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【背景資料】:血管內(nèi)皮層是薄的單層細(xì)胞,它為生物材料如氣體,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和代謝廢物等的交換提供網(wǎng)絡(luò)。內(nèi)皮層在血管腔和控制這種交換的周?chē)M織間形成選擇性屏障。在正常情況下,內(nèi)皮細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞間連接等結(jié)構(gòu)嚴(yán)格限制血液中生物大分子的通過(guò)而發(fā)揮其屏障作用,但在某些生理或病理情況下屏障功能受損,通透性可以大幅度地增加,即細(xì)胞間縫隙形成等,使血液中的生物大分子通過(guò),進(jìn)入內(nèi)皮下組織或組織間隙。這里有許多調(diào)控血管通透性的血管活性細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子,如白細(xì)胞介素-1α和β1,TNF-α2,IFN-γ,HGF 3和VEGF4。也有許多血管通透性崩潰相關(guān)的嚴(yán)重系統(tǒng)性疾病,如癌癥,糖尿病,心臟病,休克,高血壓和關(guān)節(jié)炎等。
【產(chǎn)品描述】:Trevigen Cultrex 體外血管通透性分析試劑盒為篩選信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中與血管通透性相關(guān)化合物的快速和高通量篩查提供了解決方案。該試劑盒提供靈活、標(biāo)準(zhǔn)化、高通量的方案定量蛋白或化合物對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞間黏著維持的影響程度。同時(shí)提供的單獨(dú)24孔板樣式和96孔整板樣式可適應(yīng)單個(gè)實(shí)驗(yàn)或大規(guī)模篩選。本試劑盒采用了由8 μm PET膜設(shè)計(jì)的一個(gè)簡(jiǎn)化型趨化小室。無(wú)需拆卸裝置,遷移小室(頂部)內(nèi)的小孔可通向分析小室(底部)。這種設(shè)計(jì)便于操作,能防止污染,并且適用于機(jī)械化高通量操作系統(tǒng)。分析小室可直接在96孔板上進(jìn)行分析,減少了操作步驟間引入的實(shí)驗(yàn)影響因素。分析使用FITC標(biāo)記的右旋糖酐(Dextran)作為通透分析進(jìn)行血管通透性的定量檢測(cè)。連續(xù)的單層細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞間黏著機(jī)制,比如連接(黏附連接,緊密連接和空隙連接)形成屏障。這一屏障嚴(yán)格地將FITC-右旋糖酐控制在頂部小室。細(xì)胞間黏著機(jī)制的損傷在細(xì)胞外空間產(chǎn)生空隙,這使得FITC-右旋糖酐能夠進(jìn)入底部小室。最后形成的彌散的FITC-右旋糖酐與胞外空隙的數(shù)量相關(guān)聯(lián),而這體現(xiàn)了血管的通透性。Cultrex 96孔體外血管通透性分析試劑盒提供了整板96孔分析樣式。
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