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【背景資料】:細(xì)胞內(nèi)PH值在許多細(xì)胞生命活動(dòng)中發(fā)揮著重要作用,例如細(xì)胞生長(zhǎng),鈣離子的調(diào)控,胞吞作用,趨化性,細(xì)胞粘合和其它細(xì)胞活動(dòng)。BCECF被廣泛地用于細(xì)胞內(nèi)pH的測(cè)定。Tsien博士和其他人通過(guò)加入2個(gè)額外的羧化物基團(tuán)改進(jìn)了這種羧基熒光素。加入的兩個(gè)羧基使得它能更好地被固定在細(xì)胞內(nèi)。BCECF具有很好的水溶性,是因?yàn)樗谥行詐H時(shí)帶有4到5個(gè)負(fù)電荷。但是BCECF卻很難穿過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)入到細(xì)胞內(nèi)。它的pKa值為6.97,高于其它的羧基熒光素。BCECF在激發(fā)光譜439 nm處有等吸收點(diǎn),因此它能和Fura 2一樣可用比率法測(cè)定。505 nm和439 nm通常是非常有用的用于比率測(cè)量的波長(zhǎng),一般會(huì)將490 nm和450 nm的濾光片加在激發(fā)光源的前面。而530 nm的濾光片則是用來(lái)查看它的熒光信號(hào)的。這里要注意的是,激發(fā)光譜與吸收光譜有一些細(xì)微的區(qū)別。BCECF-AM是乙酰甲酯化的BCECF。它能夠輕易地進(jìn)入到細(xì)胞內(nèi)。就和其他的乙酰甲酯類一樣,BCECF-AM只需要通過(guò)孵育就能進(jìn)入細(xì)胞。
【產(chǎn)品描述】:pH熒光探針BCECF, AM *超級(jí)純*產(chǎn)品的光譜學(xué)相關(guān)參數(shù)為Ex=505nm / Em=520nm;其對(duì)應(yīng)分子量大小為808.69MW。
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