單克隆抗體:
1.概念:由單個B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。
2.特點:化學(xué)性質(zhì)單一,特異性強(qiáng),靈敏度高。
3.單克隆抗體的應(yīng)用:
(1)診斷疾病:診斷病毒引起的疾病和用癌細(xì)胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導(dǎo)向治療:運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成“生物導(dǎo)彈”
(3)分離和純化抗原分子。
單抗的制備過程:
1.動物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細(xì)胞:與培養(yǎng)好的骨髓瘤細(xì)胞混合,人工誘導(dǎo)細(xì)胞融合。
3.細(xì)胞融合:淋巴細(xì)胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細(xì)胞的篩選:HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養(yǎng)基,其中三種成分與細(xì)胞DNA合成有關(guān),骨髓瘤細(xì)胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞:體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞,從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體;蛘撸瑢㈦s交瘤細(xì)胞移植到小鼠腹腔內(nèi),從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化
小鼠抗PROSC單克隆抗體說明書單抗制備過程:
1.提取合成專一性抗體的單個B淋巴細(xì)胞(不能在體外生長)。
2.應(yīng)用細(xì)胞雜交技術(shù)使骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合,得到雜交瘤細(xì)胞。
3.對雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),選出所需要的細(xì)胞群,并進(jìn)行克隆化培養(yǎng),得到穩(wěn)定的雜交瘤細(xì)胞,再進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)獲得單克隆抗體。
4.提純,一般常用金黃色葡萄球菌蛋白A-瓊脂糖4B親和層析法。
多抗和單抗特性比較:
(1)均一性。一種單抗中,每個抗體的化學(xué)結(jié)構(gòu)和氨基酸順序都相同,只有一種Ig亞類。多抗是多種種類和亞類Ig的混合物。
(2)穩(wěn)定性。單抗對PH變化敏感,對熱不穩(wěn)定,提純過程中易變性,而多抗的穩(wěn)定性則較好。
(3)特異性。單抗是單一地針對抗原的某一決定簇,所以用它進(jìn)行血清學(xué)反應(yīng)時,特異性強(qiáng),敏感性高,一般不發(fā)生交叉反應(yīng)。而多抗能與抗原上的多種抗原決定簇結(jié)合,所以特異性較差,較易引起交叉反應(yīng)。
(4)重復(fù)性。單抗的重復(fù)性好,而多抗每批都不一樣。
(5)沉淀反應(yīng)。多抗由于與抗原多價結(jié)合容易形成網(wǎng)絡(luò)樣沉淀,而單抗只與抗原結(jié)合產(chǎn)生二聚體,不能直接形成抗原抗體沉淀物。小鼠周神經(jīng)成纖維細(xì)胞(MPNF)(5×105) HL-60, 人早幼粒白血病細(xì)胞 Human氧化偶氮苯-4,4'-二羧酸二乙酯(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)Diethyl Azoxybenzene-4,4'-dicarboxylate
中國倉鼠肺細(xì)胞;CHL4,4'-雙(己氧基)氧化偶氮苯(>96.0%(N))質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(N)4,4'-Bis(hexyloxy)azoxybenzene
人髓核細(xì)胞(HNPC)(5×105)4,4'-二戊氧基氧化偶氮苯(>95.0%(N))質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(N)4,4'-Diamyloxyazoxybenzene
CL-0083FaDu(人咽鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×24,4'-二丁氧基氧化偶氮苯質(zhì)量規(guī)格:4,4'-Dibutoxyazoxybenzene
小鼠垂體瘤細(xì)胞;GT1-1 大鼠角膜成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL水楊酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Salicylic acid
CD93 Others Human 人 CD93 / C1QR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) PEPSTATIN胃蛋白酶抑制劑超級白色粉末COLDsigma
MS751 人子宮頸表皮癌細(xì)胞3-羌基炳晴puriss》99.0% 3-xy7noxypropionitnilq 109-78-4
NCI-H661人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞 NCI-H661 large cell lung cancer cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSpxenOLPHTHALEIN酚酞白色至米白色固體RTsigma
AIMP1 Protein Human 重組人 AIMP1 / EMAP2 / SCYE1 蛋白 (His 標(biāo)簽)PROTEINMWMARKER,HIGHRANGE蛋白Marker生物技術(shù)級液體FROZENsigma
人胚肺二倍體細(xì)胞;2BS 人前列腺成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL9004-34-6微晶纖維素Microcrystalline Cellulose (AS)
LTBR Others Rat 大鼠 LTBR / TNFRSF3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) BEEFEXTRACTPOWDER牛肉浸粉高級棕黃色至褐色粉末RT不sigma
綠色熒光蛋白標(biāo)記人胃癌細(xì)胞;MGC803-GFP1-二基安基-2-炳醇 1-Dimqthylcmino-2-propcnol 108-16-7
786-O細(xì)胞,人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞,CMT93細(xì)胞 CL-0202Saos-2(人骨肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2D-FRUCTOSED-果糖美國藥典級,歐洲藥典級白色精細(xì)粉末RTsigma
VCaP(人前列腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2化高鐵血紅蛋白參比液150g50張
NHEM.f-c M2 正常人表皮素細(xì)胞(NHEM)少年,M2培養(yǎng)液中培養(yǎng) 500,000cells 視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)Uracil 50g/100g/250g/500g原裝 Amresco 0847
NCI-H596(人肺腺鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2抑霉唑(標(biāo)準(zhǔn)品) Imazalil質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
CNE(人鼻咽癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0134KU812(人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2C7春雷霉素鹽酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)Kasugamycin 小鼠抗PROSC單克隆抗體說明書hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥90% (HPLC)
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-E2標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=4%)Kitazine solution質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=4%
ERN1 Others Human 人 ERN1 / IRE1 (aa 465-977) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 利谷。(biāo)準(zhǔn)品) Linuron質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
滑膜細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)苯噻草胺(標(biāo)準(zhǔn)品)Mefenacet質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%