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| 銷售商： 上海莼試生物技術(shù)有限公司 | 查看該公司所有產(chǎn)品 >> |
以下是細胞生物學試劑詳細說明：
Hoechst 33342染色液Hoechst 33342，也稱bisBenzimide H 33342或HOE 33342，是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料，對細胞的毒性較低。Hoechst 33342染色常用于細胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。Hoechst 33342也常用于普通的細胞核染色，或常規(guī)的DNA染色。Hoechst 33342的最大激發(fā)波長為346nm，最大發(fā)射波長為460nm;Hoechst 33342和雙鏈DNA結(jié)合后，最大激發(fā)波長為350nm，最大發(fā)射波長為46nm。本Hoechst 33342染色液為即用型，可直接用于固定細胞或組織的細胞核染色，也可直接用于活細胞或組織的細胞核染色。
使用說明：
使用前用生理鹽水或PBS將Hoechst 33342染色液稀釋00倍，即為工作液。
. 對于固定的細胞或組織：
a. 對于細胞或組織樣品，固定后，適當洗滌去除固定劑。隨后如果需要進行免疫熒光染色，則先進行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續(xù)步驟進行Hoechst 33342染色。如果不需要進行其它染色，則直接進行后續(xù)的Hoechst 33342染色。
b. 對于貼壁細胞或組織切片，加入少量Hoechst 33342工作液，覆蓋住樣品即可;對于懸浮細胞，至少加入待染色樣品3倍體積的工作液，混勻。室溫放置3-5分鐘。
c. 吸除Hoechst 33342染色液，用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5分鐘。
d. 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細胞發(fā)生凋亡時，會看到凋亡細胞的細胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染。
2. 對于活細胞或組織：
a. 加入適當量Hoechst 33342工作液，必須充分覆蓋住待染色的樣品，通常對于六孔板一個孔需加入mL工作液，對于96孔板一個孔需加入00μL工作液。
b. 在適宜于細胞培養(yǎng)的溫度下培養(yǎng)20-30分鐘。棄染色液，用PBS或培養(yǎng)液洗滌2-3次即可進行熒光檢測。
注意事項：
熒光染料都存在淬滅的問題，為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光衰減封片劑。建議染色后盡量當天完成檢測，活細胞或組織染色后應(yīng)立即觀察
注意事項
. 微量試劑取用前請離心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿防護服、戴手套等。
4. 本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數(shù)量不以應(yīng)低于×05，，不推薦用于檢測組織樣本。
5. 推薦使用懸浮培養(yǎng)細胞。如果是貼壁細胞，建議適用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不當，可能引起假陽性，而用細胞刮子會造成細胞粘連成團，而影響檢測�？蓪⒁让赶蠹毎谋４嬖诤�2%BSA 的PBS 中，防止進一步的損傷。
6. 細胞固定后可能導(dǎo)致熒光的淬滅，請不要固定樣品。
7. 因檢測細胞的類型、凋亡誘導(dǎo)劑種類、使用的檢測儀器不同，因而流式檢測的熒光補償也不同，因此建議每次檢測均需使用未經(jīng)凋亡誘導(dǎo)處理的細胞作為對照，進行熒光補償?shù)恼{(diào)節(jié)。
產(chǎn)品特點：
.離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進口世界著名公司特制吸附膜，柱與柱之間吸附量差異極小，可重復(fù)性好�？朔藝a(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。
2.使用了優(yōu)質(zhì)溶膠液，不含傳統(tǒng)溶膠液的碘化鈉和高氯酸鹽，不抑制回收后酶切、連接克隆等下游反應(yīng)。
3.獨特的溶膠液/結(jié)合液配方，將溶膠和結(jié)合兩種功能統(tǒng)一，因此一個試劑盒可以運用于瓊脂糖DNA回收、PCR產(chǎn)物清潔純化、酶切產(chǎn)物純化回收等多種情況，節(jié)省了需購買多種試劑盒的費用，
4.溶膠液/結(jié)合液調(diào)制成為了黃顏色，便于觀察溶膠效果和監(jiān)測pH值變化從而達到最佳結(jié)合效果，大大提高回收效率。
5.改進的溶膠液配方,大大提高了緩沖能力和穩(wěn)定性，即使樣品變化很大也能將PH緩沖在最佳結(jié)合范圍內(nèi)。
6.快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等試劑，也不需要乙醇沉淀。
①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來，吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的 完全細胞培養(yǎng)液，吹打下細胞，即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。000～2000g 離心 min，沉淀細胞，盡量去除胰酶細胞消化液后，加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細胞，即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
| 中文名稱 | Hoechst 33342染色液 |
| 英文名稱 | |
| 規(guī)格 | mL |
使用說明：
使用前用生理鹽水或PBS將Hoechst 33342染色液稀釋00倍，即為工作液。
. 對于固定的細胞或組織：
a. 對于細胞或組織樣品，固定后，適當洗滌去除固定劑。隨后如果需要進行免疫熒光染色，則先進行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續(xù)步驟進行Hoechst 33342染色。如果不需要進行其它染色，則直接進行后續(xù)的Hoechst 33342染色。
