蛋白A(Staphylococcal Protein A)是一種金黃色葡萄球菌細(xì)胞壁蛋白質(zhì),能與哺乳動物IgG的Fc區(qū)結(jié)合。采用重組表達(dá)的Protein A,將Protein A與溴化氫活化的顆粒狀瓊脂糖凝膠偶聯(lián)制成Protein A預(yù)裝柱,能夠特異性地結(jié)合多種免疫球蛋白的Fc區(qū)段。
Protein A預(yù)裝柱可用來純化不同來源的抗體及不同亞型的抗體,并在免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)中捕獲免疫復(fù)合物。本產(chǎn)品使用了多位點(diǎn)交聯(lián)技術(shù),穩(wěn)定性好、特異性高并具有廣譜結(jié)合力,每毫升基質(zhì)可特異性結(jié)合5-10毫克抗體。
產(chǎn)品組分
名稱 |
規(guī)格 |
Protein A預(yù)裝柱 |
5ml |
產(chǎn)品說明書 |
1份 |
保存條件
經(jīng)常使用4℃保存,長期保存加甘油放置于-20℃,有效期一年。
運(yùn)輸條件
低溫冷藏運(yùn)輸
注意事項(xiàng)
抗體純化柱可以多次反復(fù)使用,但應(yīng)當(dāng)避免同一支純化柱純化不同的抗體,因?yàn)榭贵w和柱子之間結(jié)合緊密,酸洗脫并不能完全洗去結(jié)合上的免疫球蛋白,將產(chǎn)生交叉反應(yīng)。
操作步驟
1、取Protein A柱平衡至室溫,用 10倍柱體積的PBS洗滌平衡層析柱;
2、含抗體的血清或其它體液高速離心后,將上清與等體積2×PBS緩沖液混合,調(diào)整pH以及離子濃度后,緩慢加入層析柱;
3、用10倍柱體積以上的PBS洗滌,至流出液無蛋白檢出;
4、加入2-5倍柱體積0.1 M檸檬酸(pH 2.7)或者0.1 M甘氨酸(pH 3.0),收集洗脫液;
5、洗脫后的抗體加入飽和Na2HPO4溶液進(jìn)行中和;
6、濃縮洗脫液到所需體積,加入50%甘油-20℃保存;
7、層析柱中Protein
A柱使用后需要及時處理,酸洗脫抗體以后,使用10倍柱體積PBS洗柱平衡到中性,20%乙醇溶液充分洗滌后,封閉上下兩端,保存在4℃。
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武漢藥生動物養(yǎng)殖有限公司為云克隆科技股份有限公司的全資子公司,2011年成立于郭蔡路22號,2015年搬遷到研究所院內(nèi)。獲行政許可的潔凈級實(shí)驗(yàn)動物中心位于武漢出口加工區(qū),面積達(dá)1200平方米,其中SPF級動物房320平方米。中心可同時飼養(yǎng)10000只SPF級大、小鼠,1440只清潔級兔和400只清潔級豚鼠。普通級動物房位于振華路33號,可圈養(yǎng)羊、馬、牛、豬、雞、狗等大型動物若干。這些動物均由專業(yè)人員飼養(yǎng),用于抗體制備,質(zhì)控品采集,原代細(xì)胞分離,疾病模型構(gòu)建和其他動物實(shí)驗(yàn)服務(wù)。