CRISPR是繼RNA干擾技術(shù)、高通量測(cè)序技術(shù)等之后生物科學(xué)發(fā)展歷史上最具顛覆性技術(shù)之一,使用高效、迅速且簡(jiǎn)單,在生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域引起一場(chǎng)巨變,并因此成為生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室常規(guī)技術(shù)。隨著CRISPR基因治療臨床實(shí)驗(yàn)的初步成功,以及2018年的基因編輯嬰兒事件預(yù)熱,CRISPR技術(shù)被越來(lái)越多的研究人員用來(lái)改造人類基因以消除疾病,創(chuàng)造生命力更加頑強(qiáng)的植物,消滅病原體等。在過去的7年中CRISPR技術(shù)斬獲了生命科學(xué)領(lǐng)域各種重量級(jí)獎(jiǎng)項(xiàng),包括生命科學(xué)突破獎(jiǎng),蓋爾德納國(guó)際獎(jiǎng)等,《Science》年度突破、《Nature》年度人物均授予了CRISPR單堿基基因編輯技術(shù)的突破,2019年9月,北京大學(xué)鄧宏魁組完成世界首例基因編輯治療艾滋病和白血病,使CRISPR技術(shù)再一次成為生命科學(xué)的焦點(diǎn)。
隨著近幾年的發(fā)展,研究者開發(fā)出越來(lái)越多基于CRISPR的新型基因編輯技術(shù),例如CRISPR轉(zhuǎn)錄激活/抑制技術(shù),基因定位,表觀遺傳修飾,單堿基基因編輯系統(tǒng)(BE2,BE3,ABE等),CRISPR基因突變檢測(cè)系統(tǒng)(Sherlock、DETECTR),無(wú)修復(fù)模板基因敲入技術(shù)等。CRISPR/Cas9系統(tǒng)的應(yīng)用更加便捷、高效,也更廣泛,目前該技術(shù)成功應(yīng)用于人類細(xì)胞、斑馬魚、小鼠以及細(xì)菌等基因組精確修飾,成為科研人員的強(qiáng)大工具,基于CRISPR臨床實(shí)驗(yàn)已經(jīng)取得初步成功。
為了讓更多的科研人員及時(shí)全面的掌握CRISPR最新技術(shù),并應(yīng)用的相應(yīng)的領(lǐng)域研究中。特于2019年12月21日至22日在北京理工大學(xué)國(guó)際教育交流中心舉辦CRISPR/Cas9基因靶向修飾技術(shù)培訓(xùn)班。在帶教教師的指導(dǎo)下,學(xué)員獨(dú)立完成一系列全部實(shí)驗(yàn),免費(fèi)獲得三份CRISPR/Cas9敲除質(zhì)粒載體(可以用于哺乳動(dòng)物、植物、真菌、細(xì)菌、斑馬魚、線蟲等,共60種)。免費(fèi)贈(zèng)送sgRNA離線設(shè)計(jì)軟件(有基因組DNA序列即可設(shè)計(jì)。
課程安排:
日期 | 時(shí)間 | 培訓(xùn)內(nèi)容 | 授課老師 |
12月20日 | 10:00-18:00 | 培訓(xùn)報(bào)到 | 劉剛博士 2008年博士畢業(yè)于中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院,從事腫瘤干細(xì)胞,細(xì)胞衰老,腫瘤轉(zhuǎn)移等細(xì)胞作用網(wǎng)絡(luò)和通路的研究,并作為骨干研究人員參加了973計(jì)劃項(xiàng)目、國(guó)家自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目、在香港中文大學(xué)做為作為Postdoc和Research fellow,從事研究工作。先后Nature Genetics,cell research、PLOS one等期刊發(fā)表論文十余篇。 |
12月21日 | 9:00-11:30 | 理論講解: 一、基因編輯技術(shù)簡(jiǎn)介(三代基因編輯工具) 1. ZFN 2.TALEN 3.CRISPR 二、CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)原理 1. CRISPR/Cas9發(fā)現(xiàn)歷史 2. CRISPR/Cas9作用機(jī)制解析 3. CRISPR/Cas9系統(tǒng)改造策略 | |
13:00-17:00 | 理論講解: 一、sgRNA在線設(shè)計(jì)構(gòu)建實(shí)戰(zhàn)演練(1.靶基因序列查找2.sgRNA在線設(shè)計(jì)合成) 二、CRISPR/Cas9轉(zhuǎn)染策略: 1.生物轉(zhuǎn)染(慢病毒、腺相關(guān)病毒等) 2.物理轉(zhuǎn)染 (電轉(zhuǎn)核酸/RNP、顯微注射、基因槍) 3.化學(xué)轉(zhuǎn)染 (脂質(zhì)體、陽(yáng)離子聚合物) 三、CRISPR/Cas9 sgRNA效率檢測(cè),脫靶檢測(cè)及解決策略 1、高保真Cas9(espCas9、Hifi-Cas9、Cluster1-Cas9) | ||
