蛋白質(zhì)表達(dá)與純化
我公司擁有豐富的蛋白質(zhì)表達(dá)及純化經(jīng)驗,以客戶提供的表達(dá)克隆開始,進(jìn)行條件的優(yōu)化,為客戶提供所需蛋白質(zhì)。
服務(wù)編號 |
服務(wù)內(nèi)容 |
制備時間 |
技術(shù)參數(shù) |
價 格 |
bs-P01 |
純化5mg蛋白質(zhì)(客戶提供表達(dá)質(zhì);蚓) |
4周工作日 |
蛋白純度(電泳純≧85%) |
4000元/5mg |
bs-P02 |
純化10mg的蛋白質(zhì)(客戶提供表達(dá)質(zhì);蚓) |
4周工作日 |
蛋白純度(電泳純≧85%) |
6000元/10mg |
技術(shù)報告 |
提供詳細(xì)的純化蛋白報告及實驗過程、步驟、檢測報告(委托制備,簽訂正式合同文本) |
客戶需要提供的信息及材料:
1.待表達(dá)基因的序列
2.表達(dá)載體的序列(質(zhì)譜圖)
3.表達(dá)克隆質(zhì)粒和菌株
注:目前只承接提供帶GST標(biāo)簽、His標(biāo)簽的融合蛋白表達(dá)及純化,其它標(biāo)簽蛋白需協(xié)商。
分子生物學(xué)技術(shù)服務(wù)
序 號 |
服務(wù)名稱 |
價 格 |
一 |
DNA抽提及純化 |
面議 |
二 |
RNA抽提及純化 |
面議 |
三 |
mRNA分離及純化 |
面議 |
四 |
PCR及產(chǎn)物純化 |
面議 |
五 |
質(zhì)粒抽提 |
面議 |
六 |
RT-PCR |
面議 |
七 |
載體構(gòu)建 |
面議 |
八 |
RNA干擾 |
面議 |
服務(wù)詳細(xì)介紹
一、DNA抽提及純化
根據(jù)客戶要求,利用指定試劑盒,對動物(組織、細(xì)胞、血液等)、植物(各種組織)、微生物、病毒等進(jìn)行DNA抽提及純化。
提供結(jié)果:DNA、電泳圖、OD值及定量結(jié)果(濃度及體積)。
二、RNA抽提及純化
根據(jù)客戶要求,利用指定試劑盒或自產(chǎn)試劑盒(主要針對特殊組織,如含次生代謝產(chǎn)物豐富的植物組織等),對動物(組織、細(xì)胞、血液等)、植物(各種組織)、微生物、病毒等進(jìn)行RNA抽提及純化。
提供結(jié)果:RNA、電泳圖、OD值及定量結(jié)果(濃度及體積)。
三、mRNA分離及純化
根據(jù)客戶要求,利用Qiagen公司分離純化試劑盒或國產(chǎn)分離純化試劑盒,對總RNA進(jìn)行mRNA的分離及純化,以獲得高質(zhì)量的mRNA用于后續(xù)的建庫等工作。
提供結(jié)果:mRNA、電泳圖及定量結(jié)果(濃度及體積)。
四、PCR及純化
根據(jù)客戶要求,利用客戶提供的樣品及引物,進(jìn)行批量PCR并進(jìn)行產(chǎn)物純化,包括前期的轉(zhuǎn)化、鋪板、挑菌、搖菌等工作,可提供全程服務(wù)。純化建議采用millipore公司純化板。
提供結(jié)果:PCR產(chǎn)物、電泳圖及定量結(jié)果(濃度及體積)。
五、質(zhì)粒抽提
根據(jù)客戶要求,利用進(jìn)口或國產(chǎn)試劑盒,對客戶提供樣品進(jìn)行質(zhì)粒小抽或大抽。為客戶提供內(nèi)毒素含量達(dá)到科研級和醫(yī)藥級的質(zhì)粒DNA。
提供結(jié)果:質(zhì)粒、實驗報告(包括質(zhì)粒電泳照片、鑒定結(jié)果及OD值測定結(jié)果)、1.7≤OD260/OD280≤2.0的質(zhì)粒。
六、RT-PCR檢測
