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                                                              English | 中文版 | 手機版 企業(yè)登錄 | 個人登錄 | 郵件訂閱
                                                              當前位置 > 產品目錄 > 試劑 > 免疫學/診斷檢測試劑 > 棒桿菌通用PCR試劑盒
                                                              棒桿菌通用PCR試劑盒
                                                              英文名稱:Corynebacteriumspp總訪問:418
                                                              國產/進口:國產半年訪問:6
                                                              產地/品牌:雅吉生物產品類別:免疫學/診斷檢測試劑
                                                              規(guī)       格:50T 最后更新:2025-1-2
                                                              貨       號:13-15800
                                                              CAS   號:
                                                              參考報價:2490
                                                              立即詢價 電話咨詢
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                                                              • 產品介紹
                                                              • 公司簡介
                                                              產品名稱:棒桿菌通用PCR試劑盒
                                                              產品規(guī)格:50T
                                                              產品運輸,-20℃保存,避免反復凍融,有效期一年。
                                                              限于網頁篇幅此處僅做簡要說明,如需詳細PDF文檔說明書,可聯系我們客服免費索取
                                                              使用本試劑盒提供的陽性對照時,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。最好在專門的區(qū)域操作。
                                                              適用儀器:ABI 系列、Bio-Rad系列、Agilent Stratagene MX系列 、Roche LightCycler R480、Cepheid SmartCycler、Rotor-Gene系列、杭州博日系列等多通道實時熒光定量PCR儀。
                                                              棒桿菌通用PCR試劑盒具有下列特點:
                                                              1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板。
                                                              2.根據指標保守區(qū)域設計引物和探針,能專一性地檢測出樣品中的指標成分,且不能檢測其他非成分。
                                                              3.提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
                                                              4.一管式閉管操作,降低了交叉污染。
                                                              本產品只能用于科研,足夠50次20uL 體系的熒光定量 PCR。
                                                              棒桿菌通用PCR試劑盒注意事項
                                                              1.整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
                                                              2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
                                                              3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
                                                              4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
                                                              5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
                                                              6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
                                                              7.儀器擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
                                                              8.ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
                                                              9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
                                                              棒桿菌通用PCR試劑盒操作步驟:
                                                              一、稀釋標準曲線樣品(以10E2-10E7拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
                                                              1.標記6個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
                                                              2.用帶芯槍頭分別加入45μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液,最好用帶芯槍頭,下同)。
                                                              3.在7號管中加入5μL陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
                                                              4.換槍頭,在6號管中加入5μL1×10E7 拷貝/μL  的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
                                                              5.換槍頭,在5號管中加入5μL1×10E6 拷貝/μL  的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
                                                              6.重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
                                                              二、樣品 DNA 的制備
                                                              7.用自選方法純化樣品的DNA,本產品跟市場上絕大多數核酸純化產品兼容。
                                                              8.如果有N個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
                                                              三、設置qPCR 反應(20μL體系,在樣品制備室進行)
                                                              9.如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 個PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 個PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照(用第一步稀釋得到的標準曲線系列稀釋液的第 4 號做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
                                                              10.在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復):
                                                              四、數據處理
                                                              11.如果把本試劑盒用于定量檢測,則以陽性對照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標準曲線。再以待測樣品的 Ct 值從標準曲線上推算出樣品 DNA 濃度的log 值,再推算出其濃度。
                                                              12.如果把本試劑盒用于定性檢測,只判斷陽性或陰性,則陰性對照 Ct 必須大于或等于 40。陽性對照必須有熒光對數增長,有典型擴增曲線,Ct  值應該小于或等于30。對待測樣品,如果其 Ct 大于或等于 40 則為陰性,如果小于或等于 35 則為陽性。如果在 35-40 之間,則重復一次。重復實驗的 Ct 值如果大于或等于 40 則為陰性,如果小于 40,則為陽性。
                                                              如需更多其他指標PCR試劑盒,可咨詢我公司定制:棒桿菌通用PCR試劑盒
                                                              bio-equip.com
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