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我公司擁有豐富的蛋白質(zhì)表達(dá)及純化經(jīng)驗，以客戶提供的表達(dá)克隆開始，進(jìn)行條件的優(yōu)化， 為客戶提供所需蛋白質(zhì)。
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| 服務(wù)商： 北京博奧森生物技術(shù)有限公司 | 查看該公司所有服務(wù) >> |
蛋白質(zhì)表達(dá)與純化
我公司擁有豐富的蛋白質(zhì)表達(dá)及純化經(jīng)驗，以客戶提供的表達(dá)克隆開始，進(jìn)行條件的優(yōu)化，為客戶提供所需蛋白質(zhì)。
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服務(wù)編號 |
服務(wù)內(nèi)容 |
制備時間 |
技術(shù)參數(shù) |
價 格 | |
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bs-P01 |
純化5mg蛋白質(zhì)(客戶提供表達(dá)質(zhì)�；蚓�) |
4周工作日 |
蛋白純度（電泳純≧85%） |
4000元/5mg | |
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bs-P02 |
純化10mg的蛋白質(zhì)(客戶提供表達(dá)質(zhì)�；蚓�) |
4周工作日 |
蛋白純度（電泳純≧85%） |
6000元/10mg | |
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技術(shù)報告 |
提供詳細(xì)的純化蛋白報告及實驗過程、步驟、檢測報告（委托制備，簽訂正式合同文本） | ||||
客戶需要提供的信息及材料：
1.待表達(dá)基因的序列
2.表達(dá)載體的序列（質(zhì)譜圖）
3.表達(dá)克隆質(zhì)粒和菌株
注：目前只承接提供帶GST標(biāo)簽、His標(biāo)簽的融合蛋白表達(dá)及純化，其它標(biāo)簽蛋白需協(xié)商。
分子生物學(xué)技術(shù)服務(wù)
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序 號 |
服務(wù)名稱 |
價 格 |
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一 |
DNA抽提及純化 |
面議 |
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二 |
RNA抽提及純化 |
面議 |
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三 |
mRNA分離及純化 |
面議 |
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四 |
PCR及產(chǎn)物純化 |
面議 |
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五 |
質(zhì)粒抽提 |
面議 |
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六 |
RT-PCR |
面議 |
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七 |
載體構(gòu)建 |
面議 |
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八 |
RNA干擾 |
面議 |
服務(wù)詳細(xì)介紹
一、DNA抽提及純化
根據(jù)客戶要求，利用指定試劑盒，對動物（組織、細(xì)胞、血液等）、植物（各種組織）、微生物、病毒等進(jìn)行DNA抽提及純化。
提供結(jié)果：DNA、電泳圖、OD值及定量結(jié)果（濃度及體積）。
二、RNA抽提及純化
根據(jù)客戶要求，利用指定試劑盒或自產(chǎn)試劑盒（主要針對特殊組織，如含次生代謝產(chǎn)物豐富的植物組織等），對動物（組織、細(xì)胞、血液等）、植物（各種組織）、微生物、病毒等進(jìn)行RNA抽提及純化。
提供結(jié)果：RNA、電泳圖、OD值及定量結(jié)果（濃度及體積）。
三、mRNA分離及純化
根據(jù)客戶要求，利用Qiagen公司分離純化試劑盒或國產(chǎn)分離純化試劑盒，對總RNA進(jìn)行mRNA的分離及純化，以獲得高質(zhì)量的mRNA用于后續(xù)的建庫等工作。
提供結(jié)果：mRNA、電泳圖及定量結(jié)果（濃度及體積）。
四、PCR及純化
根據(jù)客戶要求，利用客戶提供的樣品及引物，進(jìn)行批量PCR并進(jìn)行產(chǎn)物純化，包括前期的轉(zhuǎn)化、鋪板、挑菌、搖菌等工作，可提供全程服務(wù)。純化建議采用millipore公司純化板。
提供結(jié)果：PCR產(chǎn)物、電泳圖及定量結(jié)果（濃度及體積）。
五、質(zhì)粒抽提
根據(jù)客戶要求，利用進(jìn)口或國產(chǎn)試劑盒，對客戶提供樣品進(jìn)行質(zhì)粒小抽或大抽。為客戶提供內(nèi)毒素含量達(dá)到科研級和醫(yī)藥級的質(zhì)粒DNA。
提供結(jié)果：質(zhì)粒、實驗報告（包括質(zhì)粒電泳照片、鑒定結(jié)果及OD值測定結(jié)果）、1.7≤OD260/OD280≤2.0的質(zhì)粒。
六、RT-PCR檢測