RT-PCR是以RNA為起始材料經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)產(chǎn)生cDNA,再以cDNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增以獲取目的基因,用于檢測細(xì)胞或組織中基因表達(dá)變化。
實驗流程:包括RNA制備、RT反應(yīng)、PCR反應(yīng)等。
引物要求:最好由服務(wù)方設(shè)計并合成。如果客戶提供,需提供引物序列;引物若為干粉,請?zhí)峁┮锏臏?zhǔn)確量;若為稀釋液,請?zhí)峁┮锏淖罱K濃度(每個反應(yīng)所需的引物滿足以下要求:濃度≥10pm/μl,體積≥10μl)。
結(jié)果報告內(nèi)容:電泳圖譜及相關(guān)說明;實驗流程。
七、載體構(gòu)建
載體構(gòu)建是將目的基因與載體連接并轉(zhuǎn)化得到重組質(zhì)粒的過程,客戶需提供來源可靠的組織,細(xì)胞或血液以便用于目的基因的擴(kuò)增。
1、原核表達(dá)載體的構(gòu)建、誘導(dǎo)表達(dá)和蛋白純化
實驗過程:RNA抽提、RT-PCR、連接、轉(zhuǎn)化、挑選陽性克隆、測序、誘導(dǎo)表達(dá)、蛋白純化
提供結(jié)果:
(1)、提供測序報告*1份
(2)、PCR擴(kuò)增電泳圖片*1份
(3)、重組質(zhì)粒菌種或者質(zhì)粒(30ul)*1份
(4)、純化后蛋白
(5)、實驗報告*1份
2、真核表達(dá)載體的構(gòu)建
實驗過程:RNA抽提、RT-PCR、連接、轉(zhuǎn)化、挑選陽性克隆、測序
提供結(jié)果:
(1)、提供測序報告*1份
(2)、PCR擴(kuò)增電泳圖片*1份
(3)、重組質(zhì)粒菌種或者質(zhì)粒(30ul)*1份
(4)、實驗報告*1份
3、腺病毒載體構(gòu)建及病毒包裝服務(wù)
* 目的基因克隆載體的構(gòu)建
實驗過程:RNA抽提、RT-PCR、連接、轉(zhuǎn)化、挑選陽性克隆、測序
提供結(jié)果:
(1)、提供測序報告*1份
(2)、PCR擴(kuò)增電泳圖片*1份
(3)、重組質(zhì)粒菌種或者質(zhì)粒(30ul)*1份
(4)、實驗報告*1份
* 目的基因表達(dá)載體構(gòu)建
實驗過程:酶切,連接,轉(zhuǎn)化,挑選陽性克隆,PCR鑒定,酶切鑒定
提供結(jié)果:
(1)、PCR鑒定圖片*1份
(2)、酶切鑒定圖片*1份
(3)、實驗報告*1份
* 包裝腺病毒
實驗過程:酶切,共轉(zhuǎn)染細(xì)胞,細(xì)胞培養(yǎng),鑒定,純化,測定濃度
提供結(jié)果:
(1)、實驗報告*1份
(2)、轉(zhuǎn)染后圖片*1份
(3)、包裝好的病毒*1份(滴度>5*107)
4、慢病毒載體構(gòu)建及病毒包裝服務(wù)
* 目的基因克隆載體的構(gòu)建
實驗過程:RNA抽提、RT-PCR、連接、轉(zhuǎn)化、挑選陽性克隆、測序
提供結(jié)果:
(1)、提供測序報告*1份
(2)、PCR擴(kuò)增電泳圖片*1份
(3)、重組質(zhì)粒菌種或者質(zhì)粒(30ul)*1份
(4)、實驗報告*1份
* 目的基因表達(dá)載體構(gòu)建
實驗過程:酶切,連接,轉(zhuǎn)化,挑選陽性克隆,PCR鑒定,酶切鑒定
提供結(jié)果:
(1)、PCR鑒定圖片*1份
(2)、酶切鑒定圖片*1份
(3)、實驗報告*1份
* 包裝慢病毒
實驗過程:酶切,共轉(zhuǎn)染細(xì)胞,細(xì)胞培養(yǎng),鑒定,純化,測定濃度
提供結(jié)果:
(1)、實驗報告*1份
(2)、轉(zhuǎn)染后圖片*1份
