱芯所有膠帶除去,將柱芯換上,將保護柱接上)
3.將換好的保護柱用甲醇沖洗30分鐘
4.將色譜柱接上

四、在線過濾器
預柱 保護柱的原理區(qū)別
在線過濾器在泵和進樣閥之間,只有篩板,只是物理過濾,
保護柱在進樣閥和色譜柱之間,有填料,可吸附物質
預柱是個混淆的概念,pre-column,一般可直譯為預混合柱,放在泵和進樣閥之間,有硅膠填料,可以降低色譜柱填料被酸、堿流動相溶解
同時也有把預柱當保護柱的

五、清洗
保護柱在清洗時首先要拆下分析柱,以免洗脫物進入分析柱;然后選擇適當的流動相進行沖洗。
 
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