Portelite 熒光總核酸定量試劑盒用于快速測量核酸總量，包括樣品中的雙鏈 DNA (dsDNA)、單鏈 DNA (ssDNA) 和 RNA。 該試劑盒包含所有基本試劑，包括 Helixyte Green ssDNA 試劑、稀釋緩沖液和預(yù)稀釋的 DNA 標(biāo)準(zhǔn)品。 Helixyte Green All 試劑是一種靈敏的熒光核酸探針，用于測量樣品中可能含有雙鏈 DNA (dsDNA)、單鏈 DNA (ssDNA)、RNA 和長寡核苷酸的核酸總量。 Helixyte Green All 試劑不加選擇地與 dsDNA、ssDNA 和 RNA 結(jié)合。 Portelite 熒光總核酸定量試劑盒針對使用 CytoCite 或 Qubit® 熒光計(jì)測量核酸總量進(jìn)行了優(yōu)化。

適用儀器

實(shí)驗(yàn)方案

概述

1.準(zhǔn)備 Helixyte Green All 工作溶液
2.在每個(gè) 0.2 mL PCR 管中加入 190 µL 1X Helixyte Green All 工作溶液
3.在每管中加入 10 µL 核酸標(biāo)準(zhǔn)品或測試樣品
4.在室溫下孵育 2 分鐘
5.使用 CytoCite 熒光計(jì)或 Qubit 熒光計(jì)檢測熒光強(qiáng)度

溶液制備

Helixyte Green ALL工作溶液
1.用檢測緩沖液（組分 B）將 Helixyte Green All 試劑（組分 A）稀釋 200 倍。 例如，要為 5 個(gè)樣品制備足夠的工作溶液，將 5 μL Helixyte Green All（組分 A）添加到 1 mL 檢測緩沖液（組分 B）中。
注意：通過用箔紙覆蓋或?qū)⑵渲糜诤诎抵衼肀Ｗo(hù)工作溶液免受光照。 建議在塑料容器而不是玻璃容器中制備溶液，因?yàn)槿玖峡赡軙�吸附到玻璃表面�?為獲得最佳效果，該溶液應(yīng)在稀釋后幾小時(shí)內(nèi)使用。

操作步驟 

樣品體積的可接受范圍是 1~20 μL，具體取決于核酸樣品的估計(jì)濃度。
以下方案是基于 10 μL 的樣品體積生成的。
1.將 190 µL 1X Helixyte Green All 工作溶液添加到每個(gè) Cytocite 樣品管 (#CCT100) 或等效的 0.2 mL PCR 管中。
注意 使用薄壁、聚丙烯、透明的 0.2 mL PCR 管，例如 AAT Cat#CCT100。
2.每管加入10 μL核酸標(biāo)準(zhǔn)品或測試樣品，渦旋2~3秒混勻。
3.在室溫下孵育所有管子 2 分鐘。
4.將樣品插入 CytoCite 或 Qubit 并使用綠色熒光通道檢測熒光強(qiáng)度。

標(biāo)準(zhǔn)校準(zhǔn)曲線的制作
對于 Portelite 檢測，您可以選擇使用核酸標(biāo)準(zhǔn)品制作校準(zhǔn)曲線。 這是生成定制 DNA 標(biāo)準(zhǔn)曲線的簡要方案。
1.進(jìn)行 1:2 連續(xù)稀釋：將 10 ng/μL 核酸標(biāo)準(zhǔn)品 #2（組分 D）添加到檢測緩沖液（組分 B）中以獲得 10、5、2.5、1.25、0.62、0.31、0.15 ng/μL DNA 標(biāo)準(zhǔn)品 稀釋。
2.將 190 µL Helixyte Green All 工作溶液加入每個(gè)管中。
3.將 10 µL 標(biāo)準(zhǔn)品加入 0.2 mL PCR 管中，然后渦旋混合 2~3 秒。
4.在室溫下孵育反應(yīng) 2 分鐘。
5.將樣品插入 CytoCite 并使用綠色熒光通道檢測熒光強(qiáng)度。

圖示

圖 1. 使用 Qubit 熒光計(jì)（藍(lán)色）或 CytoCite 熒光計(jì)（紅色）比較總核酸劑量反應(yīng)。

西安百螢生物科技有限公司是一家專注從事生物、化學(xué)試劑及其試劑盒的高新技術(shù)企業(yè)；主要以熒光探針，分子探針，核酸/蛋白質(zhì)標(biāo)記、細(xì)胞檢測等技術(shù)和產(chǎn)品為研發(fā)核心，產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于基因合成、細(xì)胞檢測、活體示蹤，抗體標(biāo)記、新藥篩選等領(lǐng)域。

美國AAT Bioquest公司是生物光譜領(lǐng)域全球領(lǐng)導(dǎo)者，產(chǎn)品暢銷全球。長年以來百螢生物與AAT Bioquest互補(bǔ)優(yōu)勢，為國內(nèi)外廣大用戶提供光譜檢測，底物顯色，熒光發(fā)光技術(shù)等全系列解決方案。近年來，百螢生物已與全球多家知名藥企、CRO公司、眾多高校及科研單位建立了長期穩(wěn)定的合作關(guān)系；我們的服務(wù)宗旨：不斷創(chuàng)新，為廣大科研用戶提供最優(yōu)質(zhì)的服務(wù)；主要分為以下幾個(gè)產(chǎn)品線：

a)開發(fā)和生產(chǎn)國際頂級熒光標(biāo)記探針和發(fā)光探針。這些熒光標(biāo)記探針和發(fā)光探針是用于標(biāo)記生物大分子例如，蛋白質(zhì)，核酸，碳水化合物的主要工具；
b)檢測蛋白質(zhì)，核酸和活細(xì)胞熒光和熒光探針；
c)新型各種酶活性熒光探針和發(fā)光探針(特別是用與研究蛋白酶，蛋白激酶和氧化還原酶熒光標(biāo)記探針和發(fā)光探針)；
d) 開發(fā)用于分子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)研究試劑和試劑盒；
e)生物鈣膜電位探針和神經(jīng)生物學(xué)熒光標(biāo)記探針和發(fā)光探針；

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