12月22日 | 9:00-11:30 | 理論講解: 一、CRISPR技術(shù)應(yīng)用解析 1.基因敲除(單基因敲除、多基因敲除、大片段刪除、多靶點(diǎn)sgRNA載體構(gòu)建策略) 2.基因敲入實(shí)戰(zhàn)演練(gRNA選擇、同源臂設(shè)計(jì)、導(dǎo)入,長(zhǎng)片段導(dǎo)入策略/提高基因敲入效率策略,PITCh、HITI、CRISPR-轉(zhuǎn)座酶高效基因敲入系統(tǒng)) 3.CRISPR在轉(zhuǎn)錄調(diào)控中的應(yīng)用(轉(zhuǎn)錄激活、轉(zhuǎn)錄抑制系統(tǒng)) 4.CRISPR靶基因標(biāo)記定位 二、CRISPR案例解析 1.基因敲除在小鼠模型構(gòu)建、植物、細(xì)胞、細(xì)菌、真菌等中的應(yīng)用案例解析 2.基于CRISPR的全基因組基因敲除高通量篩選策略(文庫(kù)構(gòu)建,選擇,流程優(yōu)化等) 3.基于CRISPR的全基因組轉(zhuǎn)錄激活/抑制高通量篩選策略(文庫(kù)構(gòu)建,選擇,流程優(yōu)化等) 三、CRISPR/Cas9與基因沉默技術(shù)(siRNA、shRNA)系統(tǒng)比較。 | |
13:00-17:00 | 理論講解: 一、單堿基基因編輯技術(shù)簡(jiǎn)介及在基因治療中的應(yīng)用 1.HF2-BE2 2.BE3系統(tǒng) 3.ABE系統(tǒng)4.單堿基基因編輯脫靶克服。 二、基因CRISPR的基因檢測(cè)系統(tǒng) 1、CRISPR-Cas12a系統(tǒng)介紹(DETECTR) 2、CRISPR-Cas13a系統(tǒng)介紹(SHERLOCK-多重病原菌檢測(cè)) 三、CRISPR/Cas9系統(tǒng)在腫瘤和遺傳病治療中應(yīng)用解析 1、CRISPR結(jié)合免疫檢查點(diǎn)抑制劑治療腫瘤 2、單基因遺傳病治療(DMD、先天性黑朦、地中海貧血等) 3、CRISPR治療HIV-基因編輯嬰兒解析 4、CRISPR治療HIV炎性白血病病例解析 四、新一代無(wú)模板基因敲入系統(tǒng)解析
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日期 | 時(shí)間 | 培訓(xùn)內(nèi)容 |
12月22日 | 18:00 | 實(shí)驗(yàn)操作:CRISPR/Cas9敲除質(zhì)粒轉(zhuǎn)染靶細(xì)胞 |
12月23日 | 9:00-11:30 | 實(shí)驗(yàn)操作:一、CRISPR/Cas9基因表達(dá)載體克隆構(gòu)建1.sgRNA設(shè)計(jì)合成 2.敲除載體選擇及線性化 3.sgRNA連接,轉(zhuǎn)化等 |
13:00-17:00 | 實(shí)驗(yàn)操作: 1.CRISPR/Cas9轉(zhuǎn)染后靶DNA檢測(cè) 2.靶基因修飾位點(diǎn)擴(kuò)增及鑒定 3. CRISPR基因敲除效果檢測(cè) |
舉辦地點(diǎn):
北京理工大學(xué)國(guó)際教育交流中心(海淀區(qū)北三環(huán)西路66號(hào))
參加對(duì)象
從事醫(yī)學(xué)、生命科學(xué)、農(nóng)學(xué)等領(lǐng)域科研工作者和高校教師及研究生。
授課方式
1.理論講授。
2.每位學(xué)員在輔導(dǎo)教師的指導(dǎo)下,獨(dú)立完成實(shí)驗(yàn)操作。(可選)
收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)
注冊(cè)費(fèi):3200元/人,2019年12月13號(hào)之前匯款報(bào)名可以優(yōu)惠至:3000元/人。實(shí)驗(yàn)操作課程需加500元/人。同一個(gè)單位三個(gè)人以上報(bào)名可以免費(fèi)構(gòu)建價(jià)值1500元的質(zhì)粒一個(gè);包括學(xué)費(fèi)、資料費(fèi)、試劑耗材費(fèi)、其他材料費(fèi);免費(fèi)提供工作午餐,可協(xié)助安排住宿,住宿費(fèi)用自理。
推薦酒店地點(diǎn):
北京理工大學(xué)國(guó)際教育交流中心360元/標(biāo)間。
銀行匯款
北京微旋基因技術(shù)有限公司
開戶行: 中國(guó)建設(shè)銀行北京宣武支行
賬 號(hào):11001019500053058529
備 注:銀行轉(zhuǎn)賬的學(xué)員,請(qǐng)于匯款單備注欄內(nèi)注明參會(huì)人姓名
聯(lián)系人
鄭老師 010- 53516075 sales@micro-helix.com
請(qǐng)?zhí)顚懸韵聢?bào)名回執(zhí)并發(fā)送至上方郵箱。
承辦單位:
北京微旋基因技術(shù)有限公司
舉辦時(shí)間:
2019年12月21日至22日