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| 銷售商： 上海雅吉生物科技有限公司 | 查看該公司所有產(chǎn)品 >> |
- 介紹： 基 因 型F-φ80 lac ZΔM15 Δ(lacZYA-arg F) U169 endA1 recA1 hsdR17(rk-,mk+) supE44λ- thi -1 gyrA96 relA1 phoA簡 要 說 明DH5α菌株是實驗室最常用的感受態(tài)細胞。 缺失核酸內(nèi)切酶(endA)，提高了質粒DNA的產(chǎn)量和質量；重組酶缺陷型(recA)減少插入片段的同源重組概率，保證了插入DNA的穩(wěn)定性；lacZΔM15的存在使DH5α可用于藍、白斑篩選。DH5α菌株的缺點是生長緩慢，37℃需培12-14小時才能看見克隆；如需加快試驗速度，請選用TG1，Mach1-T1，XL10-Gold等生長速度快的感受態(tài)細胞。High5TM系列DH5α感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作，經(jīng)pUC19質粒檢測轉化效率約1×109cfu/μg。操 作 說 明1.DH5α感受態(tài)細胞放置冰中融化（或放手心或室溫片刻，待菌體處于冰水混合狀態(tài)時迅速插入冰中），加入目的DNA（質粒或連接產(chǎn)物）并用手撥打EP管底輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。2.42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基（2YT或LB），混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。4.5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少17h。注 意 事 項1.感受態(tài)細胞最好在冰上融化。冰上放置大約5分鐘即可融化，融化后8分鐘內(nèi)加入質粒， 否則會影響轉化效率。2.混入質�；蜻B接產(chǎn)物時應輕柔操作。3.轉化高濃度的質粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應減少最終用于涂板的菌量。
- 儲存條件： -80℃
- 用途： 克隆感受態(tài)細胞
- 注意：部分產(chǎn)品我司僅能提供部分信息，我司不保證所提供信息的權威性，僅供客戶參考交流研究之用。
- 操 作 說 明
- 1. DH5α 感受態(tài)細胞放置冰中融化（或放手心或室溫片刻，待菌體處于冰水混合狀態(tài)時迅速插入冰中），加入目的 DNA（質�；蜻B接產(chǎn)物）并用手撥打 EP 管底輕輕混勻，冰上靜置 25 分鐘。
- 2. 42℃水浴熱激 45 秒，迅速放回冰上并靜置 2 分鐘，晃動會降低轉化效率。
- 3. 向離心管中加入 700μl 不含抗生素的無菌培養(yǎng)基（2YT 或 LB），混勻后 37℃，200 rpm 復蘇 60 分鐘。
- 注 意 事 項
- 1. 感受態(tài)細胞最好在冰上融化。冰上放置大約 5 分鐘即可融化，融化后 8 分鐘內(nèi)加入質粒， 否則會影響轉化效率。
- 2. 混入質粒或連接產(chǎn)物時應輕柔操作。
- 3. 轉化高濃度的質�；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應減少最終用于涂板的菌量。
試劑盒售后：本公司出售的試劑盒均保質保量，質量問題均可免費退換，另提供免費代測服務。
細胞售后：
1. 細胞運輸丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等，重發(fā)；
3. 細胞收到當天以及第2,3天請拍照，未告知的視為產(chǎn)品合格。4-10天內(nèi)出現(xiàn)問題，請?zhí)峁┘毎掌图毎霈F(xiàn)問題的照片以及細胞相關操作的詳細步驟，并跟我公司人員及時溝通判定是否重發(fā)，具體可以參照我官網(wǎng)或者隨貨說明書相關售后條款。
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手機版：DH5α 感受態(tài)細胞
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