 |
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ForteBio公司成立于2004年，總部位于美國(guó)硅谷，2012年正式加入Pall公司。自成立以來(lái)，公司一直致力于非標(biāo)記實(shí)時(shí)分析技術(shù)的研發(fā)，應(yīng)用獨(dú)有的生物膜干涉技術(shù)(BLI)，專業(yè)提供國(guó)際領(lǐng)先的生物分子相互作用分析儀以及配套使用的耗材和試劑。目前Fortebio公司已成為全球排名第二的專業(yè)非標(biāo)記技術(shù)廠商，全球用戶超過(guò)八百多個(gè)，其中不乏排名前十的世界知名藥物公司。相對(duì)于其他傳統(tǒng)生物傳感器設(shè)備，F(xiàn)orteBio憑借其獨(dú)到的產(chǎn)品技術(shù)和靈活的實(shí)驗(yàn)方案，已經(jīng)成為市場(chǎng)上通量最高，使用成本最低，操作維護(hù)最簡(jiǎn)單的新一代非標(biāo)記實(shí)時(shí)分析技術(shù)。
ForteBio的Octet分子相互作用分析系統(tǒng)是一種非標(biāo)記的、實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)的先進(jìn)技術(shù)，主要用于生物分子間相互作用的全方位定量分析以及蛋白濃度測(cè)定。該平臺(tái)通過(guò)浸試即讀的檢測(cè)方式（Dip and ReadTM），大幅提高了檢測(cè)通量。設(shè)備操作簡(jiǎn)單易學(xué)，可以對(duì)實(shí)驗(yàn)流程進(jìn)行靈活的優(yōu)化，使得用戶能在數(shù)分鐘內(nèi)就可以獲得大量的可靠數(shù)據(jù)。在眾多的應(yīng)用領(lǐng)域中，Octet系統(tǒng)可以作為ELISA、HPLC以及SPR等傳統(tǒng)分析方法的有效替代手段。 Octet系統(tǒng)的蛋白濃度定量和生物分子相互作用動(dòng)力學(xué)參數(shù)測(cè)定（Kon,Koff和KD）,可以為藥物早期研發(fā)過(guò)程提供重要的信息；同時(shí)，高通量的分析檢測(cè)可以大幅加快研發(fā)進(jìn)程。它不僅可以運(yùn)用于早期的研發(fā)和篩選以及晚期的臨床試驗(yàn)，還可以用于藥物生產(chǎn)過(guò)程的監(jiān)測(cè)和產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)控。由于Octet系統(tǒng)擯棄了傳統(tǒng)的微流控制系統(tǒng)，所以可以更好的適用于各種粗制樣品檢測(cè)；同時(shí)它的高通量特性使得其更加適用于抗體和化合物庫(kù)的篩選。  |
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Octet系統(tǒng)所運(yùn)用的生物膜干涉技術(shù)，是一種非標(biāo)記技 術(shù)，可實(shí)時(shí)提供高通量的生物分子相互作用信息。此技術(shù)采用探針式生物傳感器對(duì)樣品直接進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)檢測(cè)樣品無(wú)需做任何熒光或同位素標(biāo)記。通過(guò)儀器發(fā)射白光到傳感器表面并收集反射光，不同頻率的反射光譜受到生物傳感器的光膜層厚度的影響，一些頻率的 反射光形成了相長(zhǎng)干涉（藍(lán)色），而另一些受到了相消干涉（紅色）。這些干涉被光譜儀所檢測(cè)到，并形成一幅干涉光譜，并以干涉光譜的相位位移強(qiáng)度（nm）顯示。因此，結(jié)合到傳感器表面的分子一旦有數(shù)量上的增減，光譜儀便會(huì)實(shí)時(shí)地檢測(cè)到干涉 光譜的位移，而這種位移可直接反應(yīng)出傳感器表面生物膜的厚度及密度變化，從而對(duì)待測(cè)分子間的相互作用過(guò)程進(jìn)行精確的定量測(cè)定。
生物膜干涉技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Octet平臺(tái)可以對(duì)抗體和其他蛋白進(jìn)行快速濃度測(cè)定，這使得該平臺(tái)可以用于表達(dá)庫(kù)的篩選、上游與下游的生產(chǎn)過(guò)程控制和生物學(xué)治療中生物標(biāo)記物的濃度定量測(cè)定。由于Octet采用浸入即讀式生物傳感器技術(shù)，可直接測(cè)定各類樣品眾活性蛋白的濃度，且確保嚴(yán)格的變異系數(shù)（CV）和寬泛的動(dòng)態(tài)范圍，而無(wú)需額外的昂貴檢測(cè)試劑。目前，Octet系統(tǒng)已被廣泛應(yīng)用在藥物代謝動(dòng)力學(xué)和藥物效應(yīng)動(dòng)力學(xué)、免疫原性分析、生產(chǎn)工藝開(kāi)發(fā)以及質(zhì)量控制等方面。
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
無(wú)論是在藥物研發(fā)還是生產(chǎn)階段，抗體分子或其他蛋白的動(dòng)力學(xué)分析對(duì)于表征和篩選克隆來(lái)說(shuō)都是至關(guān)重要的。Octet系統(tǒng)一改傳統(tǒng)的微流控檢測(cè)方式，采用傳感器直接浸入樣品并實(shí)時(shí)讀取數(shù)據(jù)的全新方法，可快速準(zhǔn)確的檢測(cè)抗體和抗原間的動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)。這樣可以為抗體藥物的篩選、過(guò)程優(yōu)化以及疫苗的研發(fā)中盡早提供重要的信息，幫助客戶盡早作出正確的判斷。
抗體和抗原的結(jié)合傳感圖，通過(guò)檢測(cè)系列濃度的抗原可確定其和抗體間的親和力以及結(jié)合速率常數(shù)
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
 |
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Octet系統(tǒng)不僅可以對(duì)生物大分子進(jìn)行快速表征，對(duì)于小分子化合物以及分子片段，Octet同樣可以提供高質(zhì)量的數(shù)據(jù)，實(shí)現(xiàn)基于藥物靶點(diǎn)的先導(dǎo)化合物的檢測(cè)和篩選。通過(guò)對(duì)候選分子的親和力和解離速率檢測(cè)，對(duì)先導(dǎo)化合物進(jìn)行有效的鑒定和確認(rèn)，以避免因非特異性結(jié)合而導(dǎo)致產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果。
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
左圖為小分子化合物Furosemide（MW=330D）和碳酸酐酶Carbonic Anhydrase的結(jié)合數(shù)據(jù)，和碳酸酐酶的親和力較強(qiáng)，KD=1.2uM。 而右圖為另一個(gè)小分子Sulpiride (MW=341Da)和碳酸酐酶的結(jié)合數(shù)據(jù)，親和力較弱，KD=239uM。無(wú)論親和力是較強(qiáng)還是較弱的小分子樣品，Octet都可以進(jìn)行準(zhǔn)確檢測(cè)。
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
 |
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
儀器種類和特性
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