b. 對于貼壁細胞或組織切片，加入少量Hoechst 33342工作液，覆蓋住樣品即可;對于懸浮細胞，至少加入待染色樣品3倍體積的工作液，混勻。室溫放置3-5分鐘。
c. 吸除Hoechst 33342染色液，用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5分鐘。
d. 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細胞發(fā)生凋亡時，會看到凋亡細胞的細胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染。
2. 對于活細胞或組織：
a. 加入適當量Hoechst 33342工作液，必須充分覆蓋住待染色的樣品，通常對于六孔板一個孔需加入mL工作液，對于96孔板一個孔需加入00μL工作液。
b. 在適宜于細胞培養(yǎng)的溫度下培養(yǎng)20-30分鐘。棄染色液，用PBS或培養(yǎng)液洗滌2-3次即可進行熒光檢測。
注意事項：
熒光染料都存在淬滅的問題，為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光衰減封片劑。建議染色后盡量當天完成檢測，活細胞或組織染色后應(yīng)立即觀察
注意事項
. 微量試劑取用前請離心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿防護服、戴手套等。
4. 本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數(shù)量不以應(yīng)低于×05，，不推薦用于檢測組織樣本。
5. 推薦使用懸浮培養(yǎng)細胞。如果是貼壁細胞，建議適用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不當，可能引起假陽性，而用細胞刮子會造成細胞粘連成團，而影響檢測�？蓪⒁让赶蠹毎谋４嬖诤�2%BSA 的PBS 中，防止進一步的損傷。
6. 細胞固定后可能導(dǎo)致熒光的淬滅，請不要固定樣品。
7. 因檢測細胞的類型、凋亡誘導(dǎo)劑種類、使用的檢測儀器不同，因而流式檢測的熒光補償也不同，因此建議每次檢測均需使用未經(jīng)凋亡誘導(dǎo)處理的細胞作為對照，進行熒光補償?shù)恼{(diào)節(jié)。
產(chǎn)品特點：
.離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進口世界著名公司特制吸附膜，柱與柱之間吸附量差異極小，可重復(fù)性好�？朔藝a(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。
2.使用了優(yōu)質(zhì)溶膠液，不含傳統(tǒng)溶膠液的碘化鈉和高氯酸鹽，不抑制回收后酶切、連接克隆等下游反應(yīng)。
3.獨特的溶膠液/結(jié)合液配方，將溶膠和結(jié)合兩種功能統(tǒng)一，因此一個試劑盒可以運用于瓊脂糖DNA回收、PCR產(chǎn)物清潔純化、酶切產(chǎn)物純化回收等多種情況，節(jié)省了需購買多種試劑盒的費用，
4.溶膠液/結(jié)合液調(diào)制成為了黃顏色，便于觀察溶膠效果和監(jiān)測pH值變化從而達到最佳結(jié)合效果，大大提高回收效率。
5.改進的溶膠液配方,大大提高了緩沖能力和穩(wěn)定性，即使樣品變化很大也能將PH緩沖在最佳結(jié)合范圍內(nèi)。
6.快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等試劑，也不需要乙醇沉淀。
NacetylSgeranylgeranylLCysteine （25 mg） NacetylS（3，7，，tetramethyl2E，6E，0E，hexadecatetraenyl）Lcysteine； AGGC； NacetylSgeranylgeranylLCysteine
JW 55 （0 mg） N[4[[[[tetrahydro4（4methoxyphenyl）2Hpyran4yl]methyl]amino]carbonyl]phenyl]2furancarboxamide
Oxamflatin （ mg） Nhydroxy5[3[（phenylsulfonyl）amino]phenyl]2Epenten4ynamide； Metacept 3； Oxamflatin
Batimastat （5 mg） BB； （2R,3S）N4hydroxyN[（S）2（methylamino）2oxo（phenylmethyl）ethyl]2（2methylpropyl）3[（2thienylthio）methyl]butanediamide
Ponceau S （sodium salt） （25 g） 3hydroxy4[2[2sulfo4[2（4sulfophenyl）diazenyl]phenyl]diazenyl]2，7naphthalenedisulfonic acid， tetrasodium salt； Acid Red ； Ponceau S （sodium salt）
DiaEasy Dialyzer (0 ml) MWCO 3.5 kDa DiaEasy Dialyzer (0 ml) MWCO 3.5 kDa
三醇，英文名或英文縮寫：Glycerine，級別：BR，90%，規(guī)格：25克
GDX 05(聚二本多孔小球)NA
Ammoniummolybdatetetrahydrate四水合鉬酸克BR，98%
,2,4本三加醋 ,2,4Bqnzqnqtriccrboxylic ccid 284
礦物油 Minqrcl Oil 80
Fuchsinbasic品紅250毫克生物技術(shù)級，%，柑橘來源
052235利塞膦酸相關(guān)物質(zhì)ARisedronate Related CoMpound A;[xy7noxy2(2pyridinyl)etxylidene]bis(phosphonic acid)
MTPA半乳糖二酸00毫克BR，99%
酸鈉 Sodium iodate,≥99% 2 00G 通用試劑
二叔酰 2,2,6,6Tetramethyl3,5heptanedione,... 7 5G 通用試劑
小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP4)ELISA試劑盒 ，英文名： IGFBP4 ELISA Kit
兔子S00B蛋白(S-00B)ELISA檢測試劑盒rabbitSolubleprotein-00B,S-00BELISAKit 96T/48T
