本試劑盒僅供研究使用。
                                                                     96T
 
使用目的：
本試劑盒用于測(cè)定人類血清、血漿及相關(guān)液體樣本中乙腦病毒抗體IgM（JEV IgM）表達(dá)。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測(cè)定標(biāo)本中人乙腦病毒抗體IgM（JEV IgM）表達(dá)。用純化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，可與樣品中乙腦病毒抗體IgM（JEV IgM）相結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合，形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），與CUTOFF值相比較，從而判定標(biāo)本中人乙腦病毒抗體IgM（JEV IgM）的存在與否。
試劑盒組成

1	30倍濃縮洗滌液	20ml×1瓶	7	終止液	6ml×1瓶
2	酶標(biāo)試劑	6ml×1瓶	8	陽性對(duì)照	0.5ml×1瓶
3	酶標(biāo)包被板	12孔×8條	9	陰性對(duì)照	0.5ml×1瓶
4	樣品稀釋液	6ml×1瓶	10	說明書	1份
5	顯色劑A液	6ml×1瓶	11	封板膜	2張
6	顯色劑B液	6ml×1/瓶	12	密封袋	1個(gè)

標(biāo)本要求 
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟

• 編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照2孔、陽性對(duì)照2孔、空白對(duì)照1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
• 加樣：分別在陰、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照50μl。然后在待測(cè)樣品孔先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，
• 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
• 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
• 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
• 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
• 溫育：操作同3。
• 洗滌：操作同5。
• 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
• 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
• 測(cè)定：以空白孔調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

 
計(jì)算和結(jié)果判定：
  試驗(yàn)有效性：陽性對(duì)照孔平均值≥1.00; 陰性對(duì)照平均值≤0.20
  臨界值（CUT OFF）計(jì)算：臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15
  陰性判定：樣品OD值< 臨界值（CUT OFF）者為乙腦病毒抗體IgM（JEV IgM）陰性
  陽性判定：樣品OD值≥ 臨界值（CUT OFF）者為乙腦病毒抗體IgM（JEV IgM）陽性。
注意事項(xiàng)
1．操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行，本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
2．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
3．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

• 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

5．底物請(qǐng)避光保存。
6．試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)，使用雙波長(zhǎng)檢測(cè)時(shí)，參考波長(zhǎng)為630nm
7．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為2M的硫酸，使用時(shí)必須注意安全。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6個(gè)月
 

       上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月，是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域，科研機(jī)構(gòu)、高校、院所及企業(yè)產(chǎn)品開發(fā)研究提供所需要的科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)等。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)，通過公司各個(gè)部門所有員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)擁有較高知名度，深得新老客戶的厚愛，本著“優(yōu)質(zhì)、服務(wù)、信譽(yù)”的精神，堅(jiān)持以先進(jìn)的技術(shù)、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、良好的信譽(yù)，為國內(nèi)外廣大用戶提供優(yōu)質(zhì)生物產(chǎn)品和服務(wù)。公司在重視產(chǎn)品質(zhì)量的同時(shí)，也建立了一套集技術(shù)支持、物流、售后服務(wù)等多個(gè)部門聯(lián)動(dòng)服務(wù)體系，努力把我們方便、快捷、周到的服務(wù)提供給每一個(gè)客戶本研究所鄭重承諾：質(zhì)量保證、供貨及時(shí)、服務(wù)周到，公司總投資超過2000萬元，并先后引進(jìn)了自動(dòng)化設(shè)備，組建了專業(yè)的研發(fā)技術(shù)團(tuán)隊(duì)。憑借著潔凈化的生產(chǎn)車間、標(biāo)準(zhǔn)化的質(zhì)量管理系統(tǒng)，為生產(chǎn)高質(zhì)量的產(chǎn)品提供了有效保證。
     雅吉生物自主研發(fā)的ELISA試劑盒，在國內(nèi)眾多重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室廣泛使用，深受廣大科研人員的好評(píng)，先后在權(quán)威雜志文章中被引用。 
上海雅吉生物科技有限公司以極強(qiáng)的職業(yè)精神，積極、負(fù)責(zé)、坦誠的服務(wù)令我們的客戶滿意！ 
客戶服務(wù)承諾
    以“服務(wù)、客戶、技術(shù)”為根本�？蛻羰俏覀兊暮诵模瑘�(jiān)持以高質(zhì)量的產(chǎn)品服務(wù)客戶， 秉持誠信原則，重視客戶的意見與感受；我們?cè)敢鉃榇蠹姨峁┝己玫氖酆蠓��?wù)。希望老師們對(duì)我們的服務(wù)及工作提出意見，您的滿意是我們工作的動(dòng)力，祝廣大師生客戶生活工作愉快！
更多產(chǎn)品詳情可查詢官網(wǎng)：www.yajimall.com