RT-PCR是以RNA為起始材料經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)產(chǎn)生cDNA，再以cDNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增以獲取目的基因，用于檢測細(xì)胞或組織中基因表達(dá)變化。
實驗流程：包括RNA制備、RT反應(yīng)、PCR反應(yīng)等。
引物要求：最好由服務(wù)方設(shè)計并合成。如果客戶提供，需提供引物序列；引物若為干粉，請?zhí)峁┮锏臏?zhǔn)確量；若為稀釋液，請?zhí)峁┮锏淖罱K濃度（每個反應(yīng)所需的引物滿足以下要求：濃度≥10pm/μl，體積≥10μl）。
結(jié)果報告內(nèi)容：電泳圖譜及相關(guān)說明；實驗流程。
七、載體構(gòu)建
載體構(gòu)建是將目的基因與載體連接并轉(zhuǎn)化得到重組質(zhì)粒的過程，客戶需提供來源可靠的組織，細(xì)胞或血液以便用于目的基因的擴(kuò)增。
1、原核表達(dá)載體的構(gòu)建、誘導(dǎo)表達(dá)和蛋白純化
實驗過程：RNA抽提、RT-PCR、連接、轉(zhuǎn)化、挑選陽性克隆、測序、誘導(dǎo)表達(dá)、蛋白純化
提供結(jié)果：
（1）、提供測序報告*1份
（2）、PCR擴(kuò)增電泳圖片*1份
（3）、重組質(zhì)粒菌種或者質(zhì)粒（30ul）*1份
（4）、純化后蛋白
（5）、實驗報告*1份
2、真核表達(dá)載體的構(gòu)建
實驗過程：RNA抽提、RT-PCR、連接、轉(zhuǎn)化、挑選陽性克隆、測序
提供結(jié)果：
（1）、提供測序報告*1份
（2）、PCR擴(kuò)增電泳圖片*1份
（3）、重組質(zhì)粒菌種或者質(zhì)粒（30ul）*1份
（4）、實驗報告*1份
3、腺病毒載體構(gòu)建及病毒包裝服務(wù)
* 目的基因克隆載體的構(gòu)建
實驗過程：RNA抽提、RT-PCR、連接、轉(zhuǎn)化、挑選陽性克隆、測序
提供結(jié)果：
（1）、提供測序報告*1份
（2）、PCR擴(kuò)增電泳圖片*1份
（3）、重組質(zhì)粒菌種或者質(zhì)粒（30ul）*1份
（4）、實驗報告*1份
* 目的基因表達(dá)載體構(gòu)建
實驗過程：酶切，連接，轉(zhuǎn)化，挑選陽性克隆，PCR鑒定，酶切鑒定
提供結(jié)果：
（1）、PCR鑒定圖片*1份
（2）、酶切鑒定圖片*1份
（3）、實驗報告*1份
* 包裝腺病毒
實驗過程：酶切，共轉(zhuǎn)染細(xì)胞，細(xì)胞培養(yǎng)，鑒定，純化，測定濃度
提供結(jié)果：
（1）、實驗報告*1份
（2）、轉(zhuǎn)染后圖片*1份
（3）、包裝好的病毒*1份（滴度>5*107）
4、慢病毒載體構(gòu)建及病毒包裝服務(wù)
* 目的基因克隆載體的構(gòu)建
實驗過程：RNA抽提、RT-PCR、連接、轉(zhuǎn)化、挑選陽性克隆、測序
提供結(jié)果：
（1）、提供測序報告*1份
（2）、PCR擴(kuò)增電泳圖片*1份
（3）、重組質(zhì)粒菌種或者質(zhì)粒（30ul）*1份
（4）、實驗報告*1份
* 目的基因表達(dá)載體構(gòu)建
實驗過程：酶切，連接，轉(zhuǎn)化，挑選陽性克隆，PCR鑒定，酶切鑒定
提供結(jié)果：
（1）、PCR鑒定圖片*1份
（2）、酶切鑒定圖片*1份
（3）、實驗報告*1份
* 包裝慢病毒
實驗過程：酶切，共轉(zhuǎn)染細(xì)胞，細(xì)胞培養(yǎng)，鑒定，純化，測定濃度
提供結(jié)果：
（1）、實驗報告*1份
（2）、轉(zhuǎn)染后圖片*1份
（3）、包裝好的病毒*1份（檢測滴度）
八、RNA干擾服務(wù)
近年來研究表明，將與mRNA對應(yīng)的正義RNA和反義RNA組成的雙鏈RNA（dsRNA）導(dǎo)入細(xì)胞，可以使mRNA發(fā)生特異性降解，導(dǎo)致其相應(yīng)基因的沉默。
這種轉(zhuǎn)錄后基因沉默的機(jī)制（post-transcriptional gene silencing, PTGS）被稱為RNA干擾（RNAi）：
1、siRNA的設(shè)計及合成，由客戶自行設(shè)計，或由公司代為設(shè)計目前已證實的siRNA，以及陰性對照，并由DNA合成儀合成
2、構(gòu)建RNAi干擾載體，PCR及測序鑒定
3、PCR檢測mRNA表達(dá)以及western blotting檢測蛋白的表達(dá)
提供結(jié)果：
1、PCR鑒定圖片*1份
2、提供測序報告*1份
3、酶切鑒定圖片*1份
4、RT-PCR電泳圖*1份
5、western blotting結(jié)果*1份
6、實驗報告*1份
1、所有書面反饋,我們收到后48小時內(nèi)給出答復(fù)；
2、自2016年7月20日起，我公司所出售產(chǎn)品，質(zhì)保期由原來的3-6個月，調(diào)整為1年，即產(chǎn)品發(fā)貨之日起開始計算，1年內(nèi)出現(xiàn)質(zhì)量問題填寫反饋表發(fā)送至[email protected]郵箱，博奧森公司給予退換貨處理；超過1年的產(chǎn)品質(zhì)量投訴只提供技術(shù)支持不提供退換貨服務(wù)。
2、自2016年7月20日起，我公司所出售產(chǎn)品，質(zhì)保期由原來的3-6個月，調(diào)整為1年，即產(chǎn)品發(fā)貨之日起開始計算，1年內(nèi)出現(xiàn)質(zhì)量問題填寫反饋表發(fā)送至[email protected]郵箱，博奧森公司給予退換貨處理；超過1年的產(chǎn)品質(zhì)量投訴只提供技術(shù)支持不提供退換貨服務(wù)。
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