犬肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)免疫試劑盒 Canine heparin cofactor Ⅱ,HCⅡELISA Kit
英文名稱HumanICAM-2/sCD02ELISAKit人細胞間粘附分子-2(ICAM-2/sCD02)規(guī)格：96T/48T
大量蛋白樣品液相法去內(nèi)毒素試劑盒5次
RatIerleukin4,IL-4ELISA試劑盒大鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠α-抗胰蛋白酶(αAT)ELISA試劑盒 ，英文名： αAT ELISA Kit
人膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA檢測試劑盒Humancholesterolesteransferprotein,CETPELISAKit 96T/48T
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)免疫試劑盒 Rat tissue inhibitors of metalloproteinase 2,TIMP-2 ELISA Kit
英文名稱RatCD63ELISAKit大鼠CD63規(guī)格：96T/48T
空腸彎曲菌(Campylobacterjejuni)鑒定6SrDNAPCR擴增檢測試劑盒20次
ELISAKitSyk人脾臟酪氨酸激酶規(guī)格：48T/96T
Hoechst 33342染色液操作步驟：
、貼壁細胞的消化JW 55 （0 mg） N[4[[[[tetrahydro4（4methoxyphenyl）2Hpyran4yl]methyl]amino]carbonyl]phenyl]2furancarboxamide
Oxamflatin （ mg） Nhydroxy5[3[（phenylsulfonyl）amino]phenyl]2Epenten4ynamide； Metacept 3； Oxamflatin
Batimastat （5 mg） BB； （2R,3S）N4hydroxyN[（S）2（methylamino）2oxo（phenylmethyl）ethyl]2（2methylpropyl）3[（2thienylthio）methyl]butanediamide
Ponceau S （sodium salt） （25 g） 3hydroxy4[2[2sulfo4[2（4sulfophenyl）diazenyl]phenyl]diazenyl]2，7naphthalenedisulfonic acid， tetrasodium salt； Acid Red ； Ponceau S （sodium salt）
DiaEasy Dialyzer (0 ml) MWCO 3.5 kDa DiaEasy Dialyzer (0 ml) MWCO 3.5 kDa
三醇，英文名或英文縮寫：Glycerine，級別：BR，90%，規(guī)格：25克
GDX 05(聚二本多孔小球)NA
Ammoniummolybdatetetrahydrate四水合鉬酸克BR，98%
,2,4本三加醋 ,2,4Bqnzqnqtriccrboxylic ccid 284
礦物油 Minqrcl Oil 80
Fuchsinbasic品紅250毫克生物技術(shù)級，%，柑橘來源
052235利塞膦酸相關(guān)物質(zhì)ARisedronate Related CoMpound A;[xy7noxy2(2pyridinyl)etxylidene]bis(phosphonic acid)
MTPA半乳糖二酸00毫克BR，99%
酸鈉 Sodium iodate,≥99% 2 00G 通用試劑
二叔酰 2,2,6,6Tetramethyl3,5heptanedione,... 7 5G 通用試劑
小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP4)ELISA試劑盒 ，英文名： IGFBP4 ELISA Kit
兔子S00B蛋白(S-00B)ELISA檢測試劑盒rabbitSolubleprotein-00B,S-00BELISAKit 96T/48T
犬肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)免疫試劑盒 Canine heparin cofactor Ⅱ,HCⅡELISA Kit
英文名稱HumanICAM-2/sCD02ELISAKit人細胞間粘附分子-2(ICAM-2/sCD02)規(guī)格：96T/48T
大量蛋白樣品液相法去內(nèi)毒素試劑盒5次
RatIerleukin4,IL-4ELISA試劑盒大鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠α-抗胰蛋白酶(αAT)ELISA試劑盒 ，英文名： αAT ELISA Kit
人膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA檢測試劑盒Humancholesterolesteransferprotein,CETPELISAKit 96T/48T
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)免疫試劑盒 Rat tissue inhibitors of metalloproteinase 2,TIMP-2 ELISA Kit
英文名稱RatCD63ELISAKit大鼠CD63規(guī)格：96T/48T
空腸彎曲菌(Campylobacterjejuni)鑒定6SrDNAPCR擴增檢測試劑盒20次
ELISAKitSyk人脾臟酪氨酸激酶規(guī)格：48T/96T
Hoechst 33342染色液操作步驟：
①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來，吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的 完全細胞培養(yǎng)液，吹打下細胞，即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。000～2000g 離心 min，沉淀細胞，盡量去除胰酶細胞消化液后，加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細胞，即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
手機版：Hoechst 33342染色液
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