(3)、包裝好的病毒*1份(檢測滴度)
八、RNA干擾服務(wù)
近年來研究表明,將與mRNA對應(yīng)的正義RNA和反義RNA組成的雙鏈RNA(dsRNA)導(dǎo)入細(xì)胞,可以使mRNA發(fā)生特異性降解,導(dǎo)致其相應(yīng)基因的沉默。
這種轉(zhuǎn)錄后基因沉默的機(jī)制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被稱為RNA干擾(RNAi):
1、siRNA的設(shè)計及合成,由客戶自行設(shè)計,或由公司代為設(shè)計目前已證實的siRNA,以及陰性對照,并由DNA合成儀合成
2、構(gòu)建RNAi干擾載體,PCR及測序鑒定
3、PCR檢測mRNA表達(dá)以及western blotting檢測蛋白的表達(dá)
提供結(jié)果:
1、PCR鑒定圖片*1份
2、提供測序報告*1份
3、酶切鑒定圖片*1份
4、RT-PCR電泳圖*1份
5、western blotting結(jié)果*1份
6、實驗報告*1份
bio-equip.com
北京博奧森生物技術(shù)有限公司成立于2001年,注冊資本2000萬元,是集免疫學(xué)科研試劑研發(fā)、生產(chǎn)、銷售為一體的國家高新技術(shù)企業(yè)。在公司近1300平米的研發(fā)中心樓內(nèi),擁有SPF級實驗動物房、GMP級單克隆抗體制備平臺,同時購置了CSBio多肽合成儀、Akta全自動液相色譜系統(tǒng)、BD流式細(xì)胞儀、Leica冷凍切片機(jī)等多種生產(chǎn)、檢測儀器。公司還擁有一批技術(shù)精湛、經(jīng)驗豐富的科研開發(fā)團(tuán)隊,在免疫和分子生物學(xué)等領(lǐng)域擁有多項自主知識產(chǎn)權(quán)。
自成立之初,公司始終秉持“自主研發(fā)、原始創(chuàng)新,為全球生命科學(xué)研究提供優(yōu)質(zhì)服務(wù)”的經(jīng)營理念。提供全面的科研抗體、試劑,診斷抗體原料,以及CRO服務(wù)。公司現(xiàn)擁有近兩萬種抗體產(chǎn)品,涵蓋人蛋白靶點13000多個。特色產(chǎn)品有特異磷酸化抗體及專利授權(quán)AF熒光標(biāo)記抗體等。此外,公司還提供完善的單/多克隆抗體制備、標(biāo)記、重組蛋白、多肽合成及各項免疫學(xué)檢測技術(shù)服務(wù)等。公司恪守ISO9001:2008國際質(zhì)量管理體系認(rèn)證要求,致力于打造“Bioss”精品抗體品牌。 2010年博奧森(波士頓)在美國設(shè)立了面向全球抗體市場的商務(wù)拓展及國際市場營銷總部,不斷擴(kuò)展全球銷售體系,主打Bioss國際品牌,向全球科研工作者提供高質(zhì)量的科研抗體產(chǎn)品。迄今為止,Bioss產(chǎn)品已遍布全球多個國家和地區(qū),并已成為數(shù)家國際知名抗體公司的OEM合作伙伴。Bioss抗體產(chǎn)品已出現(xiàn)在數(shù)千篇高質(zhì)量SCI文章中,獲得了全世界眾多生命科學(xué)領(lǐng)域科研人員的認(rèn)可。
百舸爭流,只爭朝夕。近二十年的探索和拼搏,為Bioss品牌在免疫學(xué)試劑領(lǐng)域奠定了堅實的基礎(chǔ)。我們將在未來勇于開拓,自主創(chuàng)新,為生命科學(xué)研究提供更加優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù),回報全球用戶的信任,為生命科學(xué)進(jìn)步盡綿薄之力。
溫馨提示:產(chǎn)品僅用于實驗室科研及非臨床用途。